The methods for collecting dot bloo

The methods for collecting dot blood samples on filter paper cards,
(Devost and Choy, 2000) PCR amplification of GBA genomic DNA for sequence
analysis using GBA specific primers, and RFLP analysis of GBA
mutations are described in Supplementary information. In order to con-
firm that mutations G355R/R359X were in cis arrangement i.e. present
in the same allele, exon 8 was cloned into the sequencing vector
pJET1.2. One Shot TOP10® chemically competent E. coli (Life Technologies,
Carlsbad, CA) was transformed with pJET1.2/exon 8 and
transformants were selected for on low sodium LB agar containing
100 μg/mL ampicillin. Colony PCR was performed on 24 clones, 15 of
which contained the exon 8 insert and were sequenced analyzed by
Europhins MWG Operon.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีการเก็บตัวอย่างเลือดจุดบนกระดาษกรองบัตร(Devost และ Choy, 2000) ปลักของ GBA ดีเอ็นเอการสำหรับลำดับวิเคราะห์โดยใช้ไพรเมอร์เฉพาะ GBA และ RFLP ของ GBAพันธุ์ไว้ในข้อมูล เพื่อให้บรรลุบริษัทพันธุ์ที่ G355R/R359X ได้ในปัจจุบันเช่นการจัดเรียง cisในอัลลีเดียว exon 8 โคลนลงในเวกเตอร์ลำดับpJET1.2. One Shot TOP10® ไลมีสารเคมี (ชีวิตเทคโนโลยีคาร์ลบาด CA) ถูกแปลง ด้วย pJET1.2/exon 8 และtransformants ถูกเลือกสำหรับบนอาหารโซเดียมต่ำ LB ที่ประกอบด้วยแอมพิซิลลิน 100 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ทำใน 24 โคลน 15 ของอาณานิคม PCRซึ่งประกอบด้วยการแทรก exon 8 และถูกเรียงลำดับวิเคราะห์โดยOperon Europhins MWG

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการในการเก็บตัวอย่างเลือด dot กรองบัตรกระดาษ
(Devost และ Choy, 2000) ขยาย PCR ของ GBA ดีเอ็นเอลำดับ
การวิเคราะห์โดยใช้ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง GBA และการวิเคราะห์ RFLP ของ GBA
การกลายพันธุ์ที่อธิบายไว้ในข้อมูลเพิ่มเติม เพื่อที่จะได้อย่างต่อ
บริษัท ว่าการกลายพันธุ์ G355R / R359X อยู่ในการจัด CIS เช่นปัจจุบัน
ในอัลลีลเดียวกันเอกซ์ซอน 8 เป็นโคลนเข้าไปในลำดับเวกเตอร์
pJET1.2 One Shot TOP10®อำนาจทางเคมีเชื้อ E. coli (ไลฟ์เทคโนโลยีส์,
คาร์ลส, CA) ถูกเปลี่ยนด้วย pJET1.2 / เอกซ์ซอน 8 และ
transformants ถูกเลือกสำหรับโซเดียมต่ำ LB agar ที่มี
100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร ampicillin อาณานิคม PCR ที่ได้ดำเนินการเมื่อวันที่ 24 โคลนที่ 15 ของ
ที่มีเอกซ์ซอน 8 แทรกและมีลำดับขั้นตอนการวิเคราะห์โดย
Europhins MWG Operon

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการเก็บตัวอย่างเลือดจุดบนบัตรกระดาษกรอง( devost และโชย , 2000 ) PCR แบบ GBA ดีเอ็นเอลำดับการวิเคราะห์การใช้ไพรเมอร์ที่จำเพาะและการวิเคราะห์ RFLP ของ GBA GBA ,การกลายพันธุ์จะอธิบายในรายละเอียดเพิ่มเติม เพื่อคอน -บริษัทที่สร้าง g355r / r359x ใน CIS การจัดเรียงเช่นปัจจุบันในกลุ่มเดียวกัน , exon 8 ถูกโคลนเข้าไปในลำดับเวกเตอร์pjet1.2 . หนึ่งยิง TOP10 ®เชี่ยวชาญทาง E . coli ( เทคโนโลยีชีวิตคาร์ลสแบด , แคลิฟอร์เนีย ) คือเปลี่ยนกับ pjet1.2/exon 8 และพลาสมิดคัดเลือกบนอาหารวุ้นปอนด์ที่มีโซเดียมต่ำ100 μ g / ml ยาเพนนิซิลลิน อาณานิคม PCR คือใช้ 24 โคลน , 15 ของซึ่งประกอบด้วย exon 8 แทรกและทำการ วิเคราะห์ข้อมูลโดยeurophins mwg โอเปอรอน .