β-Carotene bleaching testAntioxidan

β-Carotene bleaching test
Antioxidant activity was determined using the β-carotene
bleaching test with some modifications [33,34]. Briefly,
1 mL of β-carotene solution (0.2 mg/mL in chloroform) was
added to 0.02 mL of linoleic acid and 0.2 mL of 100%
Tween 20. After evaporation of chloroform and dilution with
water, 5 mL of the emulsion was transferred into different
test tubes containing 0.2 mL of samples in 70% ethanol at
different concentrations. Standard (propyl gallate) at the
same concentration as samples was used for comparison. The
tubes were then gently shaken and placed at 45°C in a water
bath for 60 minutes. The absorbance of the samples, standard
and control, was measured at 470 nm using a Perkin Elmer
Lambda 40 UV/VIS spectrophotometer (Perkin Elmer,
Monza, Italy) against a blank, consisting of an emulsion
without β-carotene. The measurement was carried out at
initial time (t = 0) and successively at 30 and 60 minutes. All
samples were assayed in triplicate and the mean value was
calculated. The AA was measured in terms of successful
bleaching β-carotene by using the following equation:
AA = 1 − A0 − At ð Þ= A-0 − A-t ½ ð Þ × 100
where A0 and A°0 are the absorbance values measured at the
initial incubation time for samples/standard and control,
respectively. At and A°t are the absorbance values measured
in the samples/standard and control, respectively, at t = 30
minutes and t = 60 minutes.
2.8. Bovine brain peroxidation assay
The in vitro AA tests were carried out using the TBA test
[34] modified as reported by Conforti et al [33]. The TBA
reaction is based on the fact that peroxidation of most
membrane systems leads to formation of small amounts of
free malonaldehyde (MDA).MDAreacts with TBA to yield a
colored product, which in an acid environment absorbs light
at 532 nm and is readily extractable into organic solvents. The
intensity of color is a measure of MDA concentration.
Absorbance at 532 nm was determined on a Perkin Elmer
Lambda 40 UV/VIS spectrophotometer (Perkin Elmer,
Monza, Italy). The incorporation of any antioxidant compound
in the bovine brain peroxidation assay reaction
mixture will lead to a reduction of the extent of peroxidation.
The extract and fractions were tested for their AA against
liposomes that were prepared from bovine brain extract in
phosphate-buffered saline (5 mg/mL). Peroxidation was
started by adding FeCl3 (1 mmol/L) and ascorbic acid (1
mmol/L), followed by incubation at 37°C for 20 minutes.
Ascorbic acid is a well-known antioxidant, but it also has
prooxidant properties in the presence of certain transition
