In aquaculture, antibiotics, includ

In aquaculture, antibiotics, including penicillins and amphenicols,
have been used mainly for therapeutic purposes and as prophylactic
agents. Their extensive administration to fish, such as
gilthead seabream, destined for human consumption, has become
a serious problem because their residues can persist in edible animal
tissues. Their use inevitably leads to the selection of resistant
forms of bacteria in the ecosystem of use. (Samanidou & Evaggelopoulou,
2007; Samanidou, Evaggelopoulou, & Papadoyannis,
2006) (see Fig. 3).
There is now a strict legislative framework controlling the use
of such substances, in order to reduce in minimum the risk to human
health associated with the consumption of their residues. To
ensure human food safety the European Union (EU) has set tolerance
levels for these compounds as maximum residue limits
(MRLs), with the Council Regulation EEC 37/2010, which describes
the procedure for the establishment of MRLs for veterinary medicinal
products in foodstuffs of animal origin. State laboratories of
the EU have to put into practise methods for screening and confirming
residues possibly present in fish samples. MRL values in
fish muscle and skin in natural proportion for antibiotics as set
by EU are given in Table 1 (Commission Regulation (EU) No 37/
2010).
Recently a UHPLC–MS/MS method for the determination of
antibiotics from several classes in gilthead seabream was
published; however amphenicols are not included in this paper
(Pereira Lopes, Cazorla Reyes, Romero-González, Martínez Vidal,
& Garrido Frenich, 2012). In literature only one analytical method
has been developed for the determination of CAP in gilthead
seabream (Tyrpenou, Rigos, & Athanassopoulou, 2002).
There are also a few analytical methods that have been developed
for the determination of penicillins and amphenicols in other
sea species, such as yellow tail, rainbow trout, dab, shrimp, catfish,
grass carp and scampi, but not in gilthead seabream. All methods
that were published in literature concerning the multi-residue
analysis of these antibiotics in different food-producing fish tissues
mentioned less than three analytes (Ang et al., 2000; Ding, Shen,
Zhang, Jiang, & Sun, 2005; Gikas, Kormali, Tsipi, & Tsarbopoulos,
2004; Hormazabal et al., 1993; Nagata & Saeki, 1992; Rønning,
Einarsen, & Asp, 2006; Tyrpenou et al., 2002; Wrzesinski & Crouch,
2003; Wrzesinski et al., 2006).
Most of the methods above used solid phase extraction for the
isolation of the analytes from the fish tissue (Gikas et al., 2004;
Mottier, Parisod, Gremaud, Guy, & Stadler, 2003; Nagata & Saeki,
1992; Tyrpenou et al., 2002; Wrzesinski & Crouch, 2003; Wrzesinski
et al., 2006). The rest methods used liquid–liquid extraction with
different combinations of solvents, such as ethyl acetate, dichloromethane,
chloroform and n-hexane (Ang et al., 2000; Ding et al.,
2005; Hormazabal, Steffenak, & Yndestad, 1993; Rønning et al.,
2006; Takino, Daishima, & Nakahara, 2003).
Finally, the majority of the methods involves HPLC for analysis,
and only one uses gas chromatography (Ding et al., 2005; Gikas
et al., 2004; Hormazabal et al., 1993; Mottier et al., 2003; Nagata
& Saeki, 1992; Takino et al., 2003; Tyrpenou et al., 2002;
Wrzesinski & Crouch, 2003). Detection is achieved with UV or mass
spectrometry (Ang et al., 2000; Ding et al., 2005; Gikas et al., 2004;
Hormazabal et al., 1993; Mottier et al. 2003; Nagata and Saeki,
1992; Pereira Lopes et al., 2012; Rønning et al., 2006; Takino
et al., 2003; Tyrpenou et al., 2002; Wrzesinski and Crouch, 2003;
Wrzesinski et al., 2006; Mottier et al. 2003).
The aim of the present study was to develop and evaluate a confirmatory
HPLC method for the determination of six penicillin antibiotics
(ampicillin (AMP), penicillin G or benzylpenicillin (PG),
penicillin V (PV), oxacillin (OXA), cloxacillin (CLO) and dicloxacillin
(DICLO) and three amphenicols antibiotics (chloramphenicol
(CAP), florfenicol (FFC) and thiamphenicol (TAP) in gilthead
seabream tissue. The extraction of the examined antibiotics was
performed by a liquid–liquid extraction step followed by a solid
phase extraction clean-up step. The developed method was fully
validated in terms of selectivity, linearity, accuracy, precision,
stability and sensitivity according to the European Commission
Decision 2002/657/EC.
