The proper procedure for a batch fe

The proper procedure for a batch fermentation is first to inoculate a small flask of nutrient broth with a pure culture from a Petri dish, a culture tube (containing liquid nutrient), or a slant tube (containing solid gel). The inoculated flask is constantly agitated in a temperature controlled flask shaker. A small amount of the culture in the original flask is pipetted out during the exponential growth phase, or log phase, and is used to inoculate the next flask. This process is repeated a few times to ensure that the culture is acclimated before it is employed to study the fermentation kinetics. A similar process of repeated inoculation is carried out in the fermentation industry to build up enough inoculum needed to seed a larger fermentor. To reduce the shock resulting from a drastic change in the growth environment, the composition of the media used in preparing the inoculum should optimally be identical as that used in the main process.
When working with a pure culture, one must operate under the assumption that contaminating microorganisms are present everywhere in the open environment, a fact demonstrated in our previous experiment. It is important to know intuitively when sterile tools or glassware must be used and when sterilization is not necessary. This requires the ability to distinguish clearly the sterile side from the nonsterile side. In this experiment, the interior of the shaker flask is the sterile portion of the system. Anything that is that part of the system and anything that ever comes in direct contact with that part of the system must be sterile. Thus, the nutrient in the shaker flask before inoculation must be sterile, which in turn requires that the reservoir storing the filtered nutrient is sterile and that the entire process of dispensing the nutrient from the medium jar to the shaker flask is carried out aseptically. In addition, items that enter the shaker flask such as the cotton plug, inoculation loop, sampling pipets, and even air must all be sterile.

Most practical industrial fermentation processes are based on complex media because of the cost and the choice of the nutrients and the ease of nutrient preparation. For example, complex media for yeast fermentation can be easily prepared in a lab by following the same recipe as that used in the YPG agar, minus the agar: 5g/l yeast extract, 10g/l Peptone, and 5g/l glucose. However, the use of complex media is discouraged in the fundamental studies of fermentation kinetics because of the possibility of variations in the nutrient composition from run to run. For example, the exact content of a yeast extract preparation is not known, and its nutritional quality may vary from batch to batch. On the other hand, a defined medium can be