Our design of the cell-cell fusion

Our design of the cell-cell fusion assay is described below. HEK293T cells, as
effector cells, were co-transfected with plasmids encoding for HIV-1 Env and HIV-1 Tat
proteins. HeLa T4+ cells, as target cells, were transfected with a plasmid harboring the HIV-1
LTR-driven copGFP reporter gene. Co-cultivation of the effector cells and target cells
enabled HIV-1 gp120 on the effector cell surface to bind to CD4 and CXCR4 co-receptor on
the target cell. The bindings triggered conformational changes in HIV-1 gp41 that finally
became fusion competent, mediating cell-cell membrane fusion processes. This allowed the
contents of the two cells to mix each other; HIV-1 Tat protein from the effector cells could
bind to the LTR-promoter in the target cells, resulting in increased transcription of copGFP
mRNA. The number of fusion events therefore is directly proportional to the expression of
copGFP protein. A schematic representation of the HIV-1 Env-mediated cell-cell fusion
assay in this study is shown in Figure 1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราออกแบบวิเคราะห์การหลอมเซลล์เซลล์อธิบายไว้ด้านล่าง HEK293T เซลล์ เป็นeffector เซลล์ มี transfected ร่วมกับ plasmids เข้ารหัส Env ของเชื้อเอชไอวี-1 และเอชไอวี-1 ตาดโปรตีน T4 HeLa + เซลล์ เป็นเซลล์เป้าหมาย มี transfected มี plasmid ที่ harboring เอชไอวี-1CopGFP ขับเคลื่อน LTR โปรแกรมรายงานยีน ปลูกร่วม effector เซลล์และเซลล์เป้าหมายgp120 เอชไอวี-1 เปิดใช้งานบนพื้นผิวเซลล์ effector ไปผูกกับตัวร่วม CD4 และ CXCR4 รับบนเซลล์เป้าหมาย ผูกที่ทริกเกอร์เปลี่ยนแปลง conformational ใน gp41 เอชไอวี-1 ที่สุดกลายเป็นอาหารฟิวชั่นมีอำนาจ เป็นสื่อกลางเซลล์เซลล์เมมเบรนฟิวชั่นกระบวน นี้ได้เนื้อหาของเซลล์สองผสมกัน เอชไอวี-1 ตาดโปรตีนจากเซลล์ effector สามารถผูกกับที่ LTR-โปรโมเตอร์ในเซลล์เป้าหมาย ผลเพิ่ม transcription ของ copGFPmRNA จำนวนเหตุการณ์ฟิวชั่นจึงเป็นสัดส่วนโดยตรงกับการcopGFP โปรตีน แสดงแผนผังวงจรของการหลอมเหลว mediated Env ของเชื้อเอชไอวี-1 เซลล์เซลล์วิเคราะห์ในการศึกษานี้จะแสดงในรูปที่ 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การออกแบบของเราทดสอบฟิวชั่นโทรศัพท์มือถือที่มีการอธิบายไว้ด้านล่าง HEK293T
เซลล์เป็นเซลล์effector ถูก transfected ร่วมกับพลาสมิดเข้ารหัสสำหรับ HIV-1 Env และ HIV-1
ตาดโปรตีน HeLa T4 + เซลล์เป็นเซลล์เป้าหมายถูก transfected ที่มีพลาสมิดเก็บงำเอชไอวี -1
LTR ขับเคลื่อน copGFP ยีนนักข่าว ร่วมการเพาะปลูกของเซลล์ effector
และเซลล์เป้าหมายที่เปิดใช้งานHIV-1 gp120 บนผิวเซลล์ effector เชื่อมโยงกับ CD4 และ CXCR4
ร่วมรับบนเซลล์เป้าหมาย ผูกเรียกการเปลี่ยนแปลงในโครงสร้าง HIV-1 gp41
ที่ในที่สุดก็กลายเป็นฟิวชั่นอำนาจmediating กระบวนการฟิวชั่นเยื่อหุ้มเซลล์เซลล์ นี้ได้รับอนุญาตเนื้อหาของสองเซลล์ในการผสมแต่ละอื่น ๆ ;
HIV-1 ตาดโปรตีนจากเซลล์ effector
สามารถผูกกับLTR-ก่อการในเซลล์เป้าหมายที่มีผลในการถอดรหัสที่เพิ่มขึ้นของ copGFP
mRNA จำนวนของเหตุการณ์ฟิวชั่นจึงเป็นสัดส่วนโดยตรงกับการแสดงออกของโปรตีน copGFP
การแสดงแผนผังของฟิวชั่นเอชไอวี 1 Env
พึ่งเซลล์เซลล์ทดสอบในการศึกษานี้แสดงให้เห็นในรูปที่1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การออกแบบของ astrocytoma ฟิวชั่น assay ที่อธิบายไว้ด้านล่าง hek293t เซลล์ ,
( เซลล์ ) Co transfected กับพลาสมิดการเข้ารหัสสำหรับเชื้อ HIV-1 Env และททท.
โปรตีน ล่า T4 เซลล์เป็นเซลล์เป้าหมายได้ transfected ที่มีพลาสมิดที่ LTR -
ขับเคลื่อน copgfp นักข่าวจีน ร่วมปลูกของโต้ง และเซลล์
เซลล์เป้าหมายเปิดใช้งาน 120 - บนผิวเซลล์ CD4 ( ผูกกับตัวรับบน และ cxcr4 Co
เซลล์เป้าหมาย ผูกเรียกการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างใน HIV-1 gp41 อันที่สุดท้าย
กลายเป็นฟิวชั่นสามารถไกล่เกลี่ยกระบวนการเมมเบรน astrocytoma ฟิวชั่น นี้อนุญาตให้
เนื้อหาของทั้งสองเซลล์ผสมกับแต่ละอื่น ๆ ; โปรตีนแทท HIV-1 จากเซลล์ ( อาจ
ผูกกับ LTR โปรโมเตอร์ในเซลล์เป้าหมาย มากขึ้น ส่งผลให้ ถอดของ copgfp
mRNA . จำนวนของเหตุการณ์ฟิวชั่นจึงเป็นสัดส่วนโดยตรงกับการแสดงออกของโปรตีน copgfp
. แสดงแผนผังของเชื้อโดยวิธีกายภาพฟิวชั่น
astrocytoma ในการศึกษานี้แสดงในรูปที่ 1