2. Experimental
2.1. Reagents and materials
AMP, PG (potassium salt), PV (potassium salt), OXA, CLO, DICLO,
TAP and FFC were purchased from Sigma (St. Louis, MO, USA). CAP
was purchased from Alfa Aesar GmbH CoKG (Karlsruhe, Germany).
Ammonium acetate was purchased from Riedel-de Haen (Buchs
SG, Switzerland) and acetone from Merck (Damstadt, Germany).
Lamotrigine (LTG) was purchased from Wellcome Foundation
(London, UK) and used as internal standard (IS). HPLC grade methanol
(MeOH) and acetonitrile (ACN) were supplied by Fisher Scientific
(Loughborough, Leicestershine, UK). Trifluoroacetic acid 99%
was obtained from Aldrich (Steinheim, Germany). Ultrapure water
provided by a Milli-Q purification system (Millipore, Bedford, MA,
USA) was used throughout the study. SPE cartridges Oasis HLB
(200 mg/6 mL) by Waters (Milford, MA, USA) and Lichrolut RP-18
(200 mg/3 mL) by Merck were used for the removal of any endogenous
interference stemming from gilthead seabream matrices.
Gilthead seabream tissue was purchased by local market.
Table 1
Optimization of solid phase extraction protocol.
SPE cartridges Elution solvents Recovery (%)
AMP TAP PG IS FFC PV OXA CAP CLO DICLO
Lichrolut RP-18 CH3OH 40.7 111.2 56.0 99.9 89.4 53.5 73.9 93.1 65.6 54.5
CH3CN 12.9 124.9 18.3 87.0 101.6 19.3 24.8 99.1 30.8 27.6
CH3OH/ CH3CN (50/50 %v/v) 50.6 92.2 65.8 82.5 81.2 65.4 70.3 82.5 65.3 68.2
1mL CH3OH + 1 mL CH3CN 65.8 107.2 80.9 101.3 98.7 73.1 93.0 99.3 76.9 74.9
1mL CH3CN + 1 mL CH3OH 46.9 95.1 ND 107.3 101.1 52.2 22.1 97.2 30.5 28.9
1.5 mL 0.1% TFA in CH3CN + 0.5 mL CH3CN 28.8 35.4 15.7 48.8 51.6 ND 20.5 67.4 26.7 31.5
Oasis CH3OH 28.8 61.6 34.4 80.2 70.9 18.9 44.7 81.0 37.8 40.6
CH3CN 25.0 84.1 96.5 129.6 89.5 ND 22.4 79.6 30.4 21.5
CH3OH/ CH3CN (50/50 %v/v) 84.4 113.9 53.2 144.3 103.5 55.6 98.4 111.5 107.8 88.8
1mL CH3OH + 1 mL CH3CN 81.7 127.4 ND 145.9 100.4 51.9 98.0 109.4 106.8 87.0
1.5 mL 0.1% TFA re CH3CN + 0.5 mL CH3CN 23.8 70.2 10.5 84.4 71.3 ND 34.6 25.1 20.3 18.4
1mL CH3CN + 1 mL CH3OH 95.3 98.0 98.2 99.3 97.5 96.0 98.6 96.4 95.5 94.3
AMP = ampicillin, TAP = thiamphenicol, PG = penicillin G, FFC = Florfenicol, PV = penicillin V, OXA = Oxacillin, CAP = chloramphenicol, CLO = cloxacillin and DICLO = dicloxacillin.
TFA = trifluoacetic acid.
E.N. Evaggelopoulou, V.F. Samanidou / Food Chemistry 136 (2013) 1322–1329 1325

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในการเพาะเลี้ยงสัตว์ยาปฏิชีวนะรวมทั้ง penicillins และ amphenicols
ได้รับส่วนใหญ่ที่ใช้สำหรับวัตถุประสงค์ในการรักษาและป้องกันโรคเป็นตัวแทน
การบริหารที่ครอบคลุมของพวกเขาไปตกปลาเช่น
gilthead seabream, destined สำหรับการบริโภคของมนุษย์ได้กลายเป็น
ปัญหาร้ายแรงเพราะตกค้างของพวกเขาสามารถยังคงมีอยู่ในสัตว์ที่กิน
เนื้อเยื่อ การใช้งานของพวกเขาย่อมนำไปสู่​​การเลือกทน
รูปแบบของแบคทีเรียในระบบนิเวศของการใช้ (samanidou & evaggelopoulou
2007 samanidou, evaggelopoulou, & papadoyannis
2006) (ดูมะเดื่อ 3.)