reproduced time after time to ensure the reproducibility of biochemical experiments. The disadvantage of a defined medium is that there is always the possibility of missing some important growth factors. The formulation of a defined medium is often a tedious process of trial and error. However, a well formulated defined medium can support the healthy growth and maintenance of cells as effectively as, or sometimes superior to, a complex one. A defined medium will be used in this experiment.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ขั้นตอนที่เหมาะสมสำหรับหมักชุดแรกเป็นฉีดยาป้องกันหนาวเล็ก ๆ ของธาตุอาหารซุปกับวัฒนธรรมบริสุทธิ์จากจานเพาะเชื้อ หลอดวัฒนธรรม (ประกอบด้วยสารเหลว), หรือหลอดเอียง (ประกอบด้วยเจลแข็ง) หนาว inoculated ตลอดเวลานั้นกระตุ้นทำในการเชคเกอร์หนาวควบคุมอุณหภูมิ วัฒนธรรมในหนาวเดิมจำนวน pipetted ออกในช่วงระยะเรขา หรือขั้นตอนการบันทึก และใช้ฉีดหนาวต่อไป กระบวนการนี้ซ้ำกี่ครั้งเพื่อให้แน่ใจว่า วัฒนธรรม acclimated ก่อนมีการจ้างงานการศึกษาจลนพลศาสตร์หมัก กระบวนการคล้ายกันของ inoculation ซ้ำจะดำเนินในอุตสาหกรรมหมักสร้าง inoculum พอต้องเมล็ด fermentor ขนาดใหญ่ เพื่อลดภาวะช็อกที่เกิดจากการเปลี่ยนแปลงที่รุนแรงในสภาพแวดล้อมเจริญเติบโต ส่วนประกอบของสื่อที่ใช้ในการเตรียม inoculum ในอย่างเหมาะสมที่ควรเหมือนกับที่ใช้ในกระบวนการหลักการ เมื่อทำงานกับวัฒนธรรมบริสุทธิ์ หนึ่งต้องดำเนินงานภายใต้สมมุติฐานที่ว่าจุลินทรีย์ขยะมีอยู่ทุกที่ในสภาพแวดล้อมที่เปิด แสดงความจริงในการทดลองก่อนหน้านี้ของเรา จึงควรทราบหมดเมื่อใส่เครื่องมือหรือเครื่องแก้วต้องใช้และเมื่อฆ่าเชื้อไม่จำเป็น นี้ต้องใช้ความสามารถในการแยกแยะอย่างชัดเจนด้านใส่จากด้าน nonsterile ในการทดลองนี้ ภายในของหนาวเชคเกอร์มีส่วนฆ่าเชื้อของระบบ สิ่งที่เป็นส่วนหนึ่งของระบบและสิ่งที่เคยมาติดต่อโดยตรงกับส่วนหนึ่งของระบบ ต้องผ่านการฆ่าเชื้อ ดังนั้น สารในหนาวเชคเกอร์ก่อน inoculation ต้องได้ใส่ ซึ่งจะต้องว่าอ่างเก็บน้ำเก็บสารกรองฆ่าเชื้อ และว่า กระบวนการทั้งหมดของสารจากขวดกลางจะหนาวเชคเกอร์มหาศาลดำเนิน aseptically นอกจากนี้ สินค้าที่ป้อนหนาวเชคเกอร์เช่นฝ้าย ต่อ inoculation วน pipets การสุ่มตัวอย่าง และอากาศแม้แต่ทั้งหมดต้องผ่านการฆ่าเชื้อ กระบวนการหมักอุตสาหกรรมสุดจะขึ้นอยู่กับสื่อที่ซับซ้อนเนื่องจากต้นทุนและทางเลือกของสารอาหารและความสะดวกในการเตรียมธาตุอาหาร ตัวอย่าง สื่อที่ซับซ้อนสำหรับการหมักยีสต์สามารถได้เตรียมในห้องปฏิบัติการตามสูตรเดียวกันกับที่ใช้ใน agar YPG ลบการ agar: 5g/l ยีสต์สกัด 10g/l Peptone และกลูโคส 5g/l ได้ อย่างไรก็ตาม การใช้สื่อที่ซับซ้อนเป็นกำลังใจในการศึกษาพื้นฐานของจลนพลศาสตร์หมักเนื่องจาก มีความเป็นไปได้ของความแตกต่างในองค์ประกอบธาตุอาหารจากรันรัน ตัวอย่าง ไม่ทราบเนื้อหาแน่นอนของการเตรียมยีสต์สกัด และคุณภาพทางโภชนาการอาจแตกต่างจากชุดชุด บนมืออื่น ๆ สื่อกำหนดสามารถจะทำซ้ำหลังให้ reproducibility ทดลองชีวเคมี ข้อเสียของสื่อกลางที่กำหนดคือมีเสมอสามารถเจริญเติบโตปัจจัยสำคัญบางตัวที่ขาดหายไป แบ่งกลางกำหนดมักจะเป็นกระบวนการที่น่าเบื่อของการลองผิดลองถูก อย่างไรก็ตาม กำหนดสื่อดี formulated