Despite its wide use, the plate cle

Despite its wide use, the plate clearing assay based on CMC–agar is notorious for its low specificity, producing halos around other polymer-degrading enzymes like amylase and agarase (Figure 1A), independent of the presence or absence of a cellulase substrate (e.g., CMC) (Figure 1B). The artifacts occur likewise with other gelling agents like agarose and Gelrite (Figure 1C) and with other staining methods like Congo Red (data not shown). Among these problems, particularly the substrate-independent formation of halos seriously impacts one of the most important criteria of enzyme assays, their specificity and precludes any chances to quantify cellulase activities. A quarter of a century ago, Zitomer and Eveleigh [10] already recommended to exercise caution when interpreting results using iodine stained CMC–agar plates. They found that small amounts of contaminating starch in commercial agars made the staining unreliable. Their concerns have been substantiated and extended now by the controls shown here (Figure 1). The use of CMC–agar (or –agarose or –Gelrite) in connection with Gram’s iodine staining as a stand-alone method can thus not be regarded as reliable.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แม้ มีการใช้กว้าง ทดสอบอิง CMC – วุ้นล้างจานเป็นที่รู้จักสำหรับความจำเพาะที่ต่ำ ผลิตจ้าในรอบอื่น ๆ เอนไซม์ย่อยสลายพอลิเมอร์เช่น amylase และ agarase (รูปที่ 1A), เป็นอิสระจากการมีหรือไม่มีพื้นผิว cellulase (เช่น CMC) (รูปที่ 1B) สิ่งประดิษฐ์เกิดขึ้นทำนองเดียวกัน กับในประเทศอื่น ๆ เช่น agarose และ Gelrite (รูปที่ 1C) และวิธีอื่น ๆ ผมเช่นคองโกแดง (ไม่แสดงข้อมูล) หมู่ปัญหาเหล่านี้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการก่อพื้นผิวอิสระของจ้าในอย่างจริงจังผลกระทบหนึ่งเกณฑ์สำคัญที่สุดของเอนไซม์ assays ความจำเพาะของตน และโอกาสใดการวัดปริมาณ cellulase กิจกรรมไม่สามารถ ไตรมาสของศตวรรษที่แล้ว Zitomer และ Eveleigh [10] แล้วแนะนำให้ระวังการแปลผลโดยใช้ไอโอดีนย้อม CMC – วุ้นแผ่น พวกเขาพบว่า จำนวนเล็กน้อยปนแป้งใน agars พาณิชย์ทำการย้อมไม่น่าเชื่อถือ ความกังวลของพวกเขาได้รับการพิสูจน์ และขณะนี้ขยายตัวควบคุมที่แสดงที่นี่ (รูปที่ 1) การใช้ CMC – วุ้น (– agarose หรือ – Gelrite) กับไอโอดีนของกรัมย้อมสีเป็นวิธีการแบบสแตนด์อโลนสามารถจึงไม่ถือว่าน่าเชื่อถือเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม้จะมีการใช้อย่างกว้างขวางของการทดสอบแผ่นหักบัญชีอยู่บนพื้นฐานของ CMC-วุ้นเป็นที่รู้จักสำหรับความจำเพาะต่ำของการผลิตรัศมีรอบพอลิเมอเอนไซม์ย่อยสลายเช่นอะไมเลสและ agarase อื่น ๆ (รูปที่ 1A) เป็นอิสระจากการมีหรือไม่มีของพื้นผิวเซลลูเลส (เช่น , CMC) (รูปที่ 1B) สิ่งประดิษฐ์ที่เกิดขึ้นในทำนองเดียวกันกับตัวแทนก่อเจลอื่น ๆ เช่น agarose และ Gelrite (รูปที่ 1C) และด้วยวิธีการย้อมสีอื่น ๆ เช่นสีแดงคองโก (ไม่ได้แสดงข้อมูล) ท่ามกลางปัญหาเหล​​่านี้โดยเฉพาะอย่างยิ่งการสร้างพื้นผิวที่เป็นอิสระของรัศมีอย่างจริงจังส่งผลกระทบต่อหนึ่งในเกณฑ์ที่สำคัญที่สุดของเอนไซม์จำเพาะของพวกเขาและติ๊ดโอกาสใด ๆ ที่จะหาจำนวนกิจกรรมเซลลูเลส หนึ่งในสี่ของศตวรรษที่ผ่านมาและ Zitomer Eveleigh [10] แนะนำแล้วที่จะใช้ความระมัดระวังเมื่อตีความผลการใช้ไอโอดีนเปื้อนแผ่น CMC-วุ้น พวกเขาพบว่าจำนวนเงินขนาดเล็กของการปนเปื้อนแป้งในสาหร่ายในเชิงพาณิชย์ทำให้การย้อมสีที่ไม่น่าเชื่อถือ ความกังวลของพวกเขาได้รับการพิสูจน์และขยายในขณะนี้โดยการควบคุมแสดงที่นี่ (รูปที่ 1) การใช้งานของ CMC-agar (หรือ -agarose หรือ -Gelrite) ในการเชื่อมต่อกับการย้อมสีแกรมของไอโอดีนเป็นวิธีการแบบสแตนด์อะโลนสามารถจึงไม่ถือว่าเป็นที่น่าเชื่อถือ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม้จะใช้ความกว้างของจานล้าง assay จาก CMC –วุ้นเป็นฉาวโฉ่สำหรับความจำเพาะต่ำ การผลิต รัศมีรอบอื่น ๆทำให้เอนไซม์อะไมเลส และ agarase พอลิเมอร์เช่น ( รูปที่ 1A ) , อิสระของตน หรือขาดเอนไซม์พื้นผิว ( เช่น , CMC ) ( รูปที่ 1A ) สิ่งประดิษฐ์ที่เกิดขึ้นเช่นเดียวกันกับตัวแทนอื่น ๆเช่น gelling , gelrite ตัวเลข ( 1C ) และกับคนอื่น ๆวิธีการย้อมสีเช่นคองโกเรด ( ข้อมูลไม่แสดง ) ท่ามกลางปัญหาเหล่านี้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งพื้นผิวอิสระสร้างรัศมีอย่างจริงจังผลกระทบหนึ่งในเกณฑ์ที่สำคัญที่สุดของเอนไซม์ ) , ความจำเพาะและขจัดโอกาสใด ๆที่มีกิจกรรมเอนไซม์ . ไตรมาสของศตวรรษที่ผ่านมา zitomer และ eveleigh [ 10 ] แนะนำให้ใช้ความระมัดระวังเมื่อแปลผลโดยใช้ไอโอดีนเปื้อน CMC –วุ้นแผ่น พวกเขาพบว่า ปริมาณการปนเปื้อนขนาดเล็ก แป้งใน agars พาณิชย์ทำคราบที่ไม่น่าเชื่อถือ ความกังวลของพวกเขาได้พิสูจน์และขยายโดยการควบคุมที่แสดงที่นี่ ( รูปที่ 1 ) ใช้ CMC ) ( หรือ ) ( หรือ ) gelrite ) ในการเชื่อมต่อกับกรัมของไอโอดีนเปื้อนเป็นวิธีเดี่ยวจึงไม่ถือว่าเชื่อถือได้