ตอนนี้จะมีกรอบกฎหมายที่เข้มงวดในการควบคุมการใช้สาร
ดังกล่าวเพื่อลดความเสี่ยงในขั้นต่ำที่จะ. มนุษย์
สุขภาพที่เกี่ยวข้องกับการบริโภคของสารตกค้างของพวกเขา ไป
มั่นใจในความปลอดภัยอาหารของมนุษย์สหภาพยุโรป (EU) ได้มีการกำหนดความอดทน
ระดับสำหรับสารเหล่านี้เป็นข้อ จำกัด ของสารตกค้างสูงสุด
(MRLs) กับกฎระเบียบของสภา EEC 37/2010 ซึ่งอธิบาย
ขั้นตอนการจัดตั้ง MRLs สำหรับยาสัตวแพทย์
ในผลิตภัณฑ์อาหารที่ได้จากสัตว์ ห้องปฏิบัติการของรัฐ
eu ต้องใส่ลงไปในวิธีการปฏิบัติในการคัดกรองและยืนยัน
อาจจะตกค้างอยู่ในตัวอย่างปลา ค่า mrl
ปลาในกล้ามเนื้อและผิวหนังในสัดส่วนธรรมชาติสำหรับยาปฏิชีวนะเป็นชุด
โดยสหภาพยุโรปจะได้รับในตารางที่ 1 (ระเบียบคณะกรรมการ (EU) ไม่มี 37 /
2010). เมื่อเร็ว ๆ นี้
วิธี uhplc-ms/ms สำหรับการกำหนด
ยาปฏิชีวนะจากหลายชั้นเรียนใน gilthead seabream เป็น
เผยแพร่ แต่ amphenicols จะไม่รวมอยู่ในบทความนี้
(ราเปส, cazorla เรเยสromero-Gonzálezร์ติเนวิดัล,
frenich garrido &, 2012) ในวรรณคดีเพียงหนึ่งวิธีการวิเคราะห์
ได้รับการพัฒนาสำหรับการกำหนดของหมวกใน gilthead
seabream (tyrpenou rigos, & athanassopoulou, 2002).
นอกจากนี้ยังมีวิธีการวิเคราะห์ไม่กี่แห่งที่ได้รับการพัฒนา
สำหรับการกำหนด penicillins และ amphenicols ในสายพันธุ์อื่น ๆ
ทะเลเช่นหางสีเหลือง, เรนโบว์เทราท์, ตบเบา ๆ ,กุ้ง, ปลาดุก, ปลาคาร์พหญ้า
และ Scampi แต่ไม่ได้อยู่ใน gilthead seabream วิธีการทั้งหมด
ที่ถูกตีพิมพ์ในวรรณคดีที่เกี่ยวข้องกับหลายส่วนที่เหลือ
วิเคราะห์ยาปฏิชีวนะเหล่านี้ในเนื้อเยื่อปลาอาหารการผลิตที่แตกต่างกัน
กล่าวถึงน้อยกว่าสามสาร (อ่างและคณะ, 2000;. ดิง, ขะเย้อแขย่ง
zhang, เจียง, &ดวงอาทิตย์ 2005; gikas, kormali, tsipi, tsarbopoulos &
2004. hormazabal et al, 1993; nagata & Saeki,

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ ยาปฏิชีวนะ amphenicols และ penicillins
ได้ใช้ส่วนใหญ่ใช้ สำหรับวัตถุประสงค์ในการรักษา และ เป็น prophylactic
ตัวแทน การจัดการครอบคลุมปลา เช่น
กลายเป็น gilthead seabream ชะตาสำหรับมนุษย์บริโภค
ปัญหาร้ายแรงเนื่องจากของตกค้างสามารถตั้งหน้ากินสัตว์
เนื้อเยื่อ การใช้ย่อมนำไปสู่การเลือกทน
ในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ ยาปฏิชีวนะ amphenicols และ penicillins
ได้ใช้ส่วนใหญ่ใช้ สำหรับวัตถุประสงค์ในการรักษา และ เป็น prophylactic
ตัวแทน การจัดการครอบคลุมปลา เช่น
กลายเป็น gilthead seabream ชะตาสำหรับมนุษย์บริโภค
ปัญหาร้ายแรงเนื่องจากของตกค้างสามารถตั้งหน้ากินสัตว์
เนื้อเยื่อ การใช้ย่อมนำไปสู่การเลือกทน
รูปแบบของแบคทีเรียในระบบนิเวศของใช้ (Samanidou & Evaggelopoulou,
2007 & Samanidou, Evaggelopoulou, Papadoyannis,
2006) (ดู Fig. 3) .
