2.3 การเตรียมและการแพร่กระจายของเซลล์ยีสต์ยีสต์แห้งชนิดผง ( S . cerevisiae ) คือ aseptically เชื้อเออร์เลนเมเยอร์สิบ 150 มิลลิลิตรขวดแต่ละที่มี 50 ml ฆ่าเชื้อยีสต์ malt extract ( YM ) ซุป ขวดอุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง และ 100 รอบต่อนาทีใน incubator shaker ( Innova 4000 ใหม่ brinswick ทางวิทยาศาสตร์ , USA ) ร้อยละสิบของปริมาณที่ถูก aseptically โอนคนละ 10 ฆ่าเชื้อขวด 100 ml 250 มิลลิลิตร เออร์เลนเมเยอร์ที่มีฆ่าเชื้อขนาดกลาง pygal ประกอบด้วย ( % ; w / v ) extract สารสกัดจากยีสต์ kh2po4 0.3 0.3 0.1 , 0.1 และกาแลคโตส MgSO4 ใด้วย 7h2o 2.0 พีเอชของอาหารปรับ 5.6 และ flasks อุณหภูมิ 35 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในตู้อบที่ 100 รอบต่อนาทีปั่น . 50 มิลลิลิตรของเชื้อที่ได้จากแต่ละขวด หลังจากบ่ม 24 ชั่วโมง คือ aseptically ย้ายไป 1-l ขวดบรรจุ 500 มิลลิลิตร ฆ่าเชื้อ pygal ปานกลาง 10 1-l flasks อุณหภูมิ 35 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในตู้อบที่ 100 รอบต่อนาทีปั่น . pygal กลางเตรียมสดแต่ละครั้ง เพียงก่อนที่จะหมัก ตามลำดับ เซลล์มีความเข้มข้นโดยการเหวี่ยงแยกของวัฒนธรรมในการฆ่าเชื้อหลอดปั่นเหวี่ยงที่ 10000g 4 ° C เป็นเวลา 10 นาทีในการเหวี่ยงเย็น ( sorvall ความเร็ว FCC B , sorvall Inc . , USA ) และน่านถูกทิ้งจากขายขาดและท่อที่มีอัตรา votexed ใน Vortex เครื่องปั่น . เนื้อหาจากหลอดทั้งหมดเป็น aseptically โอนสองฆ่าเชื้อ 50 มล. ขายขาด . ขึ้นอยู่กับเซลล์นับในการกระบวนการทำซ้ำสำหรับความเข้มข้นต่อไปของเซลล์ เนื่องจากวัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือ เพื่อให้ได้ผลผลิตเอทานอลสูง เซลล์มีความเข้มข้นถึงระดับ 3 × 109 เซลล์ / มิลลิลิตร เพื่อวัตถุประสงค์ในการฉีดวัคซีน การศึกษาก่อนหน้านี้รายงานว่า S . cerevisiae ที่ปลูกบนกาแลกโตสช่วยในการหมักกลูโคสและกาแล็กโทสพร้อมกันในเซลล์และความหนาแน่นสูง ( ernandes et al . , 1992 ) ในการศึกษาก่อนหน้านี้ เราพบว่า 30% เพิ่มการผลิตเอทานอลจาก Kinnow ( Citrus reticulata ) โดยใช้เชื้อ S . cerevisiae เซลล์ที่ปลูกบนกาแลกโตสเมื่อเทียบกับเซลล์ที่ปลูกในกลูโคสในกระบวนการ SSF ( ข้อมูลไม่แสดง )
การแปล กรุณารอสักครู่..