สามารถสนับสนุนสุขภาพการเจริญเติบโตและบำรุงรักษาเซลล์เป็นอย่างมีประสิทธิภาพ เป็น หรือบางครั้งซู อันซับซ้อน กลางกำหนดจะใช้ในการทดลองนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขั้นตอนที่เหมาะสมสำหรับการหมักเป็นชุดแรกที่จะฉีดวัคซีนขวดเล็ก ๆ ของน้ำซุปสารอาหารที่มีวัฒนธรรมบริสุทธิ์จากจาน Petri หลอดวัฒนธรรม (ที่มีสารอาหารที่เป็นของเหลว) หรือหลอดเอียง (ที่มีเจลแข็ง) ขวดเชื้อจะไม่สบายใจอย่างต่อเนื่องในการควบคุมอุณหภูมิขวดเครื่องปั่น จำนวนเงินขนาดเล็กของวัฒนธรรมในขวดเดิมปิเปตออกมาในช่วงระยะการเจริญเติบโตชี้แจงหรือเข้าสู่ระบบขั้นตอนและจะใช้ในการฉีดวัคซีนขวดต่อไป กระบวนการนี้ซ้ำแล้วซ้ำอีกไม่กี่ครั้งเพื่อให้แน่ใจว่าวัฒนธรรมที่มีการปรับตัวก่อนที่จะถูกนำมาใช้เพื่อการศึกษาจลนศาสตร์ของการหมัก กระบวนการที่คล้ายกันของการฉีดวัคซีนซ้ำแล้วซ้ำอีกจะดำเนินการในอุตสาหกรรมการหมักเพื่อสร้างเชื้อพอที่จำเป็นในการหมักเมล็ดขนาดใหญ่ เพื่อลดแรงกระแทกที่เกิดจากการเปลี่ยนแปลงที่รุนแรงในสภาพแวดล้อมการเจริญเติบโตองค์ประกอบของสื่อที่ใช้ในการเตรียมเชื้อได้อย่างดีที่สุดควรจะเหมือนกันกับที่ใช้ในกระบวนการหลัก
เมื่อทำงานร่วมกับเชื้อบริสุทธิ์คนหนึ่งต้องดำเนินงานภายใต้สมมติฐานที่ว่า การปนเปื้อนเชื้อจุลินทรีย์ที่มีอยู่ทุกที่ในสภาพแวดล้อมที่เปิดความจริงแสดงให้เห็นในการทดลองก่อนหน้านี้ มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะรู้อย่างสังหรณ์ใจเมื่อเครื่องมือที่ผ่านการฆ่าเชื้อหรือแก้วจะต้องใช้และเมื่อฆ่าเชื้อที่ไม่จำเป็น นี้ต้องใช้ความสามารถในการแยกแยะความแตกต่างอย่างชัดเจนด้านการฆ่าเชื้อจากด้าน nonsterile ในการทดลองนี้ภายในของขวดเครื่องปั่นคือส่วนที่ผ่านการฆ่าเชื้อของระบบ อะไรที่เป็นส่วนหนึ่งของระบบและสิ่งที่เคยมาในการติดต่อโดยตรงกับส่วนหนึ่งของระบบที่จะต้องผ่านการฆ่าเชื้อที่ ดังนั้นสารอาหารในขวดเครื่องปั่นก่อนที่จะฉีดวัคซีนจะต้องผ่านการฆ่าเชื้อซึ่งจะต้องมีการจัดเก็บที่อ่างเก็บน้ำสารอาหารที่กรองเป็นหมันและว่ากระบวนการทั้งหมดของการจ่ายสารอาหารจากขวดกลางขวดเครื่องปั่นจะดำเนินการในขวดทดลอง นอกจากนี้รายการที่ใส่ขวดเครื่องปั่นเช่นปลั๊กฝ้ายห่วงการฉีดวัคซีนการสุ่มตัวอย่าง pipets และแม้กระทั่งอากาศทั้งหมดจะต้องผ่านการฆ่าเชื้อในทางปฏิบัติส่วนใหญ่กระบวนการหมักอุตสาหกรรมจะขึ้นอยู่กับสื่อที่มีความซับซ้อนเนื่องจากค่าใช้จ่ายและทางเลือกของสารอาหารและ ความสะดวกในการเตรียมอาหาร ยกตัวอย่างเช่นสื่อที่ซับซ้อนสำหรับการหมักยีสต์สามารถเตรียมได้ง่ายในห้องปฏิบัติการโดยทำตามสูตรเดียวกับที่ใช้ในอาหารเลี้ยงเชื้อ YPG ลบวุ้น: สารสกัดจาก 5g / ลิตรยีสต์ 10g / ลิตรเปปโตนและ 5g / ลิตรน้ำตาลกลูโคส อย่างไรก็ตามการใช้สื่อที่ซับซ้อนเป็นกำลังใจในการศึกษาพื้นฐานของจลนศาสตร์หมักเพราะความเป็นไปได้ของการเปลี่ยนแปลงในองค์ประกอบของสารอาหารจากการทำงานเพื่อให้ทำงานได้ ตัวอย่างเช่นเนื้อหาที่แน่นอนของการเตรียมสารสกัดจากยีสต์ที่ไม่เป็นที่รู้จักและมีคุณภาพทางโภชนาการของมันอาจแตกต่างจากชุดที่ชุด ในทางตรงกันข้าม, ขนาดกลางที่กำหนดสามารถทำซ้ำครั้งแล้วครั้งเล่าเพื่อให้แน่ใจว่าการทำสำเนาของการทดลองทางชีวเคมี ข้อเสียของการเป็นสื่อที่กำหนดไว้คือว่ามีความเป็นไปได้ของหายไปบางปัจจัยการเจริญเติบโตที่สำคัญ การกำหนดขนาดที่กำหนดมักจะเป็นกระบวนการที่น่าเบื่อของการทดลองและข้อผิดพลาด