The hull fraction was separated into hulls (N500 μm) and residues
(b500 μm) using a sieving machine (type AS 200 Tap, Retsch GmbH,
Haan, Germany) with 32-mesh U.S. standard, 500-μm sieve for 3 min.
The “true” sieved hull represented 79.9, 77, and 87.5% (w/w) of green
lentil, red lentil, and yellow pea hull fractions, respectively. All
samples except residues were ground to a fine powder in a small
coffee mill.
2.1. Extraction and analysis of phenolics
Extraction of phenolics was performed according to the procedure
described recently (Oomah, Corbé, & Balasubramanian, 2010).
Ground samples (200 mg) were extracted with aqueous ethanol
80% (v/v) (8 ml), using a Reacti-Therm heating and stirring module
(N 18970, Pierce, Rockford, IL) for 2 h and filtered (Acrodisc 0.45 μm,
VWR International, Mississauga, ON). Similar extractions were carried
out with aqueous acetone 70% (v/v), distilled water (22± 1 °C) and
hot distilled water (70–80 °C). The water extracts were centrifuged
(Sorvall Model RC 5B plus; DuPont Co. Wilmington, DE) at 11,000 g for
30 min and filtered through the glass wool. Water was boiled in a
kettle for the hot water extraction and the resultant temperature 70–
80 °C in the system was maintained during extraction. The recovered
supernatant was stored at −20 °C in the dark until analysis. All
extractions were carried out in triplicates.
The phenolic content of extracts was determined according to the
procedure described previously (Oomah, Cardador-Martinez, &
Loarca-Piña, 2005). Briefly, the method consisted of adding 100 μl of
sample extract with 150 μl of a solution of 2% HCl in 80% ethanol in a
96-well ultra violet flat-bottom plate (Greiner Bio-One Inc., Longwood,
FL). The absorbance of the solution was monitored at 280, 320, 360,
and 520 nm after mixing for 2 min with a spectrophotometer
(Spectramax Plus 384, Molecular Devices Corp., Sunnyvale, CA)
using (+)-catechin (0–100 μg/ml), caffeic acid (0–20 μg/ml), quercetin
(0–30 μg/ml), and cyanidin-3-glucoside (0–8 μg/ml) as standards
for total phenolics, tartaric esters, flavonols and anthocyanins,
respectively. Standards were prepared in aqueous ethanol 80% (v/v).
The absorbance was also read at 710 nm for turbidity correction and
the results were expressed in mg (+)-catechin, caffeic acid, quercetin
or cyanidin-3-glucoside equivalents/g sample. The acetone extract
was evaporated in the Reacti-Therm module under nitrogen and
dissolved in aqueous ethanol 80% (v/v) prior to phenolic assay
