- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
Acetylcholinesterase is a critical
Acetylcholinesterase is a critical enzyme for synaptic transmission
both between neurons at cholinergic synapses and across neuromuscular
junctions (Soreq and Seidman, 2001). These activities underliemany
of the essential biological functions, such as heartbeat, respiration,
digestion, and brain activity. In addition to its established role inmature
nervous systems, AChEmay also have significant roles in neural system
development, although these effects are not fully understood (Soreq
and Seidman, 2001).
Several classes of small molecules modulate the activity of AChE –
including organophosphate nerve agents and pesticides (Bajgar et al.,
2009; Casida, 2009; Costa, 2006), carbamates (Bajgar et al., 2009)
(Fig. 1A, B and C) and other small molecules (Bourne et al., 2004;
Komloova et al., 2010), and they have varying effects (Grob, 1956).
Organophosphates inhibit AChE through covalent modification of the
active site serine with a phosphonate, phosphoamidate or phosphate
moiety (Costa, 2006; Kropp and Richardson, 2007). Generally, organophosphate
inhibition of AChE is irreversible, except when an AChE
reactivator, such as 2-pralidoxime (2-PAM), is administered soon after
exposure (Worek et al., 2013; Costa et al., 2011). In contrast, AChE can
be readily reactivated following inhibition by a carbamate. Carbamates
PB, NB and PS act on AChE by transfer of a carbamoyl group to the active
site serine as illustrated in Fig. 1D. The resultant carbamoyl-serine is
hydrolyzed by water with a half-life of several hours, depending upon the specific carbamate, and the decarbamylation rate can be increased
by addition of an oxime (Harris et al., 1987; Dawson, 1995). After
AChE reactivation, the degraded carbamate molecule is no longer
capable of AChE inhibition. As such, the current prophylactic regimen
for warfighters includes daily dosing with a carbamate (PB), which
acts to hold a portion of the available AChE in reserve and protect it
from inhibition by an organophosphate nerve agent. When a soldier is
exposed to a nerve agent, he or she then self-administers a dose of 2-
PAM via auto-injector that rapidly reactivates OP-bound AChE and
speeds the reactivation of the carbamate-bound AChE reservoir,
enabling a warfighter to survive the attack. The auto-injector also
includes atropine, a muscarinic acetylcholine receptor antagonist, to
mitigate the effects of cholinergic overstimulation that accompanies
nerve agent exposure.
In addition to their utility as nerve agent prophylactics, carbamate
drugs are also used as treatments formyasthenia gravis and Alzheimer'sand
Parksinson's-related dementia (Van Der Putt et al., 2006; Imbimbo
et al., 1999; De Sarno and Giacobini, 1989; Darreh-Shori and Jelic,
2010). Secondary targets of AChE inhibitors, such as other serine hydrolase
enzymes (Vose et al., 2007; Quistad et al., 2006) and acetylcholine
receptors (AChRs) (Silveira et al., 1990; Katz et al., 1997), have been implicated
in the non-cholinergic effects of AChE inhibitors (De Sarno and
Giacobini, 1989; Lotti and Moretto, 2006). In the case of pyridostigmine
bromide (PB), secondary effects of this carbamate AChE inhibitor have
been linked to the development of Gulf War Syndrome (Golomb,
2008a; Amourette et al., 2009), though these findings are still debated
(Golomb, 2008b; Blazer et al., 2008). Even though many molecules in
these families are commercially-used drugs or pesticides, there is still
incomplete understanding of their mechanisms of action.
We aimed to develop a zebrafish model for rapid toxicological
screening and mechanistic investigation of carbamate AChE inhibitors
as a first step toward developing rapid whole-animal protocols for
evaluation the drug combinations used to treat nerve agent poisoning.
The zebrafish (Danio rerio) has been used to investigate chemicals
affecting synapse-associated enzymes and receptors (Hanneman
and Westerfield, 1989; Behra et al., 2002, 2004). As a model organism,
zebrafish have a number of advantages relative tomammaliammodels.
A key feature of zebrafish for the study of the cholinergic system is that
AChE is the only known ACh-hydrolyzing enzyme present in the organism
(Hanneman and Westerfield, 1989). In addition, carboxylesterase
activity is minimally affected by PB and related carbamates (Shaikh
and Pope, 2003; Maxwell et al., 1988; Gupta and Dettbarn, 1993).
Zebrafish embryos have rapid ex utero development and can be generated
in large quantities for high-throughput experiments. The embryos
maintain optical clarity through 5 days post fertilization (dpf), which
facilitates imaging studies. Additionally, a large number of transgenic
lines are available for mutational studies.
Zebrafish have been previously used for evaluation of neuroeffective
small molecules. Chlorpyrifos, an organophosphate pesticide
and irreversible AChE inhibitor, elicits neurobehavioral effects and
corresponding impairment of sensory neuron development in zebrafish
(Levin et al., 2003; Jacobson et al., 2010). Treatment of zebrafish with
edrophonium or tacrine, both FDA-approved drugs and reversible
AChE inhibitors, causes sensory neuron mislocalization However, the neuro-developmental effects carbamate AChE
inhibitors have yet to be characterized in the zebrafish model.
In the current study, we evaluated the toxicity and developmental
effects of PB, NB, and PS (Fig. 1) on zebrafish embryos. PB and NB
are generally not centrally bioavailable due to their positive charges
(Amourette et al., 2009). They are also poorly absorbed across the gut
(Pyridostigmine Bromide, 2003). However, PS lacks a positivelycharged
nitrogen and readily crosses the blood–brain-barrier (BBB)
(Yu et al., 2010). We assessed survival and phenotypic perturbations
following 5 day exposure in order to determine the optimal sub-lethal
treatment conditions for follow-up developmental studies.Motility impairment
and AChE enzyme inhibition were quantified in treated
zebrafish embryos, and we investigated the effects of carbamate treatment
on four critical stages of motor neuron development: neuron formation,
axon migration, arborization and synapse formation. The
neurodevelopmental effects of the three carbamates described here
may have significance for understanding the developmental neurotoxicity
of carbamate pesticides (Vidair, 2004).
both between neurons at cholinergic synapses and across neuromuscular
junctions (Soreq and Seidman, 2001). These activities underliemany
of the essential biological functions, such as heartbeat, respiration,
digestion, and brain activity. In addition to its established role inmature
nervous systems, AChEmay also have significant roles in neural system
development, although these effects are not fully understood (Soreq
and Seidman, 2001).
Several classes of small molecules modulate the activity of AChE –
including organophosphate nerve agents and pesticides (Bajgar et al.,
2009; Casida, 2009; Costa, 2006), carbamates (Bajgar et al., 2009)
(Fig. 1A, B and C) and other small molecules (Bourne et al., 2004;
Komloova et al., 2010), and they have varying effects (Grob, 1956).