แต่กลางกำหนดสูตรดีสามารถรองรับการเติบโตที่ดีต่อสุขภาพและการบำรุงรักษาของเซลล์อย่างมีประสิทธิภาพเป็นหรือบางครั้งดีกว่าที่ซับซ้อนหนึ่ง กลางที่กำหนดไว้จะถูกนำมาใช้ในการทดลองนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขั้นตอนที่เหมาะสมสำหรับการหมักแบบก่อนฉีดขวดเล็ก ๆของน้ำซุปสารอาหารที่มีวัฒนธรรมบริสุทธิ์จากจานเพาะเชื้อ วัฒนธรรมหลอด ( ประกอบด้วยสารอาหารเหลว ) หรือเอียงหลอด ( ประกอบด้วยเจลแข็ง ) ที่ใส่ขวดอยู่ตลอดเวลา agitated ในขวดเขย่าควบคุมอุณหภูมิ .จำนวนเล็ก ๆของวัฒนธรรมในขวดเดิม pipetted ออกในระหว่างขั้นตอนการเจริญเติบโต หรือ log phase และใช้ฉีดขวดต่อไป ขั้นตอนนี้ซ้ำหลายครั้งเพื่อให้แน่ใจว่าวัฒนธรรมเป็นแบบก่อนที่จะใช้ศึกษาและทำกระบวนการที่คล้ายกันของการฉีดวัคซีนซ้ำจะดําเนินการในอุตสาหกรรมการหมักเพื่อสร้างปริมาณที่เพียงพอต้องการเมล็ดถังขนาดใหญ่ เพื่อลดการกระแทกที่เกิดจากการเปลี่ยนแปลงที่รุนแรงในสภาพแวดล้อมการเจริญเติบโต , องค์ประกอบของสื่อที่ใช้ในการเตรียมเชื้อที่เหมาะสมที่สุดควรเป็นเหมือนกันเหมือนกับที่ใช้ในกระบวนการหลัก
เมื่อทำงานกับวัฒนธรรมบริสุทธิ์หนึ่งจะต้องดำเนินการภายใต้สมมติฐานว่า การปนเปื้อนจุลินทรีย์มีอยู่ทุกที่ในสภาพแวดล้อมเปิดความจริงแสดงให้เห็นในการทดลองก่อนหน้านี้ของเรา มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะทราบว่าสังหรณ์ใจเมื่อเครื่องมือปลอดเชื้อ หรือแก้ว จะต้องใช้เมื่อฆ่าเชื้อ ไม่จําเป็น นี้ต้องใช้ความสามารถในการแยกแยะความแตกต่างอย่างชัดเจนด้านเป็นหมันจากด้าน nonsterile .ในการทดลองนี้ การตกแต่งภายในของการเขย่าขวดเป็นส่วนงานของระบบ อะไรที่เป็นส่วนหนึ่งของระบบ และอะไรที่เคยมาติดต่อโดยตรง กับ ที่เป็นส่วนหนึ่งของระบบจะต้องเป็นหมัน ดังนั้น สารอาหารในการเขย่าขวดก่อนใช้ต้องปลอดเชื้อซึ่งจะต้องมีแหล่งเก็บกรองสารอาหารปราศจากเชื้อ และกระบวนการทั้งหมดของการได้รับสารอาหารจากอาหารโถปั่นขวดน้ำ aseptically . นอกจากนี้ สินค้าที่ใส่ขวดเขย่า เช่น ฝ้าย เสียบใส่ห่วง pipets การสุ่มตัวอย่าง และแม้แต่อากาศคงจะเป็นหมัน

กระบวนการหมักอุตสาหกรรมปฏิบัติส่วนใหญ่จะขึ้นอยู่กับสื่อที่ซับซ้อนเนื่องจากค่าใช้จ่ายและทางเลือกของสารอาหารและความสะดวกในการเตรียมสารอาหาร ตัวอย่างเช่น สื่อที่ซับซ้อนสำหรับการหมักยีสต์สามารถเตรียมได้ง่ายในแล็บ โดยต่อไปนี้สูตรเดียวกับที่ใช้ในบรรษัทภิบาลวุ้น , วุ้น : 5 g / l ด้วยสารสกัดจากยีสต์ 10 กรัม / ลิตร , 5 ลิตร ตามลำดับ และกลูโคส อย่างไรก็ตามการใช้สื่อที่ซับซ้อนจะหมดกำลังใจในการศึกษาจลนพลศาสตร์ของการหมัก เพราะพื้นฐานของความเป็นไปได้ของการเปลี่ยนแปลงในองค์ประกอบธาตุอาหารจากวิ่งไปวิ่งมา ตัวอย่างเช่น เนื้อหาที่แน่นอนของยีสต์สกัดการไม่เป็นที่รู้จัก และคุณภาพทางโภชนาการของมันอาจแตกต่างไปจากชุดชุด บนมืออื่น ๆกําหนดขนาดกลางสามารถทำซ้ำเมื่อเวลาผ่านไปเพื่อให้แน่ใจว่าตรวจสอบการทดลองทางชีวเคมี ข้อเสียของสื่อที่กำหนดไว้ว่ามีความเป็นไปได้ของหายไปบางปัจจัยการเจริญเติบโตที่สำคัญ การกำหนดของนิยามสื่อมักจะเป็นกระบวนการที่น่าเบื่อของการทดลองและข้อผิดพลาด อย่างไรก็ตามดีสูตรกำหนดขนาดกลางสามารถสนับสนุนการเติบโตและการบำรุงรักษาเซลล์อย่างมีประสิทธิภาพ หรือบางครั้งดีกว่า , ที่ซับซ้อน กำหนดสื่อจะถูกใช้ในการทดลองนี้
.