Materials and methods2.1 Growth med

Materials and methods

2.1 Growth media
Artificial seawater medium modified to contain 5 mM calcium was used for diatoms (ASP2,[25]) and marine broth, 2216 [Difco] for bacteria. For some experiments bacteria and diatoms were grown in ASP2 enriched with 0.2% D-glucose and 0.05% yeast extract [HO medium]. Mixotrophic (10–15 μmolm-2 s-1) and heterotrophic growth (darkness) experiments with diatoms were carried out with the addition of 0.5 mM organic substrates, as described previously.[24]

2.2 Organisms
The diatoms were isolated from stabilized patches of sediment. Amphora coffeaeformis was isolated from a mangrove swamp drainage[24] and Navicula sp.l was isolated from False Bay, San Juan Is., WA. Axenic cultures were made by picking colonies from streaked plates and re-streaking the enrichments until there was no growth of contaminating bacteria in ASP2 seawater medium enriched with 0.05% D-glucose and 0.02% yeast extract. Bacteria were isolated from the same sediment sample as the diatom Navicula sp.l. The sediment particles were washed aseptically with marine medium by decantation. The washed particles were then treated with ultrasound in a low power sonic cleaning bath to remove bacteria attached to sediment particles. This enrichment of attached bacteria was used to inoculate 2216 petri plates for the isolation of experimental organisms. The bacterium used here was identified by its 16-S RNA sequence and fatty acid methyl ester profile as Pseudoalteromonas haloplanktis by MIDI labs, Newark, DE and Microcheck Inc., Northfield Falls, VT.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการ2.1 เจริญเติบโตของสื่อกลางทะเลเทียมแก้ไขประกอบด้วยแคลเซียม 5 มม.ใช้สำหรับอะตอม (ASP2,[25]) และน้ำซุปทะเล 2216 [Difco] สำหรับแบคทีเรีย สำหรับการทดลองบางอย่าง แบคทีเรียและอะตอมที่ปลูกใน ASP2 อุดม ด้วย 0.2% D-กลูโคสและ 0.05% ยีสต์สารสกัด [กลางโฮจิมินห์] Mixotrophic (10 – 15 μmolm-2 รายการ s-1) และ heterotrophic เติบโต (ความมืด) ในการทดลองกับอะตอมถูกดำเนินการ ด้วยการเพิ่มพื้นผิวอินทรีย์ 0.5 มม. ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [24]2.2 สิ่งมีชีวิตอะตอมถูกแยกจากแพทช์เสถียรของตะกอน ช้า ๆ coffeaeformis แยกจากระบายน้ำพรุป่าชายเลน [24] และ sp.l จัดแยกจากอ่าว False ซานฮวนเป็น WA วัฒนธรรม axenic ทำ โดยรับอาณานิคมจากแผ่นอกลาย และหลาก enrichments ตัวใหม่จนกว่าจะมีไม่เจริญเติบโตของแบคทีเรียใน ASP2 กลางทะเลที่อุดม ด้วย 0.05% D-กลูโคสและยีสต์ 0.02% สารสกัดจาก แบคทีเรียที่แยกได้จากตัวอย่างตะกอนเดียวกันเป็น sp.l การจัดไดอะตอม อนุภาคตะกอนถูกล้าง aseptically ด้วยกลางทะเล โดย decantation อนุภาคล้างแล้วได้รับการรักษา ด้วยเครื่องอัลตราซาวด์ในพลังงานต่ำโซนิคทำความสะอาดอ่างน้ำเพื่อเอาอนุภาคตะกอนแบคทีเรีย ใช้เพิ่มคุณค่านี้ในแบคทีเรียแนบแผ่นเพาะ 2216 สำหรับแยกของสิ่งมีชีวิตทดลองปลูกฝี แบคทีเรียที่ใช้ที่นี่ถูกระบุ 16 S RNA ลำดับและเมทิลเอสเทอร์กรดไขมันเป็น Pseudoalteromonas haloplanktis โดย MIDI labs นวร์ก DE และหน่วย Inc. แรมนอร์ทฟิลด์ฟอลส์ VT.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ2.1 การเจริญเติบโตของสื่อกลางทะเลเทียมที่ถูกปรับเปลี่ยนเพื่อให้มีแคลเซียม 5 มิลลิเมตรใช้สำหรับไดอะตอม (ASP2 [25]) และน้ำซุปทะเล 2216 [Difco] สำหรับแบคทีเรีย สำหรับบางคนการทดลองเชื้อแบคทีเรียและไดอะตอมถูกปลูกใน ASP2 อุดมไปด้วย 0.2% D-กลูโคสและสารสกัดจากยีสต์ 0.05% [กลาง HO] Mixotrophic (10-15 μmolm-2 S-1) และการเจริญเติบโต heterotrophic (มืด) การทดลองกับไดอะตอมได้ดำเนินการด้วยนอกจากนี้ที่ 0.5 มิลลิเมตรพื้นผิวอินทรีย์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้. [24] 2.2 ขีไดอะตอมที่แยกได้จากแพทช์ที่มีความเสถียรของ ตะกอน. Amphora coffeaeformis ถูกแยกออกจากการระบายน้ำป่าชายเลนป่าพรุ [24] และ Navicula sp.l แยกได้จาก False Bay, ซานฮวนคือ., วอชิงตัน วัฒนธรรม Axenic ถูกสร้างขึ้นมาโดยการเลือกอาณานิคมจากแผ่นลายและ re-พุ่ง enrichments จนกว่าจะมีการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียที่ปนเปื้อนในอาหารไม่มีน้ำทะเล ASP2 อุดมไปด้วย 0.05% D-กลูโคสและสารสกัดจากยีสต์ 0.02% เชื้อแบคทีเรียที่แยกได้จากตัวอย่างตะกอนดินเช่นเดียวกับไดอะตอม Navicula sp.l. อนุภาคตะกอนถูกล้างปลอดเชื้อที่มีขนาดกลางทะเลโดย decantation อนุภาคล้างได้รับการรักษาแล้วด้วยอัลตราซาวนด์ในห้องอาบน้ำทำความสะอาดพลังงานคลื่นเสียงต่ำเพื่อกำจัดเชื้อแบคทีเรียที่แนบมากับอนุภาคตะกอน การเพิ่มปริมาณของเชื้อแบคทีเรียที่แนบมานี้ถูกใช้ในการฉีดวัคซีน 2216 จาน Petri การแยกของสิ่งมีชีวิตทดลอง แบคทีเรียที่ใช้ที่นี่ได้รับการระบุ 16-S ลำดับอาร์เอ็นเอและกรดไขมันเมทิลเอสเตอร์รายละเอียดของมันเป็น Pseudoalteromonas haloplanktis โดยห้องปฏิบัติการ MIDI, นวร์ก, และ Microcheck อิงค์ Northfield Falls, VT

