To date this approach has been succ

To date this approach has been successfully applied to a wide range of transmembrane proteins from many different expression systems including both S. cerevisiae [98] and [100] and P. pastoris [102], for protein targets including GPCRs, ABC transporters and ion channels. Proteins within SMALPs have been shown to retain functional activity [11], [98], [100], [101] and [102]. The small size of the particle and lack of interference from the polymer scaffold mean the SMALPs are ideal for many spectroscopic and biophysical techniques [9], [10], [100], [102] and [103]. Importantly for structural studies, SMALP-encapsulated proteins have been found to be significantly more thermostable, less prone to aggregation, and easier to concentrate than detergent-solubilized proteins [11], [100], [101] and [102] (Fig. 5).

The importance of maintaining the lipid bilayer environment and lateral pressure is highlighted in Fig. 5d. When the adenosine A2A receptor is extracted from P. pastoris membranes with detergent (DDM), it is necessary to supplement with the cholesterol analogue, cholesterol hemisuccinate (CHS), in order to retain any binding activity. However when the SMA co-polymer is used to extract the receptor, there is no requirement for CHS suggesting that it is not the cholesterol per se that is required for function of this protein, but some stabilizing interaction with lipids.

Although as yet, there are no reports of SMALP-encapsulated proteins being used to generate protein crystals, they have been used in both negative stain and cryo-single particle electron microscopy [100] and [101]. With recent technological and analytical advances within the field of electron microscopy the possibility of high resolution membrane protein structures using electron microscopy has become a reality [104] and [105]; SMALPs offer the ability for these structures to be obtained without stripping away the membrane environment from a transmembrane protein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วันวิธีการนี้ได้ถูกนำไปใช้ความหลากหลายของโปรตีนรนนิพจน์ต่าง ๆ ระบบ S. cerevisiae [98] และ [100] และ P. pastoris [102], สำหรับโปรตีนเป้าหมายรวมทั้ง GPCRs, ABC ขนและช่องไอออน โปรตีนภายใน SMALPs ได้รับการแสดงเพื่อเก็บงานกิจกรรม [11], [98], [100], [101] [102] และ อนุภาคมีขนาดเล็กและขาดรบกวนจากนั่งร้านเมอร์หมายถึง SMALPs มีเหมาะสำหรับสเปคตรัม และทางกายภาพและชีวภาพเทคนิค [9], [10], [100], [102] [103] และ สำคัญสำหรับการศึกษาโครงสร้าง โปรตีน SMALP นึ้ได้รับพบจะ thermostable มากมาก น้อยแนวโน้มที่จะรวม และง่ายสมาธิกว่าผงซักฟอก solubilized โปรตีน [11], [100], [101] [102] (รูป 5) และมีเน้นความสำคัญของการรักษาสิ่งแวดล้อมและด้านข้างดัน bilayer ของไขมันในรูป 5d เมื่อรับ adenosine A2A สกัดจาก P. pastoris เยื่อหุ้มด้วยผงซักฟอก (DDM), จึงจำเป็นต้องเสริม ด้วยไขมันอนาล็อก คอเลสเตอร hemisuccinate (CHS), เพื่อที่จะรักษากิจกรรมผูกพันใด ๆ แต่ เมื่อพอลิเมอร์ร่วม SMA ใช้ดึงรับ มีไม่จำเป็นต้องสำหรับ CHS บอกว่า มันไม่ได้อรต่อ se ที่จำเป็นสำหรับการทำงานของโปรตีนนี้ แต่การโต้ตอบบางฟเฟกต์กับไขมันแม้ว่ายัง ไม่มีรายงานของโปรตีน SMALP นึ้ถูกใช้ในการสร้างผลึกโปรตีน พวกเขามีการใช้ ในทั้งลบคราบ และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนอนุภาคเดี่ยว cryo [100] [101] ด้วยพัฒนาการทางเทคโนโลยี และวิเคราะห์ ล่าสุดภายในเขตของชาวดัตช์ เป็นไปได้ของโครงสร้างโปรตีนเมมเบรนความละเอียดสูงโดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนกลายเป็นความจริง [104] [105]; SMALPs เสนอความสามารถของโครงสร้างเหล่านี้จะได้รับโดยไม่ทำให้สภาพแวดล้อมเยื่อจากโปรตีนรนออกไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วันที่วิธีการนี้ได้ถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จในช่วงกว้างของโปรตีนจากหลายระบบการแสดงออกที่แตกต่างกันทั้ง S. cerevisiae [98] และ [100] และ P. pastoris [102] สำหรับเป้าหมายรวมทั้งโปรตีน GPCRs, เอบีซี transporters และไอออน ช่อง โปรตีนภายใน SMALPs ได้รับการแสดงที่จะรักษากิจกรรมการทำงาน [11], [98], [100], [101] และ [102] ขนาดที่เล็กของอนุภาคและการขาดการรบกวนจากนั่งร้านลิเมอร์หมายถึง SMALPs จะเหมาะสำหรับหลายสเปกโทรสโกและเทคนิคชีวฟิสิกส์ [9] [10], [100], [102] และ [103] ที่สำคัญสำหรับการศึกษาโครงสร้างโปรตีนห่อหุ้ม SMALP ได้รับพบว่ามีนัยสำคัญต่ออุณหภูมิสูงมากขึ้นน้อยแนวโน้มที่จะรวมตัวและง่ายต่อการมีสมาธิกว่าโปรตีนผงซักฟอกละลาย [11], [100], [101] และ [102] (รูปที่ 5).