metal ions, such as Fe or Cu. Butylated hydroxytoluene
(BHT) in ethanol was added to prevent lipid peroxidation
during the TBA test itself. Propyl gallate (0.1 mmol/L) was
used as a positive control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบการฟอกสีβ-แคโรทีนกำหนดกิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระโดยใช้การβ-แคโรทีนฟอกสีทดสอบปรับเปลี่ยนบางอย่าง [33,34] สั้น ๆมี 1 mL ของβ-แคโรทีน (0.2 mg/mL ในคลอโรฟอร์ม)เพิ่ม 0.02 มล.กรด linoleic และ 0.2 mL 100%Tween 20 หลังจากระเหยของคลอโรฟอร์มและเจือจางด้วยน้ำ 5 mL ของอิมัลชันจะถูกโอนย้ายไปยังแตกต่างกันหลอดทดสอบ 0.2 mL อย่างในเอทานอล 70% ที่ประกอบด้วยความเข้มข้นแตกต่างกัน มาตรฐาน (propyl gallate) ในการความเข้มข้นเดียวกันเป็นตัวอย่างที่ใช้สำหรับการเปรียบเทียบ ที่หลอดถูกเบา ๆ เขย่า แล้ววางไว้ที่ 45° C ในน้ำบาท 60 นาที Absorbance ของตัวอย่าง มาตรฐานและควบคุม ถูกวัดที่ 470 nm ใช้เป็นเพอร์เอลเมอเครื่องทดสอบกรดด่าง UV/VIS แลมบ์ดา 40 (เพอร์เอลเมอมหาวิหารมอนซา อิตาลี) กับช่องว่าง อิมัลชันประกอบด้วยโดยβ-แคโรทีน การประเมินที่ดำเนินการที่เวลาเริ่มต้น (t = 0) และติด ๆ กัน ที่ 30 และ 60 นาที ทั้งหมดตัวอย่างที่ assayed ใน triplicate และค่าเฉลี่ยคำนวณ AA ถูกวัดประสบความสำเร็จฟอกสีβ-แคโรทีน โดยใช้สมการต่อไปนี้:AA = 1 − A0 −ที่ðÞ = A 0 − A-t ½ðÞ× 100A0 และ° 0 ค่า absorbance ที่วัดนี้เวลาเริ่มบ่มตัวอย่าง/มาตรฐานและการควบคุมตามลำดับ และองศา t มีค่า absorbance ที่วัดได้ตัวอย่าง/มาตรฐานและควบคุม ตามลำดับ ที่ t = 30นาทีและ t = 60 นาที2.8. วัวสมอง peroxidation วิเคราะห์การทดสอบ AA ในได้ดำเนินการโดยใช้การทดสอบ TBA[34] แก้ไขเป็นรายงานโดย Conforti et al [33] TBAปฏิกิริยาจะขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่า peroxidation ของที่สุดเมมเบรนระบบนำไปสู่การก่อตัวของเงินฟรี malonaldehyde (MDA) MDAreacts กับ TBA ให้ผลการผลิตภัณฑ์สี ซึ่งในกรดดูดซับแสงที่ 532 nm และ extractable พร้อมเป็นอินทรีย์ ที่ความเข้มของสีเป็นการวัดความเข้มข้นของ MDAAbsorbance ที่ 532 nm กำหนดบนการเพอร์เอลเมอเครื่องทดสอบกรดด่าง UV/VIS แลมบ์ดา 40 (เพอร์เอลเมอมหาวิหารมอนซา อิตาลี) ในการต้านอนุมูลอิสระใด ๆ ผสมประสานในสมองวัว peroxidation ทดสอบปฏิกิริยาส่วนผสมจะนำไปสู่การลดลงของขอบเขตของ peroxidationทดสอบสารสกัดและส่วนในของ AA กับแยก liposomes ที่ถูกเตรียมจากสมองวัวในbuffered ฟอสเฟตน้ำเกลือ (5 mg/mL) มี peroxidationเริ่มต้น โดยเพิ่ม FeCl3 (1 mmol/L) และกรดแอสคอร์บิค (1mmol/L), ตาม ด้วยการบ่มที่ 37 ° C 20 นาทีกรดแอสคอร์บิคเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่รู้จักกันดี แต่ยังมีคุณสมบัติ prooxidant ในต่อหน้าของช่วงการเปลี่ยนภาพบางอย่างโลหะกัน เช่น Fe หรือจุฬาฯ Butylated hydroxytoluene(บาท) ในเอทานอลถูกเพิ่มเพื่อป้องกัน peroxidation ของไขมันในระหว่างการทดสอบ TBA เอง มี propyl gallate (0.1 mmol/L)ใช้เป็นตัวควบคุมบวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

