The total PCR reaction volume of 25

The total PCR reaction volume of 25 lL contained 2 lL of virus cDNA or RNA/DNA, 0.5 lM of each primer, 2.5 lL of 10 PCR buffer (100 mM Tris-HCl pH 8.8,500 mM KCl, 0.8% NP-40), 2 mM MgCl2, 0.2 mM each dNTP, 1.25 U of Taq polymerase polymerase(Sangon) and 17.25 lL distilled water. The PCR reaction was performed underthe following conditions in a thermal cycler (Bioer): initial denaturation at 94 C for 3 min; 35 cycles of denaturation at 94 C for 30 s, annealing at 55 C for 30 s and extension at 72 C for 30 s; then final extension at 72 C for 7 min. PCR products were analysed by electrophoresis in 1% agarose for single PCR or 2.5% agarose for multiplex PCR, followed by ethidium bromide staining and visualisation under
ultraviolet light.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปริมาณปฏิกิริยา PCR รวม 25 จะมีอยู่ 2 lL ของ cDNA ไวรัสหรือ RNA/DNA, 0.5 lM แต่ละพื้น 2.5 lL 10 PCR บัฟเฟอร์ (100 mM ทริสเรทติ้ง HCl pH 8.8,500 mM KCl, 0.8% NP-40), 2 มม. MgCl2, 0.2 mM dNTP, 1.25 U polymerase(Sangon) พอลิเมอเรส Taq น้ำ 17.25 จะกลั่น ปฏิกิริยา PCR เป็นการทำ underthe ต่อเงื่อนไขใน cycler มีความร้อน (Bioer): แปรสภาพต้น 94 c เป็นเวลา 3 นาที รอบ 35 ของการแปรสภาพที่ 94 C 30 s หลอมที่ 55 C s และนามสกุลที่ C 72 30 30 s แล้ว นามสกุลสุดท้าย 72 c เป็นเวลา 7 นาทีผลิตภัณฑ์ PCR ถูกนำมาวิเคราะห์ โดยอิใน 1% agarose สำหรับ PCR หรือ 2.5% agarose เดียวสำหรับ multiplex PCR ตาม ด้วยย้อมสีโบรไมด์ ethidium และสร้างมโนภาพภายใต้แสงอัลตราไวโอเลต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รวม PCR ปริมาณการเกิดปฏิกิริยาของ 25 LL มี 2 LL ของยีนไวรัสหรือ RNA / ดีเอ็นเอ 0.5 LM ของแต่ละไพรเมอร์ 2.5 LL 10? PCR บัฟเฟอร์ (100 มิลลิเมตร Tris-HCl ค่า pH 8.8,500 มิลลิโพแทสเซียมคลอไรด์ 0.8% NP-40) 2 mm MgCl2 0.2 มิลลิแต่ละ dNTP 1.25 U ของ Taq โพลิเมอร์โพลิเมอร์ (Sangon) และ 17.25 LL น้ำกลั่น ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการสังกัดเงื่อนไขต่อไปนี้ใน Cycler ความร้อน (Bioer): denaturation เริ่มต้นที่ 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาที; 35 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที, การอบที่ 55 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาทีและการขยายที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที?; แล้วขยายสุดท้ายที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR มาวิเคราะห์โดย electrophoresis ใน 1% agarose เดียว PCR หรือ agarose 2.5% สำหรับ multiplex PCR ตามด้วยการย้อมสี ethidium bromide และการมองเห็นภายใต้
แสงอัลตราไวโอเลต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทั้งหมดเพื่อตรวจหาปริมาณ 25 จะประกอบด้วย 2 จะไวรัสดีเอ็นเอหรืออาร์เอ็นเอ / DNA 0.5 LM ของแต่ละแนวทาง 2.5 จะ 10 เทคนิคบัฟเฟอร์ ( 100 มม. หรือ HCl Ph 8.8500 mm . , 0.8% np-40 ) , 2 มม. ชุดละ 0.2 มม. dntp 1.25 U ของแท็กการใช้ ( แสงอ่อน ) 17.25 ll และน้ำกลั่น การตรวจปฏิกิริยาแสดงภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้ในรอบความร้อน ( bioer ) : เริ่มต้นที่ 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาที ( ; 30 รอบ ( ที่ 94 C 30 วินาที annealing ที่ 55 C เป็นเวลา 30 วินาทีและส่วนขยายที่ 72 C 30 S ; แล้วนามสกุลสุดท้ายที่ 72 C เป็นเวลา 7 นาที ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ วิเคราะห์โดยวิธี PCR ใน ( 1 ) เดียวหรือ 2.5% ( สำหรับ multiplex PCR ตามคู่ bromide staining และภาพภายใต้แสงอัลตราไวโอเลต