Organophosphates inhibit AChE through covalent modification of the
active site serine with a phosphonate, phosphoamidate or phosphate
moiety (Costa, 2006; Kropp and Richardson, 2007). Generally, organophosphate
inhibition of AChE is irreversible, except when an AChE
reactivator, such as 2-pralidoxime (2-PAM), is administered soon after
exposure (Worek et al., 2013; Costa et al., 2011). In contrast, AChE can
be readily reactivated following inhibition by a carbamate. Carbamates
PB, NB and PS act on AChE by transfer of a carbamoyl group to the active
site serine as illustrated in Fig. 1D. The resultant carbamoyl-serine is
hydrolyzed by water with a half-life of several hours, depending upon the specific carbamate, and the decarbamylation rate can be increased
by addition of an oxime (Harris et al., 1987; Dawson, 1995). After
AChE reactivation, the degraded carbamate molecule is no longer
capable of AChE inhibition. As such, the current prophylactic regimen
for warfighters includes daily dosing with a carbamate (PB), which
acts to hold a portion of the available AChE in reserve and protect it
from inhibition by an organophosphate nerve agent. When a soldier is
exposed to a nerve agent, he or she then self-administers a dose of 2-
PAM via auto-injector that rapidly reactivates OP-bound AChE and
speeds the reactivation of the carbamate-bound AChE reservoir,
enabling a warfighter to survive the attack. The auto-injector also
includes atropine, a muscarinic acetylcholine receptor antagonist, to
mitigate the effects of cholinergic overstimulation that accompanies
nerve agent exposure.
In addition to their utility as nerve agent prophylactics, carbamate
drugs are also used as treatments formyasthenia gravis and Alzheimer'sand
Parksinson's-related dementia (Van Der Putt et al., 2006; Imbimbo
et al., 1999; De Sarno and Giacobini, 1989; Darreh-Shori and Jelic,
2010). Secondary targets of AChE inhibitors, such as other serine hydrolase
enzymes (Vose et al., 2007; Quistad et al., 2006) and acetylcholine
receptors (AChRs) (Silveira et al., 1990; Katz et al., 1997), have been implicated
in the non-cholinergic effects of AChE inhibitors (De Sarno and
Giacobini, 1989; Lotti and Moretto, 2006). In the case of pyridostigmine
bromide (PB), secondary effects of this carbamate AChE inhibitor have
been linked to the development of Gulf War Syndrome (Golomb,
2008a; Amourette et al., 2009), though these findings are still debated
(Golomb, 2008b; Blazer et al., 2008). Even though many molecules in
these families are commercially-used drugs or pesticides, there is still
incomplete understanding of their mechanisms of action.
We aimed to develop a zebrafish model for rapid toxicological
screening and mechanistic investigation of carbamate AChE inhibitors
as a first step toward developing rapid whole-animal protocols for
evaluation the drug combinations used to treat nerve agent poisoning.
The zebrafish (Danio rerio) has been used to investigate chemicals
affecting synapse-associated enzymes and receptors (Hanneman
and Westerfield, 1989; Behra et al., 2002, 2004). As a model organism,
zebrafish have a number of advantages relative tomammaliammodels.
A key feature of zebrafish for the study of the cholinergic system is that
AChE is the only known ACh-hydrolyzing enzyme present in the organism
(Hanneman and Westerfield, 1989). In addition, carboxylesterase
activity is minimally affected by PB and related carbamates (Shaikh
and Pope, 2003; Maxwell et al., 1988; Gupta and Dettbarn, 1993).
Zebrafish embryos have rapid ex utero development and can be generated
in large quantities for high-throughput experiments. The embryos
maintain optical clarity through 5 days post fertilization (dpf), which
facilitates imaging studies. Additionally, a large number of transgenic
lines are available for mutational studies.
Zebrafish have been previously used for evaluation of neuroeffective
small molecules. Chlorpyrifos, an organophosphate pesticide
and irreversible AChE inhibitor, elicits neurobehavioral effects and
corresponding impairment of sensory neuron development in zebrafish
(Levin et al., 2003; Jacobson et al., 2010). Treatment of zebrafish with
edrophonium or tacrine, both FDA-approved drugs and reversible
AChE inhibitors, causes sensory neuron mislocalization However, the neuro-developmental effects carbamate AChE
inhibitors have yet to be characterized in the zebrafish model.
In the current study, we evaluated the toxicity and developmental
effects of PB, NB, and PS (Fig. 1) on zebrafish embryos. PB and NB
are generally not centrally bioavailable due to their positive charges
(Amourette et al., 2009). They are also poorly absorbed across the gut
(Pyridostigmine Bromide, 2003). However, PS lacks a positivelycharged
nitrogen and readily crosses the blood–brain-barrier (BBB)
(Yu et al., 2010). We assessed survival and phenotypic perturbations
following 5 day exposure in order to determine the optimal sub-lethal
treatment conditions for follow-up developmental studies.Motility impairment
and AChE enzyme inhibition were quantified in treated
zebrafish embryos, and we investigated the effects of carbamate treatment
on four critical stages of motor neuron development: neuron formation,
axon migration, arborization and synapse formation. The
neurodevelopmental effects of the three carbamates described here
may have significance for understanding the developmental neurotoxicity
of carbamate pesticides (Vidair, 2004).