ส่วนตัวเรือนั้นแบ่งออกเป็น hulls (N500 μm) และตก(b500 μm) ใช้เครื่อง sieving (ชนิดเป็น 200 เคาะ Retsch GmbHHaan เยอรมนี) ด้วยตาข่าย 32 สหรัฐอเมริกามาตรฐาน 500-μm ตะแกรงสำหรับ 3 นาทีฮัลล์ sieved "จริง" แสดง 79.9, 77 และ 87.5% (w/w) สีเขียวถั่วเลนทิลใส่ ถั่วเลนทิลแดงใส่ และถั่วเหลืองฮัลล์เศษส่วน ตามลำดับ ทั้งหมดตัวอย่างยกเว้นตกได้จะเป็นฝุ่นละอองขนาดเล็กในโรงงานผลิตกาแฟ2.1 การสกัดและวิเคราะห์ phenolicsสกัด phenolics ได้ดำเนินการตามขั้นตอนอธิบายเมื่อเร็ว ๆ นี้ (Oomah, Corbé, & Balasubramanian, 2010)ตัวอย่างดิน (200 มิลลิกรัม) ที่สกัด ด้วยเอทานอลอควี80% (v/v) (8 ml), การใช้เป็น Reacti-Therm ทำความร้อน และกวนโมดูล(N 18970 เพียร์ซ ร็อคฟอร์ด IL) 2 h และการกรอง (μm Acrodisc 0.45VWR International, Mississauga, ON) ได้ดำเนินการสกัดเหมือนกันออก ด้วยอะซีโตนอควี 70% (v/v), กลั่นน้ำ (22± 1 ° C) และเครื่องทำน้ำกลั่น (70 – 80 ° C) สารสกัดน้ำมี centrifuged(5B รุ่น Sorvall RC บวก วิลมิบริษัทดูปองท์ DE) ที่ g 11000 สำหรับ30 นาที และกรองผ่านเส้นใยแก้ว มีต้มน้ำในตัวกาต้มน้ำการแยกน้ำร้อนอุณหภูมิ 70-ผลแก่80 ° C ในระบบถูกเก็บรักษาในระหว่างการสกัด การกู้คืนsupernatant ถูกเก็บไว้ที่ −20 ° C ในมืดจนถึงการวิเคราะห์ ทั้งหมดสกัดได้ดำเนินใน triplicatesเนื้อหาฟีนอสารสกัดจากกำหนดตามกระบวนงานที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Oomah, Cardador-มาติเน่ &Loarca-Piña, 2005) สั้น ๆ วิธีประกอบด้วยเพิ่ม 100 μl ของตัวอย่างสารสกัด ด้วย μl 150 ของโซลูชันของ 2% HCl ในเอทานอล 80% ในการ96 ดีอุลตร้าไวโอเลทแบนด้านล่างจาน (Greiner ชีวภาพหนึ่ง Inc., Longwoodชั้น) Absorbance ของโซลูชันมีการตรวจสอบที่ 280, 320, 360และ 520 nm หลังผสมใน 2 นาทีกับเป็นเครื่องทดสอบกรดด่าง(Spectramax บวก 384 โมเลกุลอุปกรณ์ Corp., Sunnyvale, CA)ใช้ (+) -สารสกัดจาก (0-100 μg/ml), กรด caffeic (μg 0 – 20 ml) quercetin(0-30 μg/ml), และ cyanidin 3 glucoside (0-8 μg/ml) เป็นมาตรฐานphenolics รวม tartaric esters, flavonols และ anthocyaninsตามลำดับ มาตรฐานถูกเตรียมในอควีเอทานอล 80% (v/v)Absorbance ที่ยังไม่อ่านที่ 710 nm สำหรับแก้ไขความขุ่นของน้ำ และผลลัพธ์ได้แสดงในมก. (+) -สารสกัดจาก กรด caffeic, quercetinหรือเทียบ เท่า/g cyanidin 3 glucoside ตัวอย่าง สารสกัดจากอะซีโตนหายไปในโมดูล Reacti-Therm ภายใต้ไนโตรเจน และละลายในอควีเอทานอล 80% (v/v) ก่อนทดสอบฟีนอ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ส่วนเรือที่ถูกแยกออกเป็นลำ (N500 ไมครอน) และสารตกค้าง
(B500 ไมครอน) ใช้เครื่อง sieving (ชนิด AS 200 แตะ Retsch GmbH,
Haan, เยอรมนี) กับ 32 ตาข่ายสหรัฐมาตรฐานตะแกรง 500 ไมโครเมตรเป็นเวลา 3 นาที.
"จริง" เรือร่อนตัวแทน 79.9, 77 และ 87.5% (w / w) ของสีเขียว
ถั่ว, ถั่วแดงและเศษส่วนเรือถั่วสีเหลืองตามลำดับ ทั้งหมด
ยกเว้นตัวอย่างตกค้างมาบดให้เป็นผงละเอียดในขนาดเล็ก
โรงสีกาแฟ.
2.1 การสกัดและการวิเคราะห์ของฟีนอล
สกัดฟีนอลที่ได้ดำเนินการตามขั้นตอน
ที่อธิบายไว้เมื่อเร็ว ๆ นี้ (Oomah, Corbéและ Balasubramanian 2010).