β-แคโรทีนการทดสอบฟอกกิจกรรมสารต้านอนุมูลอิสระที่ถูกกำหนดโดยใช้βแคโรทีนการทดสอบการฟอกสีมีการปรับเปลี่ยนบาง[33,34] สั้น ๆ1 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหาβแคโรทีน (0.2 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรในคลอโรฟอร์ม) ถูกเพิ่ม0.02 มิลลิลิตรของกรดไลโนเลอิกและ 0.2 มิลลิลิตร 100% Tween 20. หลังจากการระเหยของคลอโรฟอร์มและเจือจางกับน้ำ5 มิลลิลิตรอิมัลชันถูกย้าย ที่แตกต่างกันลงในหลอดทดลองที่มี0.2 มิลลิลิตรของกลุ่มตัวอย่างในเอทานอล 70% ที่ความเข้มข้นที่แตกต่างกัน มาตรฐาน (โพรพิ gallate) ที่มีความเข้มข้นเช่นเดียวกับกลุ่มตัวอย่างที่ใช้ในการเปรียบเทียบ หลอดถูกแล้วเขย่าเบา ๆ และวางไว้ที่ 45 องศาเซลเซียสในน้ำอาบน้ำ60 นาที การดูดกลืนแสงของตัวอย่างมาตรฐานและการควบคุมการวัดที่ 470 นาโนเมตรโดยใช้ Perkin Elmer แลมบ์ดา 40 UV / VIS spectrophotometer (Perkin Elmer, มอนซาประเทศอิตาลี) กับว่างเปล่าประกอบด้วยอิมัลชันโดยไม่ต้องβแคโรทีน วัดได้ดำเนินการที่เวลาเริ่มต้น (t = 0) และต่อเนื่องวันที่ 30 และ 60 นาที ทั้งหมดตัวอย่าง assayed ในเพิ่มขึ้นสามเท่าและค่าเฉลี่ยที่ถูกคำนวณ เอเอวัดในแง่ของการประสบความสำเร็จในการฟอกสีβแคโรทีนโดยใช้สมการดังต่อไปนี้: AA = 1 - A0 - ณ ðÞ = A-0 - ที่½ðÞ× 100 ที่ A0 และ A ° 0 จะมีค่าการดูดกลืนแสงที่วัดได้ที่เวลาบ่มเริ่มต้นสำหรับตัวอย่าง / มาตรฐานและการควบคุมตามลำดับ ที่และ A °ทีเป็นค่าการดูดกลืนแสงที่วัดได้ในตัวอย่าง/ มาตรฐานและการควบคุมตามลำดับที่ t = 30 นาทีและ t = 60 นาที. 2.8 สมองวัว peroxidation ทดสอบในหลอดทดลองทดสอบAA ได้ดำเนินการโดยใช้การทดสอบ TBA [34] การปรับเปลี่ยนตามการรายงานของ Conforti et al, [33] TBA ปฏิกิริยาจะขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าส่วนใหญ่ peroxidation ระบบเมมเบรนจะนำไปสู่การก่อตัวของขนาดเล็กจำนวนmalonaldehyde ฟรี (MDA) .MDAreacts กับส ธ ที่จะให้ผลผลิตสินค้าสีซึ่งในสภาพแวดล้อมที่เป็นกรดดูดซับแสงที่532 นาโนเมตรและเป็นที่สกัดได้อย่างง่ายดาย เข้าไปในตัวทำละลายอินทรีย์ ความเข้มของสีเป็นตัวชี้วัดของความเข้มข้นของภาคตะวันออกเฉียงเหนือได้. ดูดกลืนแสงที่ 532 นาโนเมตรถูกกำหนดในเพอร์กินเอลเมอแลมบ์ดา40 UV / VIS spectrophotometer (Perkin Elmer, มอนซาประเทศอิตาลี) รวมตัวกันของสารต้านอนุมูลอิสระใด ๆในสมองของวัว peroxidation ปฏิกิริยาทดสอบส่วนผสมจะนำไปสู่การลดลงของขอบเขตของการperoxidation ที่. สารสกัดและเศษส่วนได้รับการตรวจ AA ของพวกเขากับไลโปโซมที่ถูกจัดทำขึ้นจากสารสกัดจากสมองวัวในน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์(5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) peroxidation ถูกเริ่มต้นโดยการเพิ่มFeCl3 (1 มิลลิโมล / ลิตร) และวิตามินซี (1 มิลลิโมล / ลิตร) ตามด้วยการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที. วิตามินซีเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่รู้จักกันดี แต่ก็ยังมีคุณสมบัติprooxidant ใน การปรากฏตัวของการเปลี่ยนแปลงบางอย่างไอออนโลหะเช่นทองแดงหรือเฟ butylated hydroxytoluene (BHT) ในเอทานอลถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อป้องกันไม่ให้เกิด lipid peroxidation ในระหว่างการทดสอบตัวเองจะแจ้งภายหลัง Propyl gallate (0.1 มิลลิโมล / ลิตร) ถูกใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บีตา - แคโรทีน ฟอก

