(Colleaux et al., 1986). Similar re

(Colleaux et al., 1986). Similar results were obtained with 100% of the constructs in the orientation (-). It is unlikely that the DNA sequence of the insert is deleterious for the host cell, since the insert can be integrated in orientation (-) and since E. coli can propagate pUC57 carrying I-SceI gene. Thus, these results suggest that (1) I-SceI gene is expressed when inserted in orientation (+) in pIJ6902 and (2) the produced mRNA or protein is deleterious for the host cell. A trivial hypothesis to explain this deleterious effect is that the I-SceI protein could cut the host chromosome through its endonuclease activity. However, I-SceImeganuclease targets an 18 bp recognition sequence which theoretically appears once in 70 billion bases of a random sequence and which is absent from 7 sequenced E. coli genomes. An alternative hypothesis for I-SceI toxicity in E. coli is that it could bind and inhibit a trans factor or aspecifically interact with DNA. The fact that I-SceI gene is expressed when inserted in orientation (+) implies that the gene is transcribed from the tipA promoter or from another promoter sequence upstream NdeI cloning site. Yet, no known sigma factors binding elements of E. coli has been identified upstream the cloning site. Furthermore, the cloning site is flanked by two strong transcriptional terminators, excluding any transcription initiation of I-SceI gene from another open reading frame of pIJ6902.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

(Colleaux et al., 1986) ผลคล้ายได้รับ 100% ของโครงสร้างในการวางแนว (-) ก็ไม่น่าลำดับดีเอ็นเอของการแทรกว่าร้ายเซลล์โฮสต์ เนื่อง จากสามารถรวมการแทรกใน (-) และเนื่อง จาก E. coli สามารถแพร่กระจายยีน-SceI กระเป๋า pUC57 ดังนั้น ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำ (1) ฉัน-SceI ยีนที่จะแสดงเมื่อใส่ใน (+) ใน pIJ6902 และ mRNA หรือโปรตีน (2)ผลิตเป็นร้ายเซลล์โฮสต์ สมมติฐานเล็กน้อยอธิบายผลร้ายนี้เป็นโปรตีน-SceI สามารถตัดโครโมโซมโฮสต์ผ่านกิจกรรมของ endonuclease อย่างไรก็ตาม -SceImeganuclease เป้าหมายลำดับการจำแนก bp ที่ 18 ซึ่งครั้งแรกราคาปรากฏครั้งใน 70 ล้านฐานลำดับแบบสุ่ม และที่จะขาด 7 เรียงลำดับ genomes E. coli สมมติฐานการสำรองสำหรับ-SceI toxicity ใน E. coli ได้ที่ aspecifically ติดต่อกับดีเอ็นเอสามารถผูก และยับยั้งปัจจัยการธุรกรรม ความจริง-SceI ยีนที่จะแสดงเมื่อใส่ใน (+) หมายถึงยีนเป็นทับศัพท์ จากโปรโมเตอร์ทิพา หรือโปรโมเตอร์ลำดับขั้นต้นน้ำ NdeI cloning ไซต์อื่น ยัง ปัจจัยซิกไม่ทราบองค์ประกอบรวมของ E. coli ได้ระบุต้นน้ำไซต์ cloning นอกจากนี้ เว็บไซต์ cloning ขนาบข้าง ด้วยสองแรง transcriptional ต่อ ไม่รวมใด ๆ เริ่มต้น transcription ของยีน-SceI จากอื่นอ่านเปิดกรอบของ pIJ6902

