The following primary antibodies we

The following primary antibodies were used: the monoclonal antibody B610 against the viral 72- kDa (72 K) DNA binding protein to identify viral replication centers (kindly provided by Dr. Arnold J. Levine, Institute for Advanced Study) [52], the monoclonal antibody to β-actin produced in mouse (clone AC-15, ascites fluid, Sigma Aldrich), the mouse monoclonal antibody 2G2 against actin [53] (kindly provided by Dr. Brigitte Jockusch, Technical University of Braunschweig, Germany), the mouse monoclonal anti-BrdU antibody (clone BMC 9318, Roche) used to detect nascent RNA following Br-UTP incorporation, the rabbit polyclonal antibody specific for TBP (Santa Cruz Biochemical), the mouse monoclonal H14 antibody to phosphorylated serine 5 of the C-terminal domain of pol II (Covance) or the polyclonal pan-Pol II antibody (n-20, Santa Cruz), the rabbit polyclonal anti-TFIIB antibody (Santa Cruz), the rabbit polyclonal anti-TFIIF antibody (Santa Cruz), rhodamine phalloidin (Cytoskeleton Inc.), polyclonal myosin V antibody (kindly provided by Dr. Paul C. Bridgman, Washington University), polyclonal myosin VI antibody (KA-15, Sigma-Aldrich) and the rabbit anti-nuclear myosin I (NMI) antibody developed in our laboratory. Secondary antibodies used for immunostaining were goat anti-mouse IgG (H+L), IgG (Fc), or IgM and anti-rabbit IgG conjugated with 488, FITC, Texas Red, Cy2, Cy3, or Cy5 (Jackson ImmunoResearch Laboratories). Antibody validation and immunofluorescence controls can be found in Fig. S1 and Table S1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้แอนตี้หลักการต่อไปนี้: โปรตีนรวม DNA แอนติบอดี monoclonal B610 กับไวรัส 72-kDa (72 K) ในการระบุไวรัสจำลองศูนย์ (กรุณาโดยดร.อาร์โนลด์ J. Levine สถาบันศึกษาขั้นสูง) [52], แอนติบอดี monoclonal กับβ-แอกตินผลิตในเมาส์ (โคลน AC-15 ท้องมานน้ำมัน ซิก Aldrich), เมาส์ monoclonal แอนติบอดี 2G 2 กับแอกติน [53] (กรุณาโดยดร. Brigitte Jockusch มหาวิทยาลัยเทคนิคเบราน์ชไวก์ เยอรมนี), ที่เมาส์ BrdU ป้องกันโมโนแอนติบอดี (โคลน BMC 9318, Roche) ใช้ในการตรวจหาอาร์เอ็นเอก่อต่อประสาน Br UTP ที่กระต่าย polyclonal แอนติบอดีเฉพาะสำหรับ TBP (ซานตาครูซชีวเคมี), ที่เมาส์โมโน H14 แอนติบอดีจะแถ phosphorylated 5 โดเมนเทอร์มินัลซีของ pol II (Covance) หรือแอนติบอดีที่ II polyclonal แพน-Pol (n-20 ซานตาครูซ), แอนติบอดีที่ต่อต้าน-TFIIB polyclonal กระต่าย (ซานตาครูซ) กระต่าย polyclonal ต่อต้าน-TFIIF แอนติบอดี (ซานตาครูซ), rhodamine phalloidin (Cytoskeleton Inc.) ไมโอซิน polyclonal V แอนติบอดี (กรุณาโดยดร. Paul C. Bridgman มหาวิทยาลัยวอชิงตัน), ไมโอซิน polyclonal VI แอนติบอดี (KA-15 ซิก Aldrich) และไมโอซินต่อต้านนิวเคลียร์กระต่ายฉัน (NMI) แอนติบอดีพัฒนาในห้องปฏิบัติการของเรา แอนตี้รองใช้ immunostaining ถูกเมาส์ป้องกันแพะ IgG (H + L), IgG (Fc), หรือการระบาดของโรค และป้องกันกระต่าย IgG กลวงกับ 488, FITC เท็กซัสแดง Cy2, Cy3 หรือ Cy5 (ห้องปฏิบัติการ ImmunoResearch Jackson) ควบคุมตรวจสอบและ immunofluorescence แอนติบอดีสามารถพบได้ในฟิก S1 และตาราง