4. Discussion
Few quantitative data on HEV in food and clinical (animal and/or
human) samples are available (Colson et al., 2010; Leblanc et al.,
2010; Martin-Latil et al., 2014) and the infectious dose of the virus is
still unknown. In the absence of efficient in vitro replication systems
for HEV, only molecular detection data, such as quantitative real-time
PCR data, can be presently used for a quantitative risk assessment. Proper assessment of molecular quantitative data should however take into
account also the RNA recovery efficiency that is provided by the different extraction procedures available (Martin-Latil et al., 2014). As revealed using the murine norovirus as process control in this and in
previous studies (Martin-Latil et al., 2012, 2014), the RNA recovery
may be largely influenced by the matrix investigated and the specific
extraction method used (Martin-Latil et al., 2014). In this study, all of
the 87 samples tested were positive for the IAC, whereas no process
control signal was obtained from 19 of 42 dry liver sausages tested. Consequently, the failure of RT-qPCR for the process control was most certainly due to a failed RNA extraction, possibly related to the different
fat and salt concentrations in dry liver sausages and/or to the air drying
process itself.
We used an RNA extraction protocol suitable for an intracellular
virus contamination, because most of infectious HEV can be expected
to be inside the hepatocytes that form most part of the sausage matrix.
The lower detection observed for MNV-1 in dry compared to fresh
sausages suggests that the use of a process control may be recommendable to reduce the risk of false negative reactions when investigating RNA
viruses in different food matrices (D'Agostino et al., 20
4. สนทนาไม่เชิงปริมาณข้อมูล HEV อาหาร และทางคลินิก (สัตว์ และ/หรือตัวอย่างมนุษย์) ว่าง (Colson et al., 2010 เลอบลังก์ et al.,2010 Martin-Latil et al., 2014) และยาโรคติดเชื้อของไวรัสยังไม่ทราบ ของ efficient ในเครื่องจำลองระบบสำหรับ HEV ข้อมูลตรวจสอบโมเลกุลเฉพาะ เช่นเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ข้อมูล PCR สามารถถูกใช้สำหรับการประเมินความเสี่ยงเชิงปริมาณปัจจุบัน อย่างไรก็ตามควรนำการประเมินข้อมูลเชิงปริมาณโมเลกุลเหมาะสมเข้าบัญชียัง efficiency กู้อาร์เอ็นเอที่แยกแตกต่างตอนว่าง (มาร์ติน Latil et al., 2014) เป็นเปิดเผยใช้ murine norovirus เป็นการควบคุมกระบวนการนี้ และในก่อนหน้านี้ศึกษา (มาร์ติน Latil et al., 2012, 2014), การกู้คืนของอาร์เอ็นเออาจจะ influenced เป็นส่วนใหญ่ โดยเมทริกซ์การสอบสวนและการ specificใช้วิธีสกัด (มาร์ติน Latil et al., 2014) ในการศึกษานี้ ทั้งหมดตัวอย่างที่ 87 ที่ทดสอบได้ค่าบวกสำหรับ IAC ในขณะที่ไม่มีกระบวนการสัญญาณควบคุมได้รับจาก 19 42 แห้งตับไส้กรอกทดสอบ ดังนั้น ความล้มเหลวของ RT-qPCR การควบคุมกระบวนการเกิดอย่างแน่นอนการล้มอาร์เอ็นเอสกัด อาจเกี่ยวข้องกับการแตกต่างกันไขมัน และเกลือความเข้มข้น ในไส้กรอกตับแห้ง หรืออากาศแห้งดำเนินการเองเราใช้เป็นอาร์เอ็นเอแยกโพรโทคอลเหมาะสำหรับการ intracellularปนเปื้อนไวรัส เนื่องจากส่วนใหญ่ติดเชื้อ HEV สามารถคาดหวังเป็นภายใน hepatocytes ที่ส่วนใหญ่ของเมทริกซ์ไส้กรอกการตรวจพบต่ำกว่าสังเกต MNV-1 ในแห้งเมื่อเทียบกับสดแนะนำไส้กรอกที่ ใช้ควบคุมกระบวนการผลิตอาจจะนำเกี่ยวกับภัตตาคารเพื่อลดความเสี่ยงปฏิกิริยาลบเท็จเมื่ออาร์เอ็นเอตรวจสอบไวรัสในอาหารต่าง ๆ เมทริกซ์ (D'Agostino et al., 20
การแปล กรุณารอสักครู่..

4. การอภิปราย
ไม่กี่ข้อมูลเชิงปริมาณใน HEV ในอาหารและคลินิก (สัตว์และ / หรือ
มนุษย์) ตัวอย่างที่มีอยู่ (โคลสัน, et al, 2010;. เลอบลัง, et al.