0/5000
Acetylcholinesterase เป็นเอนไซม์สำคัญในการส่งผ่าน synapticทั้งระหว่าง neurons ที่ cholinergic synapses และกล้ามjunctions (Soreq และ Seidman, 2001) Underliemany กิจกรรมเหล่านี้ของฟังก์ชันชีวภาพสำคัญ เช่นฮาร์ทบีท หายใจย่อยอาหาร และกิจกรรมของสมอง นอกจากบทบาทของมันขึ้น inmatureระบบประสาท AChEmay ยังมีบทบาทสำคัญในระบบประสาทพัฒนา ถึงแม้ว่าผลกระทบเหล่านี้จะไม่เข้าใจ (Soreq เต็มก Seidman, 2001)การปวด – modulate หลายชั้นของโมเลกุลขนาดเล็กรวมทั้งตัวแทนประสาท organophosphate และสารกำจัดศัตรูพืช (Bajgar et al.,2009 Casida, 2009 คอสต้า 2006) carbamates (Bajgar et al., 2009)(Fig. 1A, B และ C) และโมเลกุลขนาดเล็กอื่น ๆ (บอร์น et al., 2004Komloova et al., 2010), และมีลักษณะพิเศษแตกต่างกัน (กรอบ 1956)Organophosphates ยับยั้งการปวด โดยการปรับเปลี่ยน covalentใช้แถกับ phosphonate, phosphoamidate หรือฟอสเฟตmoiety (คอสตา 2006 Kropp และริชาร์ดสัน 2007) ทั่วไป organophosphateยับยั้งการปวดได้ให้ เว้นแต่เมื่อการreactivator เช่น 2-pralidoxime (2-แพม), จัดการหลังจากแสง (Worek et al., 2013 คอสตา et al., 2011) ในทางตรงกันข้าม ปวดสามารถสามารถยับยั้งการต่อไปนี้พร้อมเปิดใช้อีกครั้ง โดย carbamate CarbamatesPB, NB และ PS ทำปวดโอนเข้าบัญชีของกลุ่ม carbamoyl เพื่อการใช้งานเว็บไซต์แถดังที่แสดงใน Fig. 1D เป็นผลแก่ carbamoyl แถhydrolyzed โดยน้ำ half-life ของหลายชั่วโมง ขึ้นอยู่กับ carbamate เฉพาะ และอัตรา decarbamylation สามารถเพิ่มโดยเพิ่มการ oxime (แฮร์ริส et al., 1987 ดอว์สัน 1995) หลังจากAChE การเปิดใช้งานใหม่ โมเลกุล carbamate เสื่อมโทรมไม่ความสามารถในการยับยั้งการปวด เป็นเช่น ระบบการทานปกครองปัจจุบันสำหรับ warfighters มีกระบวนกับ carbamate (PB), ประจำวันที่ทำหน้าที่เก็บส่วนของ AChE ว่างใน และป้องกันจากการยับยั้งโดยตัวแทนประสาท organophosphate เมื่อทหารมีตัวแทนประสาทสัมผัส เขาหรือเธอแล้ว self-administers ยา 2-แพมผ่านอัตโนมัติหัวฉีดที่ทำ OP ผูกปวดอย่างรวดเร็ว และความเร็วในการเปิดใช้งานใหม่ของอ่างเก็บน้ำปวด carbamate ผูกเปิด warfighter เพื่อความอยู่รอดการโจมตี รถยนต์หัวฉีดยังมีอะโทรปีน ตัว muscarinic acetylcholine นิสต์ การบรรเทาผลกระทบของ overstimulation cholinergic ที่มาพร้อมกับประสาทสัมผัสแทนนอกจากยูทิลิตี้ของพวกเขาเป็นตัวแทน prophylactics ประสาท carbamateยังใช้ยารักษา formyasthenia เนื้ออ่อนแรงชนิดร้ายและ Alzheimer'sandของ Parksinson ที่เกี่ยวข้องกับสมองเสื่อม (Van Der พัท et al., 2006 Imbimboร้อยเอ็ด al., 1999 เด Sarno และ Giacobini, 1989 Darreh Shori และ Jelic2010. เป้าหมายรองของ AChE inhibitors เช่น hydrolase อื่นแถเอนไซม์ (Vose et al., 2007 Quistad และ al., 2006) และ acetylcholinereceptors (AChRs) (Silveira และ al., 1990 ทซและ al., 1997) มีการเกี่ยวข้องในลักษณะไม่ใช่ cholinergic ของ AChE inhibitors (De Sarno และGiacobini, 1989 Lotti และ Moretto, 2006) ในกรณีของ pyridostigmineมีผลรองของสารยับยั้งการปวดนี้ carbamate โบรไมด์ (PB),การเชื่อมโยงการพัฒนาของกลุ่มอาการสงครามอ่าว (Golomb2008a Amourette et al., 2009), แม้ว่าผลการวิจัยเหล่านี้จะยังคงยังคง(Golomb, 2008b เสื้อสามารถและ al., 2008) ถึงแม้ว่าโมเลกุลจำนวนมากในครอบครัวเหล่านี้เป็นยาที่ใช้ในเชิงพาณิชย์หรือยาฆ่าแมลง ยังมีความเข้าใจที่ไม่สมบูรณ์ของกลไกของการดำเนินการเรามีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาแบบจำลองปลาม้าลายสำหรับ toxicological อย่างรวดเร็วตรวจสอบการตรวจกรอง และกลไกการทำ carbamate AChE inhibitorsเป็นขั้นตอนการพัฒนาโปรโตคอสัตว์ทั้งหมดอย่างรวดเร็วสำหรับที่แรกประเมินชุดยาที่ใช้ในการรักษาแทนประสาทพิษปลาม้าลาย (rerio ปลาซิวใบไผ่) มีการใช้การตรวจสอบสารเคมีมีผลต่อเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องไซแนปส์และ receptors (HannemanWesterfield, 1989 และ Behra และ al., 2002, 2004) เป็นสิ่งมีชีวิตรุ่นที่ปลาม้าลายมีจำนวนประโยชน์ญาติ tomammaliammodelsคุณลักษณะสำคัญของปลาม้าลายของระบบ cholinergic การศึกษาคือปวดอยู่เพียงรู้จัก ACh hydrolyzing เอนไซม์ในสิ่งมีชีวิตที่(Hanneman และ Westerfield, 1989) นอกจากนี้ carboxylesteraseกิจกรรมผ่าได้รับผลกระทบจาก PB และ carbamates (อัลกุรอานที่เกี่ยวข้องและสมเด็จพระ สันตะปาปา 2003 แมกซ์เวลล์ et al., 1988 กุปตาก Dettbarn, 1993)ปลาม้าลายโคลนได้อย่างรวดเร็ว ex คลื่นพัฒนา และสามารถสร้างในปริมาณมากสำหรับการทดลองอัตราความเร็วสูง การโคลนรักษาความคมชัดแสงผ่าน 5 วันลงปฏิสนธิ (dpf), ซึ่งอำนวยความสะดวกในการศึกษาเกี่ยวกับภาพ นอกจากนี้ จำนวนมากของถั่วเหลืองบรรทัดจะพร้อมใช้งานสำหรับการศึกษา mutationalปลาม้าลายได้ก่อนหน้านี้ใช้สำหรับการประเมินของ neuroeffectiveโมเลกุลขนาดเล็ก Chlorpyrifos แมลง organophosphate เป็นและสารยับยั้งการปวดให้ elicits ผล neurobehavioral และผลที่สอดคล้องกันของการพัฒนาเซลล์ประสาทรับความรู้สึกในปลาม้าลาย(Levin และ al., 2003 เนื่อง et al., 2010) รักษาปลาม้าลายด้วยedrophonium หรือ tacrine, FDA อนุมัติยาเสพติดและกลับAChE inhibitors, mislocalization ทำให้เซลล์ประสาทรับความรู้สึกอย่างไรก็ตาม carbamate ผลพัฒนาสมองปวดinhibitors ได้ยังมีลักษณะในแบบปลาม้าลายในการศึกษาปัจจุบัน เราได้ประเมินความเป็นพิษที่ และพัฒนาลักษณะพิเศษของ PB, NB และ PS (Fig. 1) บนโคลนปลาม้าลาย PB และ NBโดยทั่วไปไม่ดี bioavailable เนื่องจากค่าใช้จ่ายเพิ่ม(Amourette et al., 2009) อีกทั้งยังดูดซึมไม่ดีในลำไส้(Pyridostigmine โบรไมด์ 2003) อย่างไรก็ตาม PS ขาดตัว positivelychargedไนโตรเจน และพร้อมตัดเลือดสมองอุปสรรค (BBB)(Yu et al., 2010) เราประเมินความอยู่รอดและ perturbations ไทป์ต่อ 5 วันถ่ายภาพเพื่อกำหนดเหมาะสมย่อยยุทธภัณฑ์เงื่อนไขการรักษาติดตามผลพัฒนาศึกษา ผล motilityและถือว่าปวดยับยั้งเอนไซม์ได้ quantified ในปลาม้าลายโคลน และเราตรวจสอบผลของการรักษา carbamateในสี่ขั้นตอนสำคัญของการพัฒนาประสาท: เซลล์ประสาทก่อแอกซอนโยกย้าย arborization และไซแนปส์ก่อ ที่ผล neurodevelopmental ของ carbamates สามที่อธิบายไว้ที่นี่อาจมีความสำคัญสำหรับการเข้าใจ neurotoxicity พัฒนาcarbamate สารกำจัดศัตรูพืช (Vidair, 2004)
การแปล กรุณารอสักครู่..
