Abstract. Phosporothioate oligonucl

Abstract. Phosporothioate oligonucleotides represent an important class of therapeutic oligonucleotides,
in which none-bridging oxygen atoms of the phosphate groups are replaced by sulfur. These
oligonucleotides are designed to treat disease by modulating gene expression of an affected individual.
As the development and application of these therapeutical oligonucleotides require analytical support,
the development, validation, and application of an assay for the quantitative analysis of a
phosporothioate oligonucleotide in rat plasma is described. The method employs ion-pair reversedphase
chromatography on a monolithic capillary column with acetonitrile gradients in cyclohexyldimethylammonium
acetate for separation and high-resolution tandem mass spectrometry for detection of
nucleic acids. Chromatographic parameters (i.e. column temperature, mobile phase composition) as well
as mass spectrometric parameters (i.e. spray voltage, gas flow, and capillary position, scan mode) have
been optimized for sensitive oligonucleotide quantification. Furthermore, a solid-phase extraction
method was developed which enabled processing of 10 μl of plasma. The five-point calibration curve
showed linearity over the range of concentrations from 100 to 1,000 nM of the oligonucleotide. The limit
of detection was 50 nM. The intra- and inter-day precision and accuracies were always better than
10.2 %. Using this assay, we performed a pharmacokinetic study of the phosporothioate oligonucleotide
in rat treated with a single intravenous dose of 0.39 μmol/kg. The assay sensitivity was sufficient to study
the early phase elimination of the oligonucleotide. Small amounts of the oligonucleotide were detectable

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นามธรรม oligonucleotides phosporothioate เป็นตัวแทนของชั้นเรียนที่สำคัญของ oligonucleotides รักษา
ที่ไม่มีใครแก้อะตอมออกซิเจนของกลุ่มฟอสเฟตจะถูกแทนที่ด้วยกำมะถัน เหล่านี้ oligonucleotides
ถูกออกแบบมาเพื่อรักษาโรคโดยการแสดงออกของยีนเลตของแต่ละบุคคลได้รับผลกระทบ.
การพัฒนาและการประยุกต์ใช้เหล่านี้ oligonucleotides อายุรเวทต้องการการสนับสนุนการวิเคราะห์
พัฒนาการตรวจสอบและการประยุกต์ใช้การวิเคราะห์สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณของ
oligonucleotide phosporothioate ในพลาสม่าหนูจะอธิบาย วิธีการที่มีพนักงาน reversedphase ไอออนคู่ได้
ในคอลัมน์โครมาฝอยเสาหินที่มีการไล่ระดับสี acetonitrile ใน cyclohexyldimethylammonium
น้ำนมสำหรับการแยกและความละเอียดสูงตีคู่มวลสารในการตรวจหากรดนิวคลีอิก
พารามิเตอร์โครมา (อุณหภูมิคอลัมน์เช่นองค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่) ในขณะที่
ดีเป็นพารามิเตอร์ Spectrometric มวล (แรงดันเช่นสเปรย์การไหลของก๊าซและตำแหน่งหลอดเลือดฝอยโหมดการสแกน) มี
ถูกปรับให้เหมาะสมกับปริมาณ oligonucleotide มีความละเอียดอ่อน นอกจากนี้การสกัดของแข็งเฟสวิธี
ได้รับการพัฒนาซึ่งเปิดใช้งานการประมวลผลของ 10 ไมโครลิตรของพลาสม่า ห้าจุด
กราฟมาตรฐานแสดงให้เห็นความเป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้นตั้งแต่ 100 ถึง 1,000 นาโนเมตรของ oligonucleotide
ขีด จำกัด ของการตรวจสอบเป็น 50 นาโนเมตรความแม่นยำภายในและระหว่างวันและความถูกต้องเป็นเสมอดีกว่า
10.2% โดยใช้วิธีนี้เราดำเนินการศึกษาเภสัชจลนศาสตร์ของ
oligonucleotide phosporothioate ในหนูรับการรักษาด้วยยาทางหลอดเลือดดำเดียว 0.39 ไมโครโมล / กิโลกรัม ทดสอบความไวเพียงพอที่จะศึกษา