ทดสอบฤทธิ์ต้านบีตา - แคโรทีนถูกกำหนดโดยใช้การทดสอบกับการปรับเปลี่ยนบางอย่าง
[ 33,34 ] สั้น ๆ ,
1 มิลลิลิตรของบีตา - แคโรทีน ( 0.2 mg / ml ในสารละลายคลอโรฟอร์ม ) คือ
เพิ่ม 0.02 มิลลิลิตรของกรด linoleic และ 0.2 มล. 100 %
Tween 20 หลังจากการระเหยของคลอโรฟอร์มและเจือจางด้วยน้ำ 5 มิลลิลิตร
, อิมัลชันถูกถ่ายโอนลงในหลอดทดลองที่มีแตกต่างกัน
02 ml ของตัวอย่างในเอทานอล 70% ที่
ความเข้มข้นต่างกัน มาตรฐาน ( โพรพิลแกลเลต ) ที่ความเข้มข้นเดียวกัน
ตัวอย่างที่ใช้สำหรับการเปรียบเทียบ
แล้วเขย่าเบา ๆและหลอดวางไว้ที่ 45 ° C ในอ่างน้ำ
เป็นเวลา 60 นาที มีการดูดกลืนแสงของตัวอย่างมาตรฐานการควบคุม
และวัดที่ 470 nm ใช้เพอร์กินเอลเมอร์
แลมบ์ดา 40 UV / VIS Spectrophotometer ( เพอร์กินเอลเมอร์
Monza , ,อิตาลี ) กับเปล่าประกอบด้วยปริมาณบีตา - แคโรทีน
โดยไม่ต้อง . การวัดโดยใช้เวลาเริ่มต้นที่
( t = 0 ) และกระชั้นชิดที่ 30 และ 60 นาที ตัวอย่างทั้งหมด
ถูก assayed ทั้งสามใบและค่าเฉลี่ยอยู่ที่
คํานวณ AA เป็นวัดในแง่ของบีตา - แคโรทีนประสบความสำเร็จ
ฟอกโดยใช้สมการต่อไปนี้ :
1 A0 = −−ที่ðÞ = a-0 −½× 100
a-t ðÞที่ขนาด A0 และองศา 0 เป็นค่าวัดค่าการดูดกลืนแสงที่
เวลาในการบ่มเริ่มต้นตัวอย่าง / มาตรฐานและการควบคุม
ตามลำดับ และบริเวณที่ทีนค่าที่วัดได้
ในตัวอย่าง / มาตรฐานและการควบคุมตามลำดับที่ T
T = = 30 นาทีและ 60 นาที
2.8 . สมอง (
- ) ในหลอดทดลอง AA ทดสอบโดยใช้การทดสอบ
TBA[ 34 ] แก้ไขรายงานโดย CONFORTI et al [ 33 ] จาก TBA
ปฏิกิริยาจะขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าส่วนใหญ่ของระบบเมมเบรน -
นำไปสู่การก่อตัวของจํานวนเล็ก
มาโลนัลดีไฮด์ฟรี ( 2 ) mdareacts กับ TBA กับผลผลิตสี
ซึ่งในสภาพแวดล้อมที่เป็นกรดจะดูดซับแสง
ที่ 532 nm และพร้อมสกัดในตัวทำละลายอินทรีย์
ความเข้มของสีคือ การวัดความเข้มข้น 2 .
การดูดกลืนแสงที่ 532 นาโนเมตร ตัดสินใจใน เพอร์กินเอลเมอร์
แลมบ์ดา 40 UV / VIS Spectrophotometer ( เพอร์กินเอลเมอร์
, มอนซา , อิตาลี ) การผสมของสารต้านอนุมูลอิสระในวัวใช้สมอง
-
ปฏิกิริยาผสมจะนำไปสู่การลดลงของขอบเขตของ - .
สกัดและเศษส่วน ทดสอบของ AA กับ
ไลโปโซมที่เตรียมจากสารสกัดสมองวัวในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (
5 mg / ml ) - คือ
เริ่มต้นด้วยการเพิ่ม FeCl3 ( 1 มิลลิโมล / ลิตร ) และกรดแอสคอร์บิค ( 1
mmol / L ) รองลงมา คือ บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 20 นาที วิตามินซีเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่รู้จักกันดี

แต่มันยังมีคุณสมบัติ prooxidant ในการแสดงตนของไอออนโลหะเปลี่ยน
บางประเภท เช่น เหล็ก หรือ จุฬาฯ จักรภพ
( บาท ) ในเอทานอลเพิ่ม เพื่อป้องกันการเกิด lipid peroxidation
ในระหว่างการทดสอบ TBA นั่นเอง โพรพิลแกลเลต ( 0.1 มิลลิโมล / ลิตร ) คือ
ใช้เป็นตัวควบคุมบวก