ปรุงเป็นเอนไซม์ที่สำคัญสำหรับการส่ง synaptic
ทั้งระหว่างเซลล์ประสาทที่ cholinergic
ประสาทและกล้ามเนื้อและข้ามทางแยก(Soreq และเซดแมน, 2001) กิจกรรมเหล่านี้ underliemany
ของการทำงานทางชีวภาพที่จำเป็นเช่นการเต้นของหัวใจการหายใจการย่อยอาหารและการทำงานของสมอง
นอกเหนือจากบทบาทที่จัดตั้งขึ้น inmature
ระบบประสาท AChEmay
ยังมีบทบาทที่สำคัญในระบบประสาทพัฒนาแม้ว่าผลกระทบเหล่านี้ยังไม่เข้าใจ(Soreq
และเซดแมน, 2001).
การเรียนหลายโมเลกุลขนาดเล็กปรับเปลี่ยนการทำงานของปวด -
รวมทั้งตัวแทนของเส้นประสาท organophosphate และยาฆ่าแมลง (Bajgar, et al.
2009; Casida 2009; คอสตา, 2006) carbamates (. Bajgar et al, 2009)
และโมเลกุลขนาดเล็กอื่น ๆ (บอร์น, et al, 2004 (รูปที่ 1A, B และ C.).
Komloova .. et al, 2010) และพวกเขาได้ที่แตกต่างกันมีผลกระทบ (Grob, 1956)
organophosphates
ยับยั้งการเจ็บผ่านการปรับเปลี่ยนโควาเลนต์ของซีรีนใช้งานเว็บไซต์ที่มีphosphonate, phosphoamidate
หรือฟอสเฟตครึ่งหนึ่ง(Costa 2006; Kropp และริชาร์ด 2007) โดยทั่วไป organophosphate
ยับยั้งการเจ็บกลับไม่ได้ยกเว้นเมื่อมีการเจ็บ
reactivator เช่น 2 pralidoxime (2-PAM) เป็นยาเร็ว ๆ
นี้หลังจากการสัมผัส(Worek et al, 2013;.. คอสตา et al, 2011) ในทางตรงกันข้ามเจ็บสามารถจะเปิดใช้งานได้อย่างง่ายดายยับยั้งต่อไปนี้โดยคาร์บาเม
carbamates
PB, NB และทำหน้าที่ใน PS เจ็บโดยการโอนเงินของกลุ่ม carbamoyl
ที่จะใช้งานซีรีนเว็บไซต์ดังแสดงในรูปที่ 1D ผลลัพธ์
carbamoyl-ซีรีนมีการไฮโดรไลซ์ด้วยน้ำที่มีครึ่งชีวิตของหลายชั่วโมงขึ้นอยู่กับคาร์บาเมที่เฉพาะเจาะจงและอัตราdecarbamylation
สามารถเพิ่มขึ้นโดยการเพิ่มของoxime (ที่แฮร์ริส, et al, 1987;. ดอว์สัน, 1995) หลังจากการเปิดเจ็บโมเลกุลคาร์บาเมเสื่อมโทรมไม่ได้เป็นความสามารถในการยับยั้งการเจ็บ เช่นยาป้องกันโรคในปัจจุบันสำหรับ warfighters รวมถึงการใช้ยาทุกวันด้วยคาร์บาเม (ที่ PB) ซึ่งทำหน้าที่ที่จะถือเป็นส่วนหนึ่งของที่มีอยู่ในเจ็บสำรองและปกป้องมันจากการยับยั้งโดยตัวแทนประสาทorganophosphate เมื่อทหารมีการสัมผัสกับตัวแทนของเส้นประสาทที่เขาหรือเธอแล้วตัวเองบริหารจัดการปริมาณของ 2 PAM ผ่านหัวฉีดอัตโนมัติที่รวดเร็วกระตุ้นเจ็บ OP-ผูกพันและเพิ่มความเร็วในการเปิดอ่างเก็บน้ำเจ็บคาร์บาเมผูกพันที่ช่วยให้warfighter ไป ความอยู่รอดการโจมตี หัวฉีดอัตโนมัตินอกจากนี้ยังรวมถึงการ atropine, ศัตรูรับ acetylcholine muscarinic เพื่อบรรเทาผลกระทบจากการoverstimulation cholinergic ที่มาพร้อมกับการเปิดรับตัวแทนประสาท. นอกจากสาธารณูปโภคของพวกเขาเป็นตัวแทนของเส้นประสาท prophylactics, คาร์บาเมยาเสพติดนอกจากนี้ยังใช้กับการรักษาformyasthenia gravis และ Alzheimer'sand ภาวะสมองเสื่อมที่เกี่ยวข้องกับ Parksinson's (Van Der พัต et al, 2006;. Imbimbo et al, 1999;. De Sarno และ Giacobini 1989; Darreh-Shori และ Jelic, 2010) เป้าหมายรองของสารยับยั้งการเจ็บเช่น hydrolase ซีรีนอื่น ๆเอนไซม์ (Vose et al, 2007;. Quistad et al, 2006). และ acetylcholine ผู้รับ (AChRs) (เวร่า, et al, 1990;.. แคทซ์, et al, 1997) มี รับการที่เกี่ยวข้องในผลกระทบที่ไม่cholinergic ของสารยับยั้งการเจ็บ (เดอ Sarno และGiacobini 1989; Lotti และ Moretto 2006) ในกรณีที่ Pyridostigmine โบรไมด์ (PB) ผลรองยับยั้งเจ็บคาร์บาเมนี้ได้รับการเชื่อมโยงกับการพัฒนาของสงครามอ่าวซินโดรม(Golomb, 2008a; Amourette et al, 2009.) แต่การค้นพบเหล่านี้จะยังคงถกเถียงกัน(Golomb, 2008b ; Blazer et al, 