ตอนนี้มีกรอบสภาเข้มงวดการควบคุมการใช้
ของสารดังกล่าว การลดในขั้นต่ำความเสี่ยงบุคคล
สุขภาพที่เกี่ยวข้องกับปริมาณการตกค้าง การ
ตรวจสอบความปลอดภัยของอาหารมนุษย์สหภาพยุโรป (EU) ได้ตั้งค่าเผื่อ
ระดับสารประกอบเหล่านี้เป็นสารตกค้างสูงสุด limits
(MRLs) กับสภาข้อบังคับ EEC 37/2010 ซึ่งอธิบายถึง
ขั้นตอนในการก่อตั้งของ MRLs สำหรับยาสัตว
ผลิตภัณฑ์ในอาหารของสัตว์ ห้องปฏิบัติการของรัฐ
EU ได้ใส่ลงไปในวิธีปฏิบัติ การตรวจคัดกรองยืนยัน
อาจตกค้างอยู่ในตัวอย่างปลา ค่า MRL ใน
ปลากล้ามเนื้อและผิวในสัดส่วนตามธรรมชาติสำหรับยาชุด
โดย EU ได้ในตารางที่ 1 (คณะกรรมการควบคุม (EU) 37 ไม่ /
2010) .
เพิ่งวิธี UHPLC–MS/MS ในการกำหนดการ
เป็นยาปฏิชีวนะจากหลายชั้นเรียนใน gilthead seabream
ประกาศ อย่างไรก็ตาม amphenicols จะไม่รวมอยู่ในเอกสารนี้
(Pereira Lopes, Cazorla เร Romero-González, Martínez Vidal,
& Garrido Frenich, 2012) ในวิธีการวิเคราะห์เอกสารประกอบการเดียว
ได้รับการพัฒนาสำหรับการกำหนด CAP ใน gilthead
seabream (Tyrpenou, Rigos & Athanassopoulou, 2002) .
ยังมีกี่วิธีวิเคราะห์ที่ได้รับการพัฒนา
สำหรับกำหนด penicillins และ amphenicols ในที่อื่น ๆ
ทะเลพันธุ์ หางเหลือง เรนโบว์เทราต์ เล็ก น้อย กุ้ง ปลาดุก,
หญ้าปลาทับทิมและกุ้ง แต่ไม่ใช่ ใน gilthead seabream วิธีการทั้งหมด
ที่เผยแพร่ในวรรณคดีที่เกี่ยวข้องกับตกค้างหลาย
วิเคราะห์ยาปฏิชีวนะเหล่านี้ในเนื้อเยื่อของปลาที่ผลิตอาหารต่าง ๆ
ดังกล่าวน้อยกว่า 3 analytes (อ่างทองและ al., 2000 ดิง Shen,
จาง เจียง &ซัน 2005 Gikas, Kormali, Tsipi & Tsarbopoulos,
2004 Hormazabal et al., 1993 Nagata & Saeki 1992 Rønning,
Einarsen & Asp, 2006 Tyrpenou และ al., 2002 Wrzesinski &เคร้าช์,
2003 Wrzesinski และ al., 2006) .
ส่วนใหญ่วิธีการข้างต้นใช้ระยะมั่นคงแยกสำหรับการ
แยก analytes จากเนื้อเยื่อของปลา (Gikas et al., 2004;
Mottier, Parisod, Gremaud ผู้ชาย & Stadler, 2003 Nagata & Saeki,
1992 Tyrpenou และ al., 2002 เคร้าช์& Wrzesinski, 2003 Wrzesinski
et al., 2006) วิธีการอื่น ๆ ที่ใช้ liquid–liquid สกัดด้วย
หรือสารทำละลาย เช่นเอทิล acetate, dichloromethane รวมกัน
(อ่างทองและ al., 2000 เอ็นเฮกเซนและคลอโรฟอร์ม ดิง et al.,
2005 Hormazabal, Steffenak & Yndestad, 1993 Rønning et al.,
2006 &ทาคิโนะ Daishima นาคาฮาระ 2003) .