ขจัดขั้นตอนการเริ่มต้นของการ oligonucleotide ขนาดเล็กจำนวน oligonucleotide ถูกตรวจพบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ Phosporothioate oligonucleotides หมายถึงคลาสที่มีความสำคัญของยา oligonucleotides,
ในออกซิเจนที่ไม่มีกาลแทนอะตอมของกลุ่มฟอสเฟต ด้วยกำมะถัน เหล่านี้
oligonucleotides ถูกออกแบบมาเพื่อรักษาโรค โดยยีนของแต่ละบุคคลได้รับผลกระทบเกี่ยว
เป็นการพัฒนาและประยุกต์ oligonucleotides therapeutical เหล่านี้ต้องสนับสนุนวิเคราะห์,
พัฒนา ตรวจสอบ การประยุกต์การวิเคราะห์สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณของการ
oligonucleotide phosporothioate ในพลาสม่าหนูจะอธิบาย วิธีการใช้ไอออนคู่ reversedphase
chromatography คอลัมน์รูพรุนเสาหินด้วย acetonitrile ไล่ระดับสีใน cyclohexyldimethylammonium
acetate สำหรับการแยกและความละเอียดสูงตัวตามกันไปรเมทตรวจ
กรดนิวคลีอิก พารามิเตอร์ chromatographic (เช่นอุณหภูมิของคอลัมน์ องค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่) เช่น
เป็นจำนวนมาก spectrometric พารามิเตอร์ (เช่นสเปรย์แรงดัน กระแสก๊าซ และ ตำแหน่งรูพรุน สแกนโหมด) ได้
ถูกเหมาะ oligonucleotide สำคัญนับ นอกจากนี้ การแยกเฟสของแข็ง
วิธีได้รับการพัฒนาซึ่งเปิดใช้งานการประมวลผลของ μl 10 ของพลาสมา โค้งห้าจุดเทียบ
พบแบบดอกไม้ช่วงความเข้มข้น 100 กับ 1000 nM oligonucleotide จะ วงเงิน
ของตรวจได้ 50 nM วันอินทรา และ inter แม่นยำและ accuracies ก็ดีกว่า
10.2% เราใช้การทดสอบนี้ ดำเนินการศึกษา pharmacokinetic phosporothioate oligonucleotide
ในหนูที่รักษา ด้วยยาฉีดเดียวของ μmol 0.39 kg ความไวการวิเคราะห์เพียงพอต่อการศึกษา
ตัดระยะเริ่มต้นของ oligonucleotide จะ เงิน oligonucleotide จะได้สามารถตรวจสอบได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความจริง. oligonucleotides phosporothioate เป็นตัวแทนระดับ First Class ที่สำคัญของการบำบัดโรค oligonucleotides
ในระดับอะตอมซึ่งไม่มีออกซิเจน - การเชื่อมโยงของกลุ่มฟอสเฟตที่จะถูกแทนที่ด้วยกำมะถัน
oligonucleotides เหล่านี้ได้รับการออกแบบมาเพื่อการรักษาโรคโดยการแสดงออกของยีน modulating แต่ละคนได้รับผลกระทบ.
เป็นการพัฒนาและแอปพลิเคชันของ oligonucleotides ในทางอายุรเวทเหล่านี้ต้องการการสนับสนุนในการวิเคราะห์
แอปพลิเคชันและการตรวจสอบการพัฒนาสอบสำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณของ oligonucleotide
phosporothioate ในจอพลาสม่าหนูได้อธิบายไว้ วิธีการที่มีพนักงาน reversedphase ไอออน - คู่
ตามมาตรฐานในคอลัมน์ chromatography ซึ่งมีรูเล็กเป็นเสาหินที่พร้อมด้วยการไล่สี acetonitrile ใน cyclohexyldimethylammonium
เกลือของกรดน้ำส้มสำหรับการแยกตัวและความละเอียดสูง spectrometry จำนวนมากสำหรับการตรวจจับของกรด
อยู่. พารามิเตอร์ chromatographic (ขั้นตอนการเขียนแบบพกพาเช่นคอลัมน์ อุณหภูมิ )เป็นอย่างดี
ซึ่งจะช่วยเป็นพารามิเตอร์ spectrometric จำนวนมาก(เช่นพ่นแรงดันการไหลของก๊าซและตำแหน่งซึ่งมีรูเล็กสแกน)มี
รับการปรับแต่งสำหรับ oligonucleotide จึงจำเป็นต้องมีตัวพิมพ์ใหญ่หรือตัวพิมพ์เล็ก ยิ่งไปกว่านั้นยังเป็นขั้นตอนการขุด
วิธีการที่ได้รับการพัฒนาขึ้นซึ่งจะช่วยในการเปิดใช้งานการประมวลผลของ 10 μl ของจอพลาสมา การปรับเทียบ 5 จุดที่ทำให้ปรับตามความโค้งมน
ซึ่งจะช่วยแสดงให้เห็นถึงความต่อเนื่องเป็นแนวนอน,กับช่วงของความเข้มข้นจาก 100 ถึง 1 , 000 นาโนเมตรของ oligonucleotide ได้ การจำกัด
ซึ่งจะช่วยในการตรวจจับได้ 50 นิวตันเมตรaccuracies และความแม่นยำ ภายใน และระหว่างวันที่อยู่ดีกว่า
10.2% การใช้สอบนี้เราได้ทำการศึกษา pharmacokinetic ของ oligonucleotide phosporothioate ที่
ซึ่งจะช่วยในการรักษาด้วยยาหนูผู้เชี่ยวชาญแห่งเดียว 0.39 μmol /กก. ระดับความไวสอบที่มาก็มากพอในการศึกษาวิจัยการกำจัดระยะแรก
ของ oligonucleotide ได้ จำนวนของ oligonucleotide ขนาดเล็กที่สามารถตรวจพบได้