2008). แม้ว่าโมเลกุลจำนวนมากในครอบครัวเหล่านี้มียาเสพติดในเชิงพาณิชย์ที่ใช้หรือยาฆ่าแมลงยังคงมีความเข้าใจที่ไม่สมบูรณ์ของกลไกของพวกเขาในการดำเนินการ. เรามีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนารูปแบบ zebrafish สำหรับทางพิษวิทยาอย่างรวดเร็วการตรวจคัดกรองและการตรวจสอบกลไกของสารยับยั้งการเจ็บคาร์บาเมเป็นขั้นตอนแรกในการพัฒนาโปรโตคอลทั้งสัตว์อย่างรวดเร็วสำหรับ. การประเมินผลการผสมยาเสพติดที่ใช้ในการรักษาเส้นประสาทพิษตัวแทน zebrafish (Danio rerio) ได้ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบสารเคมีที่มีผลต่อเอนไซม์ไซแนปส์ที่เกี่ยวข้องและผู้รับ(แฮนน์และ Westerfield 1989. Behra et al, 2002 2004) ในฐานะที่เป็นสิ่งมีชีวิตรูปแบบzebrafish มีจำนวนข้อได้เปรียบเมื่อเทียบ tomammaliammodels. คุณลักษณะที่สำคัญของ zebrafish สำหรับการศึกษาของระบบ cholinergic คือเจ็บเป็นคนเดียวที่รู้จักเอนไซม์เอซี-hydrolyzing อยู่ในสิ่งมีชีวิต(แฮนน์และ Westerfield, 1989) นอกจากนี้ carboxylesterase กิจกรรมได้รับผลกระทบน้อยที่สุดโดย PB และ carbamates ที่เกี่ยวข้องกัน (อีกฮ์และสมเด็จพระสันตะปาปา2003 แมกซ์เวล et al, 1988;. แคนด์และ Dettbarn, 1993). ตัวอ่อน Zebrafish มีการพัฒนามดลูกอดีตได้อย่างรวดเร็วและสามารถสร้างขึ้นในปริมาณมากสูงการทดลอง -throughput ตัวอ่อนรักษาความคมชัดของแสงผ่าน 5 วันปฏิสนธิโพสต์ (DPF) ซึ่งอำนวยความสะดวกในการถ่ายภาพการศึกษา นอกจากนี้จำนวนมากของการดัดแปรพันธุกรรมสายที่มีอยู่สำหรับการศึกษา mutational. Zebrafish ได้ถูกนำมาใช้ก่อนหน้านี้สำหรับการประเมินผลของ neuroeffective โมเลกุลขนาดเล็ก Chlorpyrifos, สารกำจัดศัตรูพืช organophosphate และยับยั้งการเจ็บกลับไม่ได้ผลกระทบองค์ neurobehavioral และการด้อยค่าที่สอดคล้องกันของการพัฒนาเซลล์ประสาทรับความรู้สึกในzebrafish (เลวิน et al, 2003;.. Jacobson et al, 2010) การรักษา zebrafish กับedrophonium หรือ tacrine ทั้งยาเสพติดองค์การอาหารและยาได้รับการอนุมัติและย้อนกลับได้สารยับยั้งการเจ็บทำให้mislocalization เซลล์ประสาทรับความรู้สึกอย่างไรก็ตามผลกระทบของระบบประสาทการพัฒนาคาร์บาเมเจ็บยับยั้งยังไม่ได้โดดเด่นในรูปแบบzebrafish ได้. ในการศึกษาในปัจจุบันที่เราประเมิน ความเป็นพิษและการพัฒนาผลกระทบของPB, NB และ PS (รูปที่ 1). ในตัวอ่อน zebrafish PB NB และมักจะไม่bioavailable ส่วนกลางเนื่องจากการประจุบวกของพวกเขา(Amourette et al., 2009) พวกเขายังมีการดูดซึมผ่านลำไส้(Pyridostigmine โบรไมด์, 2003) อย่างไรก็ตาม PS ขาด positivelycharged ไนโตรเจนและพร้อมข้ามเลือดสมองอุปสรรค (BBB) (Yu et al., 2010) เราประเมินการอยู่รอดและฟีโนไทป์เยี่ยงอย่างต่อไปนี้การเปิดรับวันที่ 5 เพื่อตรวจสอบย่อยตายที่ดีที่สุดเงื่อนไขการรักษาติดตามการด้อยค่าstudies.Motility การพัฒนาและการยับยั้งการทำงานของเอนไซม์เจ็บถูกวัดในการปฏิบัติตัวอ่อนzebrafish และเราตรวจสอบผลกระทบของการรักษาคาร์บาเมบนสี่ขั้นตอนที่สำคัญของการพัฒนามอเตอร์เซลล์ประสาท: การสร้างเซลล์ประสาทการโยกย้ายซอน, arborization ไซแนปส์และการก่อตัว ผลกระทบทางระบบประสาทในสาม carbamates อธิบายไว้ที่นี่อาจจะมีความสำคัญในการทำความเข้าใจพิษต่อระบบประสาทพัฒนาการของยาฆ่าแมลงคาร์บาเม(Vidair, 2004)
ทั้งระหว่างเซลล์ประสาทที่ cholinergic
ประสาทและกล้ามเนื้อและข้ามทางแยก(Soreq และเซดแมน, 2001) กิจกรรมเหล่านี้ underliemany
ของการทำงานทางชีวภาพที่จำเป็นเช่นการเต้นของหัวใจการหายใจการย่อยอาหารและการทำงานของสมอง
นอกเหนือจากบทบาทที่จัดตั้งขึ้น inmature
ระบบประสาท AChEmay
ยังมีบทบาทที่สำคัญในระบบประสาทพัฒนาแม้ว่าผลกระทบเหล่านี้ยังไม่เข้าใจ(Soreq
และเซดแมน, 2001).
