DGGE was performed using a D-Code System (Bio Rad, Philadelphia, PA) maintained at a constant temperature of 60 C in
1TAE buffer. PCR products were loaded onto 8% (w/v) polyacrylamide gels (37.5:1, acrylamide/bisacrylamide) using a denaturing gradient ranging from 35% to 65% denaturant (100% denaturant corresponded to 7 mol urea and 40% formamide in the 1TAE buffer). Gels were run at 80 V for 12 h and stained with SYBR Gold nucleic acid stain (Invitrogen, Carlsbad, CA). The resultant image was analysed using Quantity One 4.6.2 software (Bio-Rad, Hercules, USA) to obtain the fingerprint patterns and to calculate the band similarities
DGGE ได้รับการดำเนินการโดยใช้ระบบ D-Code (ไบโอราด, Philadelphia, PA) เก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิคงที่ 60 องศาเซลเซียสใน
1 บัฟเฟอร์ TAE ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกโหลดลง 8% (w / v) เจลอะคริเลต (37.5: 1, ริลาไมด์ / bisacrylamide) โดยใช้การไล่ระดับสี denaturing ตั้งแต่ 35% ถึง 65% denaturant (100% denaturant ตรงกับ 7 ยูเรียโมลและ 40% ใน formamide 1 TAE บัฟเฟอร์) เจลวิ่งที่ 80 V 12 ชั่วโมงและย้อมด้วยสี SYBR? กรดนิวคลีอิกคราบทอง (Invitrogen, Carlsbad, CA) ภาพผลลัพธ์ที่ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้จำนวนหนึ่ง 4.6.2 ซอฟแวร์ (Bio-Rad ดาว, สหรัฐอเมริกา) เพื่อให้ได้รูปแบบลายนิ้วมือและการคำนวณความคล้ายคลึงกันในวง
การแปล กรุณารอสักครู่..