ตัวอย่างพื้นดิน (200 มก.) ได้รับการสกัดด้วยเอทานอลในน้ำ
80% (v / v) (8 มล.) โดยใช้ความร้อน Reacti-Therm และโมดูลกวน
(ยังไม่มี 18,970 เพียร์ซ, ฟอร์ด, IL) เป็นเวลา 2 ชั่วโมงและกรอง (Acrodisc 0.45 ไมโครเมตร
VWR นานาชาติ Mississauga, ON) การสกัดสารที่คล้ายกันดำเนินการ
ออกมาพร้อมกับอะซีโตนน้ำ 70% (v / v), น้ำกลั่น (22 ± 1 ° C) และ
น้ำกลั่นร้อน (70-80 ° C) สารสกัดจากน้ำปั่น
(Sorvall รุ่น RC 5B บวก; ดูปองท์ จำกัด Wilmington, DE) ที่ 11,000 กรัมสำหรับ
30 นาทีและกรองผ่านใยแก้ว น้ำต้มใน
กาต้มน้ำสำหรับการสกัดน้ำร้อนและอุณหภูมิผล 70-
80 องศาเซลเซียสในระบบถูกเก็บรักษาไว้ในระหว่างการสกัด กู้คืน
ใสถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสในที่มืดจนการวิเคราะห์ ทั้งหมด
สกัดได้ดำเนินการใน triplicates.
เนื้อหาของสารสกัดฟีนอลได้รับการพิจารณาตาม
ขั้นตอนที่อธิบายไว้ก่อนหน้า (Oomah, Cardador-ร์ติเนซและ
Loarca-Piña 2005) สั้น ๆ , วิธีการประกอบการเพิ่ม 100 ไมโครลิตรของ
สารสกัดจากกลุ่มตัวอย่าง 150 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหา 2% HCl ในเอทานอล 80% ใน
สีม่วง 96 หลุมพิเศษแผ่นแบนด้านล่าง (Greiner Bio-One อิงค์ลองวูด,
ฟลอริด้า) การดูดกลืนแสงของการแก้ปัญหาที่ได้รับการตรวจสอบที่ 280, 320, 360,
และ 520 นาโนเมตรหลังจากผสมเป็นเวลา 2 นาทีกับ spectrophotometer
(Spectramax พลัส 384, อุปกรณ์โมเลกุลคอร์ปซันนีเวล, แคลิฟอร์เนีย)
ใช้ (+) - catechin (0-100 ไมโครกรัม / ml) กรด caffeic (0-20 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) quercetin
(0-30 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) และ cyanidin-3-glucoside (0-8 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) เป็นมาตรฐาน
สำหรับฟีนอลรวมเอสเทอ tartaric, flavonols และ anthocyanins,
ตามลำดับ ได้จัดทำมาตรฐานในน้ำเอทานอล 80% (v / v).
การดูดกลืนแสงก็ยังอ่านได้ที่ 710 นาโนเมตรสำหรับการแก้ไขความขุ่นและ
ผลที่ถูกแสดงในมก. (+) - catechin กรด caffeic, quercetin
หรือ cyanidin-3-glucoside เทียบเท่า / กรัมตัวอย่าง สารสกัดจากอะซิโตน
ได้รับการระเหยในโมดูล Reacti-Therm ภายใต้ไนโตรเจนและ
ละลายในน้ำเอทานอล 80% (v / v) ก่อนที่จะมีการทดสอบฟีนอล
การแปล กรุณารอสักครู่..