การเรียนหลายโมเลกุลขนาดเล็กปรับเปลี่ยนการทำงานของปวด -
รวมทั้งตัวแทนของเส้นประสาท organophosphate และยาฆ่าแมลง (Bajgar, et al.
2009; Casida 2009; คอสตา, 2006) carbamates (. Bajgar et al, 2009)
และโมเลกุลขนาดเล็กอื่น ๆ (บอร์น, et al, 2004 (รูปที่ 1A, B และ C.).
Komloova .. et al, 2010) และพวกเขาได้ที่แตกต่างกันมีผลกระทบ (Grob, 1956)
organophosphates
ยับยั้งการเจ็บผ่านการปรับเปลี่ยนโควาเลนต์ของซีรีนใช้งานเว็บไซต์ที่มีphosphonate, phosphoamidate
หรือฟอสเฟตครึ่งหนึ่ง(Costa 2006; Kropp และริชาร์ด 2007) โดยทั่วไป organophosphate
ยับยั้งการเจ็บกลับไม่ได้ยกเว้นเมื่อมีการเจ็บ
reactivator เช่น 2 pralidoxime (2-PAM) เป็นยาเร็ว ๆ
นี้หลังจากการสัมผัส(Worek et al, 2013;.. คอสตา et al, 2011) ในทางตรงกันข้ามเจ็บสามารถจะเปิดใช้งานได้อย่างง่ายดายยับยั้งต่อไปนี้โดยคาร์บาเม
carbamates
PB, NB และทำหน้าที่ใน PS เจ็บโดยการโอนเงินของกลุ่ม carbamoyl
ที่จะใช้งานซีรีนเว็บไซต์ดังแสดงในรูปที่ 1D ผลลัพธ์
carbamoyl-ซีรีนมีการไฮโดรไลซ์ด้วยน้ำที่มีครึ่งชีวิตของหลายชั่วโมงขึ้นอยู่กับคาร์บาเมที่เฉพาะเจาะจงและอัตราdecarbamylation
สามารถเพิ่มขึ้นโดยการเพิ่มของoxime (ที่แฮร์ริส, et al, 1987;. ดอว์สัน, 1995) หลังจากการเปิดเจ็บโมเลกุลคาร์บาเมเสื่อมโทรมไม่ได้เป็นความสามารถในการยับยั้งการเจ็บ เช่นยาป้องกันโรคในปัจจุบันสำหรับ warfighters รวมถึงการใช้ยาทุกวันด้วยคาร์บาเม (ที่ PB) ซึ่งทำหน้าที่ที่จะถือเป็นส่วนหนึ่งของที่มีอยู่ในเจ็บสำรองและปกป้องมันจากการยับยั้งโดยตัวแทนประสาทorganophosphate เมื่อทหารมีการสัมผัสกับตัวแทนของเส้นประสาทที่เขาหรือเธอแล้วตัวเองบริหารจัดการปริมาณของ 2 PAM ผ่านหัวฉีดอัตโนมัติที่รวดเร็วกระตุ้นเจ็บ OP-ผูกพันและเพิ่มความเร็วในการเปิดอ่างเก็บน้ำเจ็บคาร์บาเมผูกพันที่ช่วยให้warfighter ไป ความอยู่รอดการโจมตี หัวฉีดอัตโนมัตินอกจากนี้ยังรวมถึงการ atropine, ศัตรูรับ acetylcholine muscarinic เพื่อบรรเทาผลกระทบจากการoverstimulation cholinergic ที่มาพร้อมกับการเปิดรับตัวแทนประสาท. นอกจากสาธารณูปโภคของพวกเขาเป็นตัวแทนของเส้นประสาท prophylactics, คาร์บาเมยาเสพติดนอกจากนี้ยังใช้กับการรักษาformyasthenia gravis และ Alzheimer'sand ภาวะสมองเสื่อมที่เกี่ยวข้องกับ Parksinson's (Van Der พัต et al, 2006;. Imbimbo et al, 1999;. De Sarno และ Giacobini 1989; Darreh-Shori และ Jelic, 2010) เป้าหมายรองของสารยับยั้งการเจ็บเช่น hydrolase ซีรีนอื่น ๆเอนไซม์ (Vose et al, 2007;. Quistad et al, 2006). และ acetylcholine ผู้รับ (AChRs) (เวร่า, et al, 1990;.. แคทซ์, et al, 1997) มี รับการที่เกี่ยวข้องในผลกระทบที่ไม่cholinergic ของสารยับยั้งการเจ็บ (เดอ Sarno และGiacobini 1989; Lotti และ Moretto 2006) ในกรณีที่ Pyridostigmine โบรไมด์ (PB) ผลรองยับยั้งเจ็บคาร์บาเมนี้ได้รับการเชื่อมโยงกับการพัฒนาของสงครามอ่าวซินโดรม(Golomb, 2008a; Amourette et al, 2009.) แต่การค้นพบเหล่านี้จะยังคงถกเถียงกัน(Golomb, 2008b ; Blazer et al, 2008). แม้ว่าโมเลกุลจำนวนมากในครอบครัวเหล่านี้มียาเสพติดในเชิงพาณิชย์ที่ใช้หรือยาฆ่าแมลงยังคงมีความเข้าใจที่ไม่สมบูรณ์ของกลไกของพวกเขาในการดำเนินการ. เรามีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนารูปแบบ zebrafish สำหรับทางพิษวิทยาอย่างรวดเร็วการตรวจคัดกรองและการตรวจสอบกลไกของสารยับยั้งการเจ็บคาร์บาเมเป็นขั้นตอนแรกในการพัฒนาโปรโตคอลทั้งสัตว์อย่างรวดเร็วสำหรับ. การประเมินผลการผสมยาเสพติดที่ใช้ในการรักษาเส้นประสาทพิษตัวแทน zebrafish (Danio rerio) ได้ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบสารเคมีที่มีผลต่อเอนไซม์ไซแนปส์ที่เกี่ยวข้องและผู้รับ(แฮนน์และ Westerfield 1989. Behra et al, 2002 2004) ในฐานะที่เป็นสิ่งมีชีวิตรูปแบบzebrafish มีจำนวนข้อได้เปรียบเมื่อเทียบ tomammaliammodels. คุณลักษณะที่สำคัญของ zebrafish