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(Colleaux et al., 1986) ผลที่คล้ายกันกับที่ได้รับ 100% ของโครงสร้างในการวางแนว (-) มันไม่น่าที่ลำดับดีเอ็นเอของแทรกเป็นอันตรายสำหรับเซลล์โฮสต์ตั้งแต่แทรกสามารถบูรณาการในแนว (-) และตั้งแต่เชื้อ E. coli สามารถเผยแพร่ pUC57 แบกยีน I-SCEI ดังนั้นผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า (1) ยีน I-SCEI จะแสดงเมื่อแทรกในแนว (+) ใน pIJ6902 และ (2) การผลิต mRNA หรือโปรตีนที่เป็นอันตรายสำหรับเซลล์โฮสต์ สมมติฐานเล็กน้อยเพื่ออธิบายเรื่องนี้มีผลเป็นอันตรายก็คือโปรตีน I-SCEI สามารถตัดโครโมโซมโฮสต์ผ่านกิจกรรมของ endonuclease แต่ผม-SceImeganuclease เป้าหมายลำดับการรับรู้ bp 18 ซึ่งในทางทฤษฎีจะปรากฏเพียงครั้งเดียวใน 70 พันล้านฐานลำดับแบบสุ่มและที่จะหายไปจาก 7 ลำดับจีโนมอีโคไล สมมติฐานทางเลือกสำหรับการเป็นพิษ I-SCEI ในเชื้อ E. coli คือว่ามันจะผูกมัดและยับยั้งปัจจัยทรานส์หรือ aspecifically โต้ตอบกับดีเอ็นเอ ความจริงที่ว่ายีน I-SCEI จะแสดงเมื่อแทรกในแนว (+) แสดงให้เห็นว่ายีนที่มีการคัดลอกจากโปรโมเตอร์ทิพาหรือจากลำดับโปรโมเตอร์ต้นน้ำเว็บไซต์โคลน NdeI อื่น ยังไม่มีปัจจัยที่มีผลผูกพันซิกรู้จักกันองค์ประกอบของเชื้อ E. coli ได้รับการระบุต้นน้ำเว็บไซต์โคลน นอกจากนี้เว็บไซต์โคลนถูกขนาบข้างด้วยสองจุดสิ้นสุดการถอดรหัสที่แข็งแกร่งไม่รวมถอดความเริ่มต้นใด ๆ ของ I-SCEI ยีนจากกรอบเปิดอ่านอีก pIJ6902

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( colleaux et al . , 1986 ) ผลที่คล้ายกันได้รับ 100% ของโครงสร้างในการวางแนว ( - ) มันไม่น่าที่ดีเอ็นเอลำดับใส่เป็นอันตรายสำหรับเซลล์โฮสต์ เพราะแทรกสามารถบูรณาการในการปฐมนิเทศ ( - ) และตั้งแต่ E . coli สามารถเผยแพร่ puc57 แบกยีน i-scei . ดังนั้นผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า ( 1 ) i-scei ยีนแสดงออกเมื่อแทรกในการปฐมนิเทศ ( ) ใน pij6902 และ ( 2 ) ผลิตโปรตีน mRNA หรือเป็นอันตรายสำหรับเซลล์โฮสต์ สมมุติฐานเล็กน้อยที่จะอธิบายนี้ผลคงเป็นว่า i-scei โปรตีนสามารถตัดโฮสต์ที่ผ่านกิจกรรมเอนโดนิวคลีเอสของ อย่างไรก็ตามi-sceimeganuclease เป้าหมาย 18 BP ยอมรับลำดับซึ่งในทางทฤษฎีจะปรากฏขึ้นเมื่อ 70 ล้านฐานของลำดับแบบสุ่มและที่ขาดจาก E . coli 7 ลำดับเบสจีโนม . สมมติฐานทางเลือกสำหรับ i-scei พิษใน E . coli คือ มันสามารถผูกและยับยั้งปัจจัย trans หรือ aspecifically ปฏิสัมพันธ์กับดีเอ็นเอความจริงที่ i-scei ยีนแสดงออกเมื่อแทรกในการปฐมนิเทศ ( ) หมายถึง ยีน เป็น การทับศัพท์จากโปรโมเตอร์หรือจากโปรโมเตอร์อื่นหรือลำดับต้น ndei โคลนเว็บไซต์ ยังไม่มีปัจจัย Sigma รวมองค์ประกอบของ E . coli ที่ได้รับการระบุโดยการโคลนเว็บไซต์ นอกจากนี้ การโคลนเว็บไซต์ถูกขนาบข้างด้วยสองคนเหล็ก particle แข็งแรงยกเว้นมีการถอดความยีน i-scei จากที่อื่นเปิดอ่านกรอบของ pij6902 .