2010; มาร์ติน Latil, et al, 2014.) และยาที่ติดเชื้อ ของไวรัสจะ
ยังไม่ทราบ ในกรณีที่ไม่มี EF ไฟเพียงพอในหลอดทดลองระบบการจำลองแบบ
สำหรับ HEV ข้อมูลการตรวจสอบเพียงโมเลกุลเช่นเรียลไทม์ปริมาณ
ข้อมูล PCR สามารถนำมาใช้ในปัจจุบันสำหรับการประเมินความเสี่ยงเชิงปริมาณ การประเมินความเหมาะสมของข้อมูลเชิงปริมาณโมเลกุล แต่ควรคำนึง
บัญชียังกู้คืนประสิทธิภาพการ RNA สายที่มีให้โดยวิธีการสกัดที่แตกต่างกัน (มาร์ติน Latil et al., 2014) เปิดเผยว่าการใช้เชื้อ norovirus หมาเป็นตัวควบคุมกระบวนการในเรื่องนี้และใน
การศึกษาก่อนหน้า (มาร์ติน Latil et al., 2012, 2014), การกู้คืน RNA
อาจจะเป็นส่วนใหญ่อยู่ในชั้น uenced โดยเมทริกซ์ตรวจสอบและระบุไว้ค
วิธีการสกัดที่ใช้ (มาร์ติน Latil และ al., 2014) ในการศึกษานี้ทั้งหมด
87 ตัวอย่างการทดสอบเป็นบวกสำหรับ IAC ขณะที่กระบวนการไม่มี
สัญญาณควบคุมที่ได้รับตั้งแต่วันที่ 19 จาก 42 ไส้กรอกตับแห้งที่ผ่านการทดสอบ ดังนั้นความล้มเหลวของ RT-qPCR สำหรับการควบคุมกระบวนการที่มากที่สุดอย่างแน่นอนเนื่องจากการสกัด RNA ล้มเหลวอาจจะเกี่ยวข้องกับการที่แตกต่างกัน
ไขมันและความเข้มข้นของเกลือในไส้กรอกตับแห้งและ / หรือการอบแห้งด้วยลม
ดำเนินการเอง.
เราใช้การสกัดอาร์เอ็นเอ โปรโตคอลที่เหมาะสมสำหรับเซลล์
การปนเปื้อนเชื้อไวรัสเพราะส่วนใหญ่ของ HEV ติดเชื้อสามารถคาดหวัง
ที่จะอยู่ภายในเซลล์ตับที่เป็นส่วนหนึ่งมากที่สุดของเมทริกซ์ไส้กรอก.
การตรวจสอบต่ำสังเกต MNV-1 ในแห้งเมื่อเทียบกับสด
ไส้กรอกแสดงให้เห็นว่าการใช้ การควบคุมกระบวนการอาจจะฝากฝังเพื่อลดความเสี่ยงของการเกิดปฏิกิริยาเชิงลบเท็จเมื่อตรวจสอบอาร์เอ็นเอ
ไวรัสในการฝึกอบรมอาหารที่แตกต่างกัน (ตือศิลปวัตถุ et al., 20
การแปล กรุณารอสักครู่..

4 . ข้อมูลเชิงปริมาณในการอภิปราย
ไม่ปลูกในอาหาร และคลินิกสัตว์และ / หรือ
มนุษย์ ) ตัวอย่างที่มีอยู่ ( โคลสัน et al . , 2010 ; เลอบล็อง et al . ,
2010 ; มาร์ติน latil et al . , 2010 ) และปริมาณการติดเชื้อของไวรัส
ยังไม่ทราบ ในการขาดของ EF จึง cient ในระบบการเพาะเลี้ยง
สำหรับปลูกเพียงโมเลกุลการตรวจสอบข้อมูล เช่น ข้อมูล PCR แบบเรียลไทม์
เชิงปริมาณสามารถใช้ในปัจจุบันเพื่อการประเมินความเสี่ยงเชิงปริมาณ การประเมินที่เหมาะสมของข้อมูลเชิงปริมาณโมเลกุล แต่จะใช้เวลาในการกู้คืนบัญชียัง
ยีนถ่ายทอดประสิทธิภาพ EF ที่จัดเตรียม โดยขั้นตอนการสกัดที่แตกต่างกันใช้ได้ ( มาร์ติน latil et al . , 2010 ) เปิดเผยว่าการใช้ ~ รายการเป็นในการควบคุมกระบวนการนี้และใน
การศึกษาก่อนหน้านี้ ( มาร์ติน latil et al . , 2012 , 2014 )ยีนกู้
อาจเป็นไปในfl uenced โดยศึกษาและกาจึง C
วิธีสกัดใช้ ( มาร์ติน latil et al . , 2010 ) ในการศึกษานี้ทั้งหมดของ
87 ตัวอย่างให้ทดสอบบวกสำหรับ IAC , ในขณะที่ไม่มีกระบวนการ
ควบคุมสัญญาณได้จาก 19 42 บริการตับ ไส้กรอก ทดสอบ จากนั้นความล้มเหลวของ RT qpcr สำหรับการควบคุมกระบวนการที่แน่นอนที่สุดเนื่องจากการล้มเหลวในการสกัด RNA , อาจจะเกี่ยวข้องกับไขมันที่แตกต่างกัน
และความเข้มข้นของเกลือในตับและไส้กรอกแห้งหรืออากาศแห้ง
เราใช้กระบวนการเอง ซึ่งเหมาะสำหรับการแยกขั้นตอนการปนเปื้อนไวรัสภายในเซลล์
เพราะส่วนใหญ่ปลูก ติดเชื้อ สามารถคาดหวัง
อยู่ภายในเซลล์ตับส่วนฟอร์มส่วนใหญ่ของไส้กรอกเมทริกซ์ .
) mnv-1 ลดการแห้งเมื่อเทียบกับไส้กรอกสด
แนะนำว่าใช้กระบวนการควบคุมอาจจะฝากฝังเพื่อลดความเสี่ยงของปฏิกิริยาเชิงลบเท็จ เมื่อตรวจสอบ RNA ไวรัสในเมทริกซ์อาหารแตกต่างกัน
( D ' Agostino et al . , 20
การแปล กรุณารอสักครู่..