สำหรับการศึกษาของระบบ cholinergic คือเจ็บเป็นคนเดียวที่รู้จักเอนไซม์เอซี-hydrolyzing อยู่ในสิ่งมีชีวิต(แฮนน์และ Westerfield, 1989) นอกจากนี้ carboxylesterase กิจกรรมได้รับผลกระทบน้อยที่สุดโดย PB และ carbamates ที่เกี่ยวข้องกัน (อีกฮ์และสมเด็จพระสันตะปาปา2003 แมกซ์เวล et al, 1988;. แคนด์และ Dettbarn, 1993). ตัวอ่อน Zebrafish มีการพัฒนามดลูกอดีตได้อย่างรวดเร็วและสามารถสร้างขึ้นในปริมาณมากสูงการทดลอง -throughput ตัวอ่อนรักษาความคมชัดของแสงผ่าน 5 วันปฏิสนธิโพสต์ (DPF) ซึ่งอำนวยความสะดวกในการถ่ายภาพการศึกษา นอกจากนี้จำนวนมากของการดัดแปรพันธุกรรมสายที่มีอยู่สำหรับการศึกษา mutational. Zebrafish ได้ถูกนำมาใช้ก่อนหน้านี้สำหรับการประเมินผลของ neuroeffective โมเลกุลขนาดเล็ก Chlorpyrifos, สารกำจัดศัตรูพืช organophosphate และยับยั้งการเจ็บกลับไม่ได้ผลกระทบองค์ neurobehavioral และการด้อยค่าที่สอดคล้องกันของการพัฒนาเซลล์ประสาทรับความรู้สึกในzebrafish (เลวิน et al, 2003;.. Jacobson et al, 2010) การรักษา zebrafish กับedrophonium หรือ tacrine ทั้งยาเสพติดองค์การอาหารและยาได้รับการอนุมัติและย้อนกลับได้สารยับยั้งการเจ็บทำให้mislocalization เซลล์ประสาทรับความรู้สึกอย่างไรก็ตามผลกระทบของระบบประสาทการพัฒนาคาร์บาเมเจ็บยับยั้งยังไม่ได้โดดเด่นในรูปแบบzebrafish ได้. ในการศึกษาในปัจจุบันที่เราประเมิน ความเป็นพิษและการพัฒนาผลกระทบของPB, NB และ PS (รูปที่ 1). ในตัวอ่อน zebrafish PB NB และมักจะไม่bioavailable ส่วนกลางเนื่องจากการประจุบวกของพวกเขา(Amourette et al., 2009) พวกเขายังมีการดูดซึมผ่านลำไส้(Pyridostigmine โบรไมด์, 2003) อย่างไรก็ตาม PS ขาด positivelycharged ไนโตรเจนและพร้อมข้ามเลือดสมองอุปสรรค (BBB) (Yu et al., 2010) เราประเมินการอยู่รอดและฟีโนไทป์เยี่ยงอย่างต่อไปนี้การเปิดรับวันที่ 5 เพื่อตรวจสอบย่อยตายที่ดีที่สุดเงื่อนไขการรักษาติดตามการด้อยค่าstudies.Motility การพัฒนาและการยับยั้งการทำงานของเอนไซม์เจ็บถูกวัดในการปฏิบัติตัวอ่อนzebrafish และเราตรวจสอบผลกระทบของการรักษาคาร์บาเมบนสี่ขั้นตอนที่สำคัญของการพัฒนามอเตอร์เซลล์ประสาท: การสร้างเซลล์ประสาทการโยกย้ายซอน, arborization ไซแนปส์และการก่อตัว ผลกระทบทางระบบประสาทในสาม carbamates อธิบายไว้ที่นี่อาจจะมีความสำคัญในการทำความเข้าใจพิษต่อระบบประสาทพัฒนาการของยาฆ่าแมลงคาร์บาเม(Vidair, 2004)
การแปล กรุณารอสักครู่..
ลาสิกขาเป็นเอนไซม์ที่สำคัญสำหรับการส่งผ่าน synaptic
ทั้งระหว่างเซลล์ประสาทและเส้นประสาทที่ชนะขาดลอยในส่วน
( ทิศตะวันตกเฉียงเหนือและ soreq ไซด์เมิน , 2001 ) กิจกรรมเหล่านี้ underliemany
ของที่จำเป็นทางชีวภาพการทำงาน เช่น การเต้นของหัวใจ การหายใจ
การย่อยอาหารและการทำงานของสมอง นอกจากการสร้างบทบาท inmature
ประสาทระบบachemay ยังมีบทบาทสำคัญในการพัฒนาระบบ
ประสาท แม้ว่าผลกระทบเหล่านี้จะไม่เข้าใจอย่างเต็มที่ ( soreq
แล้วไซด์เมิน , 2001 ) .
หลายชั้นของโมเลกุลขนาดเล็กปรับกิจกรรมของ
–ปวดรวมทั้งลมโกรกประสาทตัวแทนและยาฆ่าแมลง ( bajgar et al . ,
2009 casida , 2009 ; Costa , 2006 ) คาร์บาเมต ( bajgar et al . , 2009 )
( รูปที่ 1A ,B และ C ) และโมเลกุลขนาดเล็กอื่นๆ ( บอร์น et al . , 2004 ;
komloova et al . , 2010 ) , และพวกเขามีลักษณะแตกต่างกัน ( grob 2499 ) .
ออร์กาโนฟอสเฟตยับยั้งอาการปวดจากมณฑลอันฮุยของ
เว็บไซต์เป็นตัวที่ใช้งานกับฟอสโฟเนต phosphoamidate หรือกึ่งหนึ่ง , ฟอสเฟต
( Costa , 2006 ; คร็อพพ์และ ริชาร์ดสัน , 2007 ) โดยทั่วไปคาร์บอน
ยับยั้งการปวดได้ ยกเว้นเมื่อปวด
reactivator เช่น 2-pralidoxime ( 2-pam ) เป็นการวัดผลหลังจากที่
แสง ( โวเร็ค et al . , 2013 ; คอสตา et al . , 2011 ) ในทางตรงกันข้าม , ปวดสามารถ
พร้อมเปิดต่อการยับยั้งโดยเมต . คาร์บาเมต
PB , NB และ PS ทำปวดโดยการถ่ายโอนของกลุ่ม carbamoyl กับเซรีน
เว็บไซต์การใช้งานตามที่แสดงในรูปของเอนไซม์ซึ่งเป็น carbamoyl 1D .