ความสำคัญของการรักษาสภาพแวดล้อมของไขมัน bilayer และความดันด้านข้างเป็นไฮไลต์ในรูป 5d เมื่อรับ adenosine A2A สกัดจาก P. pastoris เยื่อด้วยผงซักฟอก (DDM) มันเป็นสิ่งจำเป็นที่จะเสริมด้วยคอเลสเตอรอลอนาล็อกคอเลสเตอรอล hemisuccinate (CHS) เพื่อที่จะรักษากิจกรรมที่มีผลผูกพันใด ๆ อย่างไรก็ตามเมื่อ SMA ร่วมลิเมอร์ที่ใช้ในการดึงตัวรับที่มีความจำเป็นสำหรับการ CHS บอกว่ามันไม่ได้เป็นคอเลสเตอรอลต่อ se ที่จำเป็นสำหรับการทำงานของโปรตีนชนิดนี้ แต่บางคนมีปฏิสัมพันธ์การรักษาเสถียรภาพกับไขมันไม่มี.

แม้ว่ายังมี มีการรายงานของโปรตีนที่ห่อหุ้ม SMALP ไม่ถูกนำมาใช้ในการสร้างผลึกโปรตีนพวกเขาได้ถูกนำมาใช้ทั้งในเชิงลบและคราบ Cryo เดียวกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนอนุภาค [100] และ [101] ด้วยความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีและการวิเคราะห์ที่ผ่านมาภายในเขตของกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนเป็นไปได้ของความละเอียดสูงโปรตีนโครงสร้างเมมเบรนโดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนได้กลายเป็นความจริง [104] และ [105]; SMALPs มีความสามารถสำหรับโครงสร้างเหล่านี้จะได้รับโดยไม่ต้องลอกออกไปสภาพแวดล้อมเมมเบรนจากโปรตีนรน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัน วิธีการนี้ได้ถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จในหลากหลายของหัวโปรตีนจากหลายระบบการแสดงออกต่าง ๆ รวมทั้งเชื้อ S . cerevisiae [ 98 ] และ [ 100 ] และหน้า pastoris [ 102 ] สำหรับเป้าหมายโปรตีนรวมทั้ง gpcrs , ขนส่ง ABC และช่องไอออน โปรตีนภายใน smalps ได้รับการแสดงเพื่อรักษากิจกรรมการทํางาน [ 11 ] , [ 98 ] , [ 100 ] [ 101 ] และ [ 102 ] ขนาดเล็กของอนุภาค และไม่มีการแทรกแซงจากพอลิเมอร์นั่งร้านหมายถึง smalps เหมาะหลายทางชีวกายภาพเทคนิค [ 9 ] , [ 10 ] [ 100 ] , [ 102 ] และ [ 103 ] คือการศึกษาโครงสร้างโปรตีนที่ห่อหุ้ม smalp ได้ปรากฏว่าความร้อนมากกว่า เสี่ยงน้อยกว่าการรวมและมีสมาธิกว่าผงซักฟอกสารละลายโปรตีน [ 11 ] , [ 100 ] [ 101 ] และ [ 102 ] ( ภาพที่ 5 )ความสำคัญของการรักษาสิ่งแวดล้อมและความดัน bilayer ไขมันด้านข้างเน้นในรูป 5D เมื่อดีหลังรับสกัดจากหน้า pastoris เยื่อด้วยผงซักฟอก ( DDM ) , มันเป็นสิ่งจำเป็นเพื่อเสริมกับคอเลสเตอรอลคอเลสเตอรอล hemisuccinate อนาล็อก ( CHS ) ในการสั่งซื้อเพื่อรักษากิจกรรมผูกพันใด ๆ แต่เมื่อใช้สารโพลิเมอร์และโคตัวรับ ไม่มีความต้องการ CHS บอกว่าไม่ใช่คอเลสเตอรอลต่อ se ที่จำเป็นสำหรับการทำงานของโปรตีนนี้ แต่บางคนรักษาเสถียรภาพของการมีปฏิสัมพันธ์กับผู้ป่วย .แม้ว่ายังไม่มีรายงานของ smalp ห่อหุ้มโปรตีนถูกใช้เพื่อสร้างผลึกโปรตีน พวกเขาได้ถูกใช้ในทางลบ คราบ และ แช่แข็ง ของอนุภาคเดี่ยวจุลทรรศน์อิเล็กตรอน [ 100 ] และ [ 101 ] ด้วยเทคโนโลยีล่าสุดและความก้าวหน้าในทางด้านจุลทรรศน์อิเล็กตรอนความเป็นไปได้ของโครงสร้างของโปรตีนเมมเบรนที่มีความละเอียดสูงโดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเลคตรอนได้กลายเป็นความเป็นจริง [ 104 ] และ [ 105 ] ; smalps เสนอความสามารถของโครงสร้างเหล่านี้จะได้รับโดยไม่ลอกออกไปเยื่อสิ่งแวดล้อมจากทรานสเมมเบรนโปรตีน