S1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แอนติบอดีหลักดังต่อไปนี้ถูกนำมาใช้คือแอนติบอดี B610 กับไวรัส 72 กิโลดาลตัน (72 K) ดีเอ็นเอโปรตีนเพื่อระบุศูนย์เชื้อไวรัส (ให้ความกรุณาโดยดร. อาร์โนลเจ Levine, สถาบันการศึกษาขั้นสูง) [52] ที่ แอนติบอดีเพื่อเบต้าโปรตีนที่ผลิตในเมาส์ (โคลน AC-15, ของเหลวน้ำในช่องท้องซิกดิช) ที่แอนติบอดีเมาส์ 2G2 กับโปรตีน [53] (ให้ความกรุณาโดยดร. Brigitte Jockusch, มหาวิทยาลัยเทคนิคแห่ง Braunschweig ประเทศเยอรมนี) ที่ โมโนโคลนอลแอนติบอดีเมาส์ต่อต้าน BrdU (โคลน BMC 9318, Roche) ใช้ในการตรวจสอบต่อไปนี้อาร์เอ็นเอตั้งไข่รวมตัว Br-UTP, แอนติบอดีโพลีกระต่ายที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ TBP (ซานตาครูซทางชีวเคมี) แอนติบอดีเมาส์ H14 ที่จะ phosphorylated ซีรีนที่ 5 ของ C- โดเมนขั้วออฟไลน์ออฟไลน์ครั้งที่สอง (Covance) หรือโพลีกระทะ-Pol II แอนติบอดี (n-20, Santa Cruz) กระต่ายโพลีแอนติบอดีต่อต้าน TFIIB (Santa Cruz) กระต่ายโพลีแอนติบอดีต่อต้าน TFIIF (Santa Cruz), rhodamine phalloidin (โครงร่างของเซลล์อิงค์), โพลี myosin แอนติบอดี V (ให้ความกรุณาโดยดร. พอลซี Bridgman มหาวิทยาลัยวอชิงตัน) โพลี myosin แอนติบอดี VI (KA-15, Sigma-Aldrich) และกระต่าย myosin ต่อต้านนิวเคลียร์ฉัน (NMI) แอนติบอดีการพัฒนาในห้องปฏิบัติการของเรา แอนติบอดีที่ใช้สำหรับรอง immunostaining แพะถูกต่อต้านเมาส์ IgG (H + L) IgG (FC) หรือ IgM และ IgG ต่อต้านกระต่ายผันกับ 488 FITC, เท็กซัสแดง CY2, Cy3 หรือ Cy5 (แจ็คสัน ImmunoResearch ห้องปฏิบัติการ) การตรวจสอบและการควบคุมแอนติบอดีอิมมูโนสามารถพบได้ในรูป S1 และตาราง S1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ต่อไปนี้การใช้ : โมโนโคลนอล แอนติบอดี แอนติบอดีต่อไวรัส b610 72 - ดาลตัน ( 72 K ) เพื่อระบุดีเอ็นเอโปรตีนของไวรัส ( ศูนย์ซ้ำกรุณาให้โดย ดร. อาร์โนลด์เจ Levine ที่สถาบันเพื่อการศึกษาขั้นสูง ) [ 52 ] , โมโนโคลนอลแอนติบอดีเพื่อบีตา - actin ผลิตเมาส์ ( โคลน ac-15 ascites fluid , ซิกม่า Aldrich )เมาส์ 2g2 โมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อ actin [ 53 ] ( กรุณาให้โดย ดร. Brigitte ดาวน์โหลด มหาวิทยาลัยเทคนิคแห่งเมืองบรันสวิก , เยอรมัน ) , โมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อต้าน brdu ( โคลน BMC 9318 โรช , ) เพื่อใช้ตรวจหาอาร์เอ็นเอตั้งไข่ดังต่อไปนี้ br ลอบหนีนิติบุคคล กระต่ายใช้แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ tbp ( Santa Cruz ชีวเคมี )โมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อเมาส์ h14 ฟอสฟอรีเลเตตเอนไซม์ 5 โดเมนซึ่งของ Pol II ( เมโซ ) หรือใช้กระทะ Pol II แอนติบอดี ( n-20 Santa Cruz ) , กระต่ายใช้แอนติบอดีต่อต้าน tfiib ( Santa Cruz ) , กระต่ายใช้แอนติบอดีต่อต้าน tfiif ( Santa Cruz ) , โรดามีน phalloidin ( ขาดตอนอิงค์ ) , โพลีมัยโอซินวี แอนติบอดี ( กรุณาให้โดย ดร. พอล บริดจ์แมนซี ,มหาวิทยาลัยวอชิงตัน ) , โพลี myosin วีแอนติบอดี ( ka-15 , Sigma ดิช ) และกระต่ายต่อต้านนิวเคลียร์ ไมโอซิน ( NMI ) แอนติบอดีที่พัฒนาขึ้นในห้องปฏิบัติการของเรา แอนติบอดี IgG anti รองใช้ immunostaining เป็นเมาส์แพะ ( H L ) , IgG ( ชลบุรี เอฟซี ) , หรือชนิด IgM และ IgG anti กระต่าย conjugated กับท่า fitc เท็กซัสแดง cy2 cy3 , หรือ cy5 ( แจ็คสัน immunoresearch ห้องปฏิบัติการ )การตรวจสอบและการควบคุมโดยวิธีสามารถพบได้ในรูปตาราง S1 S1 .