ไฮโดรไลซ์ด้วยน้ำที่มีครึ่งชีวิตของหลายชั่วโมง ขึ้นอยู่กับเมตที่เฉพาะเจาะจงและ decarbamylation อัตราจะเพิ่มขึ้นโดยการเพิ่มของ )
( แฮร์ริส et al . , 1987 ; ดอว์สัน , 1995 ) หลังจาก
ปวดอีกครั้ง การสลายโมเลกุลคาร์บาเมตไม่ปวด
ความสามารถในการยับยั้ง เช่น ปัจจุบันการใช้
สำหรับนักรบ รวมถึง ทุกวัน จ่ายกับเมต ( PB ) ซึ่งจะทำหน้าที่ถือ
ส่วนของอาการปวดของสำรองและปกป้องมันจากสารออร์แกโนฟอสเฟต
โดยแก๊สทำลายประสาท เมื่อทหาร
สัมผัสกับสารทำลายประสาท เขาหรือเธอแล้ว ตนเองเป็นผู้บริหารขนาด 2 -
แพมผ่านหัวฉีดอัตโนมัติที่รวดเร็ว reactivates OP ผูกเจ็บและ
ความเร็วในการฟื้นฟูของเมตจำกัดปวดอ่างเก็บน้ำ ,
) warfighter อยู่รอดการโจมตี ออโต้หัวฉีดยัง
รวมถึง atropine , muscarinic acetylcholine receptor antagonist เพื่อลดผลกระทบของการกระตุ้นที่มากเกินไป
เปิดรับตัวแทนชนะขาดลอย ที่มาพร้อมกับเส้นประสาท
นอกจากยูทิลิตี้ของพวกเขาเป็นแก๊สทำลายประสาท prophylactics เมต
,
ทั้งระหว่างเซลล์ประสาทและเส้นประสาทที่ชนะขาดลอยในส่วน
( ทิศตะวันตกเฉียงเหนือและ soreq ไซด์เมิน , 2001 ) กิจกรรมเหล่านี้ underliemany
ของที่จำเป็นทางชีวภาพการทำงาน เช่น การเต้นของหัวใจ การหายใจ
การย่อยอาหารและการทำงานของสมอง นอกจากการสร้างบทบาท inmature
ประสาทระบบachemay ยังมีบทบาทสำคัญในการพัฒนาระบบ
ประสาท แม้ว่าผลกระทบเหล่านี้จะไม่เข้าใจอย่างเต็มที่ ( soreq
แล้วไซด์เมิน , 2001 ) .
หลายชั้นของโมเลกุลขนาดเล็กปรับกิจกรรมของ
–ปวดรวมทั้งลมโกรกประสาทตัวแทนและยาฆ่าแมลง ( bajgar et al . ,
2009 casida , 2009 ; Costa , 2006 ) คาร์บาเมต ( bajgar et al . , 2009 )
( รูปที่ 1A ,B และ C ) และโมเลกุลขนาดเล็กอื่นๆ ( บอร์น et al . , 2004 ;
komloova et al . , 2010 ) , และพวกเขามีลักษณะแตกต่างกัน ( grob 2499 ) .
ออร์กาโนฟอสเฟตยับยั้งอาการปวดจากมณฑลอันฮุยของ
เว็บไซต์เป็นตัวที่ใช้งานกับฟอสโฟเนต phosphoamidate หรือกึ่งหนึ่ง , ฟอสเฟต
( Costa , 2006 ; คร็อพพ์และ ริชาร์ดสัน , 2007 ) โดยทั่วไปคาร์บอน
ยับยั้งการปวดได้ ยกเว้นเมื่อปวด
reactivator เช่น 2-pralidoxime ( 2-pam ) เป็นการวัดผลหลังจากที่
แสง ( โวเร็ค et al . , 2013 ; คอสตา et al . , 2011 ) ในทางตรงกันข้าม , ปวดสามารถ
พร้อมเปิดต่อการยับยั้งโดยเมต . คาร์บาเมต
PB , NB และ PS ทำปวดโดยการถ่ายโอนของกลุ่ม carbamoyl กับเซรีน
เว็บไซต์การใช้งานตามที่แสดงในรูปของเอนไซม์ซึ่งเป็น carbamoyl 1D .
ไฮโดรไลซ์ด้วยน้ำที่มีครึ่งชีวิตของหลายชั่วโมง ขึ้นอยู่กับเมตที่เฉพาะเจาะจงและ decarbamylation อัตราจะเพิ่มขึ้นโดยการเพิ่มของ )
( แฮร์ริส et al . , 1987 ; ดอว์สัน , 1995 ) หลังจาก
ปวดอีกครั้ง การสลายโมเลกุลคาร์บาเมตไม่ปวด
ความสามารถในการยับยั้ง เช่น ปัจจุบันการใช้
สำหรับนักรบ รวมถึง ทุกวัน จ่ายกับเมต ( PB ) ซึ่งจะทำหน้าที่ถือ
ส่วนของอาการปวดของสำรองและปกป้องมันจากสารออร์แกโนฟอสเฟต
โดยแก๊สทำลายประสาท เมื่อทหาร
สัมผัสกับสารทำลายประสาท เขาหรือเธอแล้ว ตนเองเป็นผู้บริหารขนาด 2 -
แพมผ่านหัวฉีดอัตโนมัติที่รวดเร็ว reactivates OP ผูกเจ็บและ
ความเร็วในการฟื้นฟูของเมตจำกัดปวดอ่างเก็บน้ำ ,
) warfighter อยู่รอดการโจมตี ออโต้หัวฉีดยัง
รวมถึง atropine , muscarinic acetylcholine receptor antagonist เพื่อลดผลกระทบของการกระตุ้นที่มากเกินไป
เปิดรับตัวแทนชนะขาดลอย ที่มาพร้อมกับเส้นประสาท
นอกจากยูทิลิตี้ของพวกเขาเป็นแก๊สทำลายประสาท prophylactics เมต
,
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- i want to check the taste with my tongue
- And our life a pair of Rail was found al
- (b) The measurement of pressureThe press
- parentewich
- Entity: If the Previous Query is [who is
- Did u get any message in skype
- ประเทศจีนใหญ่ที่สุดในเอเชีย
- Since
- ลูกค้าประสบอุบัติเหตุเข้าแจ้งเคลมที่สาขา
- Thailand.— NORTHERN: Chiang Mai (Ban Pan
- การสร้างความเป็นกันเองจะทําให้ผู้เรียนกล
- corridor tile
- มันดูน่ากินจริงๆ
- ไปไหนมาไหนต้องระมัดระวังด้วยคะ
- Thailand.— NORTHERN: Chiang Mai (Ban Pan
- คืนรูป
- ฉันเก่ง
- ผิวหนังอ่อนโยน
- สุมิตร วงศ์อ่อน
- I think that's your eye pain caused by a
- Portrait
- ช่อลดา
- มีวันที่ดีและสนุกไปกับกิจกรรมในวันนี้ของ
- You are handsome