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ2.1 การเจริญเติบโตของสื่อกลางน้ำทะเลเทียมปรับเปลี่ยนประกอบด้วยแคลเซียม 5 มม. ใช้ไดอะตอม ( asp2 [ 25 ] ) และทะเลน้ำซุป , 1977 [ difco ] แบคทีเรีย บางการทดลองเชื้อแบคทีเรียและไดอะตอมโตใน asp2 อุดมไปด้วยดี กูลโคส 0.2% และ 0.05 % สารสกัดจากยีสต์ [ โฮปานกลาง ] mixotrophic ( 10 – 15 μ molm-2 ที่สุด ) และการเจริญเติบโตแบบ ( ความมืด ) การทดลองกับไดอะตอม พบว่ามีการเพิ่ม 0.5 มม. อินทรีย์พื้นผิวตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 24 ]2.2 สิ่งมีชีวิตที่แยกได้จากแพทช์ของไดอะตอมมีตะกอน coffeaeformis Amphora แยกจากป่าชายเลนระบาย [ 24 ] และ navicula ตลาดไฟฟ้าโดยพิจารณาการสูญเสียกำลังถูกแยกจากอ่าวเท็จ , San Juan , WA . วัฒนธรรม axenic า โดยเลือกลายแผ่นและ streaking อาณานิคมจากที่ enrichments จนไม่มีการเจริญเติบโตของแบคทีเรียปนเปื้อนในน้ำทะเล asp2 ขนาดกลาง อุดมไปด้วยดี กูลโคส 0.05 % และสารสกัดจากยีสต์ 0.02 % แบคทีเรียที่แยกได้จากตัวอย่างดินตะกอนเหมือนไดอะตอม navicula sp.l. ตะกอนอนุภาคถูกล้าง aseptically กับทะเลปานกลางโดย decantation . ล้างแล้วการรักษาด้วยอัลตราซาวด์ในอนุภาคพลังงานต่ำโซนิคทำความสะอาดอ่างอาบน้ำที่จะลบแบคทีเรียที่แนบมากับอนุภาคตะกอน นี้เสริมแนบแบคทีเรียใช้ปลูกฝี 1977 Petri แผ่นสำหรับการแยกสิ่งมีชีวิตทดลอง แบคทีเรียที่ใช้ที่นี่ถูกระบุโดย 16-s RNA ลำดับและกรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ รายละเอียดเป็น haloplanktis pseudoalteromonas โดย MIDI Labs , Newark , DE และ microcheck อิงค์ Northfield Falls ,