Specificity appears to be harder to

Specificity appears to be harder to change than mechanism
through site-directed mutagenesis. However, a recent
paper shows a double mutant of the xylanase 10A from
Pseudomonas cellulosa with significantly improved specificity
for the hydrolysis of glucose-derived substrates compared
with that of their xylose equivalents [47•]. Success in
changing specificity has also been achieved in the absenceof
structural information by using directed molecular evolution,
involving multiple rounds of mutagenesis,
functional screening, and amplification. An excellent
example of this has been provided by Zhang et al. [48]
using PCR-based DNA shuffling. After seven rounds of
shuffling, a 1000-fold increase in the specificity for a chromogenic
fucoside substrate over that for a galactoside was
obtained using the Escherichia coli (lacZ) -galactosidase.
Although the bulk of the specificity change was effected
through a destruction of galactosidase activity, there was a
significant (10- to 20-fold) increase in fucosidase activity.
Useful changes in glycosidase specificity through directed
molecular evolution should be expected in the next few
years given the relative ease of screening these enzymes
and the large number of families known.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความจำเพาะที่ดูเหมือนจะเป็นเรื่องยากที่จะเปลี่ยนกว่ากลไก
การกลายพันธุ์ผ่านเว็บไซต์ที่กำกับ อย่างไรก็ตามที่ผ่านมา
แสดงให้เห็นว่ากระดาษกลายพันธุ์คู่ 10A ไซลาเนสจาก
Pseudomonas Cellulosa มีความจำเพาะที่ดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ
สำหรับการย่อยสลายของพื้นผิวที่ได้จากน้ำตาลกลูโคสเมื่อเทียบ
กับที่ของเทียบเท่าไซโลของพวกเขา [47 •] ที่ประสบความสำเร็จใน
การเปลี่ยนแปลงที่เฉพาะเจาะจงได้รับการประสบความสำเร็จใน absenceof
ข้อมูลโครงสร้างโดยใช้วิวัฒนาการโมเลกุลกำกับ
ที่เกี่ยวข้องกับหลายรอบของการกลายพันธุ์,
การคัดกรองการทำงานและการขยาย ที่ยอดเยี่ยม
เช่นนี้ได้รับการให้บริการโดย Zhang et al, [48]
​​โดยใช้วิธี PCR-based สับดีเอ็นเอ หลังจากเจ็ดรอบของการ
สับเพิ่มขึ้น 1,000 เท่าในความจำเพาะสำหรับ chromogenic
ตั้งต้น fucoside กว่าที่ galactoside ได้
รับใช้ coli Escherichia (lacZ) -galactosidase
แม้ว่าจำนวนมากของการเปลี่ยนแปลงที่เฉพาะเจาะจงได้รับผลกระทบ
ผ่านการทำลายของ กิจกรรม galactosidase มี
อย่างมีนัยสำคัญ (10 ถึง 20 เท่า) การเพิ่มขึ้นของกิจกรรม fucosidase
การเปลี่ยนแปลงที่เป็นประโยชน์ในความจำเพาะ glycosidase ผ่านกำกับ
วิวัฒนาการโมเลกุลควรจะคาดหวังต่อไปในช่วงไม่กี่
ปีที่ผ่านมาได้รับความสะดวกในการตรวจคัดกรองญาติของเอนไซม์เหล่านี้
และจำนวนมากของ ครอบครัวที่รู้จักกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความจำเพาะดูเหมือนจะยิ่งยากที่จะเปลี่ยนแปลงมากกว่ากลไก
ผ่านเว็บไซต์กำกับการ . อย่างไรก็ตาม รายงานล่าสุด
แสดงคู่ของเอนไซม์กลายพันธุ์กลับจาก Pseudomonas cellulosa ที่มีการปรับปรุงอย่างมากต่อ

สำหรับการย่อยสลายกลูโคสที่ได้มาเมื่อเทียบกับที่ของพวกเขาเทียบเท่า 6
- [ 47 ] ความสำเร็จใน
เปลี่ยนเฉพาะเจาะจงยังได้รับการประสบความสำเร็จใน absenceof
โครงสร้างข้อมูลโดยใช้กำกับวิวัฒนาการระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับหลายรอบ

การคัดกรอง , การทำงาน , และขยาย . ตัวอย่างที่ดีของนี้
ได้รับให้โดย Zhang et al . [ 48 ]
ใช้ PCR DNA สับไพ่ตาม หลังจากเจ็ดรอบ
สับ , 1000 พับเพิ่มความจำเพาะสำหรับการสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันที
fucoside พื้นผิวที่เป็น galactoside คือ
ได้รับใช้เชื้อ Escherichia coli ( lacz )  - galactosidase
ถึงแม้ว่าเป็นกลุ่มของเปลี่ยนความจำมีผลต่อ
ผ่านทำลายกิจกรรม galactosidase มี
) ( 10 - 20 เท่า ) เพิ่มกิจกรรม fucosidase .
มีประโยชน์ในการตรวจหาทางที่ไกลโคซิเดส
วิวัฒนาการโมเลกุลควรจะคาดว่าในไม่กี่ปีถัดไปให้ความสะดวกญาติ

และคัดกรองเอนไซม์เหล่านี้จำนวนมากของครอบครัวที่รู้จัก