เรือเศษส่วนแบ่งเป็นเปลือก ( n500 μ m )
( b500 ตกค้างμ M ) ใช้ตะแกรงเครื่อง ( ชนิดเป็น 200 แตะ retsch GmbH ,
ฮาน , เยอรมนี ) กับ 32 ตาข่ายสหรัฐอเมริกามาตรฐาน 500 - μ M ตะแกรง 3 นาที
" เป็นจริง " ขนาดเรือแสดงสา , 77 , และที่ 87.5 % ( w / w )
สีเขียวถั่ว , ถั่วแดง , ถั่วเหลือง ฮัลล์ เศษส่วน ตามลำดับ ทั้งหมด
ตัวอย่าง ยกเว้นดินพื้นเพื่อผงละเอียดในโรงสีกาแฟขนาดเล็ก
.
2.1 . การสกัดและการวิเคราะห์ผลการสกัดฟีนอลิกา
ตามขั้นตอนที่อธิบายเมื่อเร็ว ๆนี้ ( oomah corb é , & balasubramanian , 2010 ) .
ตัวอย่างดิน ( 200 มิลลิกรัม ) ถูกสกัดด้วยสารละลายเอทานอล
80 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) ( 8 ml ) โดยใช้ความร้อนความร้อนและโมดูล
reacti กวน ( n 18970 เพียร์ซ , Rockford , ,อิล ) 2 ชั่วโมง กรอง ( acrodisc 0.45 μ M ,
บริษัท Imcopa International , Mississauga ) การสกัดด้วยสารละลายคล้ายถูกกวาด
) 70 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) , น้ำ ( 22 ± 1 ° C )
ร้อนน้ำ ( 70 – 80 องศา C ) น้ำสกัดอยู่ที่ระดับ
( แบบ sorvall RC 5B บวก บริษัท ดูปองท์ Wilmington , DE ) ที่ 11 , 000 g
30 นาทีและกรองผ่านแก้วผ้าขนสัตว์ น้ำที่ถูกต้มใน
กาต้มน้ำสำหรับน้ำอุ่นการสกัดและอุณหภูมิ 70 – 80 องศา C
ซึ่งในระบบการรักษาในระหว่างการสกัด กู้คืนที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20
น่าน−°องศาเซลเซียสในที่มืดจนกว่าการวิเคราะห์ ทั้งหมด
ทีมทดลอง 3 ซ้ำ
เนื้อหาสารสกัดถูกกำหนดตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( oomah
,
cardador Martinez , & loarca ปี่ 15 , 2005 )สั้น ๆ , วิธีการคือ เพิ่ม 100 μ l
ตัวอย่างแยกกับ 150 μ l สารละลาย 2% HCl ในเอทานอล 80% ใน
96 อย่างดี ultra แบนจานด้านล่าง ( ไกรเนอร์ไบโอหนึ่ง Longwood อิงค์ ,
, FL ) มีการดูดกลืนแสงของสารละลายที่ตรวจสอบใน 280 , 320 , 360 , 520 nm และ
หลังจากผสม 2 มินกับ Spectrophotometer
( spectramax บวก 384 โมเลกุล , อุปกรณ์ Corp . , Sunnyvale , CA )
การใช้ ( ) - catechin ( 0 – 100 μ g / ml ) , กรด Caffeic ( 0 - 20 μ g / ml ) , เคอร์
( 0 – 30 μกรัม / มิลลิลิตร ) และ cyanidin-3-glucoside ( 0 – 8 μ g / ml ) เป็นมาตรฐาน
สำหรับผลรวม tartaric เอสเทอร์ ฟลาโวนอล และ anthocyanins
ตามลำดับ มาตรฐานที่ถูกเตรียมไว้ในสารละลายเอทานอล 80 เปอร์เซ็นต์ ( v / v )
น ก็อ่านที่ 710 nm สำหรับแก้ไขค่าความขุ่นและ
ผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกในมก. ( ) - Catechin ,กรด Caffeic quercetin
หรือเทียบเท่า cyanidin-3-glucoside รัมตัวอย่าง สารสกัดอะซิโตน
ถูกระเหยใน reacti THERM โมดูลภายใต้ไนโตรเจนและละลายในสารละลายเอทานอล 80%
( v / v ) ก่อนการทดสอบ ฟีนอลิก
การแปล กรุณารอสักครู่..