ในที่สุด ส่วนใหญ่ใช้วิธีเกี่ยว HPLC สำหรับวิเคราะห์,
เดียวใช้ chromatography ก๊าซ (ดิง et al., 2005 Gikas
et al., 2004 Hormazabal et al., 1993 Mottier และ al., 2003 Nagata
& Saeki, 1992 ทาคิโนะ et al., 2003 Tyrpenou และ al., 2002;
Wrzesinski &เคร้าช์ 2003) ตรวจสอบสามารถทำได้กับ UV หรือมวล
spectrometry (อ่างทองและ al., 2000 ดิง et al., 2005 Gikas et al., 2004;
Hormazabal et al., 1993 Mottier et al. 2003 Nagata และ Saeki,
1992 Al. Pereira Lopes ร้อยเอ็ด 2012 Rønning และ al., 2006 ทาคิโนะ
et al., 2003 Tyrpenou และ al., 2002 Wrzesinski และเคร้าช์ 2003;
Wrzesinski et al., 2006 Mottier et al. 2003) .
จุดมุ่งหมายของการศึกษาปัจจุบันมีการ พัฒนา และประเมินการเสร็จ
วิธี HPLC การกำหนดของยาปฏิชีวนะยาเพนนิซิลลิน 6
(แอมพิซิลลิน (AMP), ยาเพนนิซิลลิน G หรือ benzylpenicillin (PG),
ยาเพนนิซิลลินวี (PV), oxacillin (OXA), cloxacillin (CLO) และ dicloxacillin
(DICLO) และ amphenicols 3 ยาปฏิชีวนะ (chloramphenicol
(CAP), florfenicol (FFC) และ thiamphenicol (เคาะ) ใน gilthead
seabream เนื้อเยื่อ การสกัดยาปฏิชีวนะกล่าวถึงถูก
ดำเนินการตามขั้นตอนสกัด liquid–liquid ตาม ด้วยของแข็ง
ระยะสกัดล้างขั้นตอน วิธีการพัฒนาได้อย่างเต็ม
ตรวจสอบในใว แบบดอกไม้ ถูกต้อง แม่นยำ,
ความเสถียรและความไวตามที่คณะกรรมาธิการยุโรป
2002/657/EC.
2 ตัดสินใจ ทดลอง
2.1 วัสดุและ reagents
AMP, PG (เกลือโพแทสเซียม), PV (เกลือโพแทสเซียม), OXA, CLO, DICLO,
เคาะและ FFC ซื้อจากซิก (เซนต์หลุยส์ MO สหรัฐอเมริกา) CAP
ถูกซื้อจากอัลฟ่า Aesar GmbH CoKG (คาร์ลส์รูเออ เยอรมนี) .
ได้รับจาก Aldrich (Steinheim เยอรมนี) น้ำ ultrapure
โดยระบบฟอก Q (มาก กลาสโกว์ MA,
สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้ตลอดการศึกษา ตลับ SPE HLB โอเอซิส
(6 mL 200 มิลลิกรัม) โดยน้ำ (ลฟอร์ด MA สหรัฐอเมริกา) และ Lichrolut RP-18
(3 mL 200 มิลลิกรัม) โดยเมอร์คใช้สำหรับการกำจัดของ endogenous ใด ๆ
รบกวนอันเนื่องมาจากเมทริกซ์ seabream gilthead.
เนื้อเยื่อ seabream Gilthead ถูกซื้อ โดยเฉพาะตลาดการ
ตาราง 1
เพิ่มประสิทธิภาพของเฟสของแข็งแยกโพรโทคอล
SPE ตลับหรือสารทำละลาย Elution Recovery (%)
AMP เคาะ PG เป็น FFC PV OXA CAP CLO DICLO
CH3OH Lichrolut RP 18 40.7 111.2 56.0 99.9 89.4 53.5 73.9 93.1 65.6 54.5
CH3CN 12.9 124.9 18.3 87.0 101.6 19.3 24.8 99.1 30.8 27.6
CH3OH / CH3CN (แบบ %v/v) 50.6 92.2 65.8 82.5 81.2 65.4 70.3 82.5 65Acetate แอมโมเนียถูกซื้อจาก Haen Riedel-เด (Buchs
SG สวิตเซอร์แลนด์) และอะซีโตนจากเมอร์ค (Damstadt เยอรมนี) .
Lamotrigine (LTG) ถูกซื้อจาก Wellcome มูลนิธิ
(London, UK) และใช้เป็นมาตรฐานภายใน (IS) Methanol
(MeOH) เกรด HPLC และ acetonitrile (ACN) ได้จัดทำ โดย Fisher วิทยาศาสตร์
(Loughborough, Leicestershine, UK) Trifluoroacetic กรด 99%
9 53.2 144.3 103.5 55.6 98.4 111.5 107.8 88.8
1 mL CH3OH 1 mL CH3CN 81.7 127.4 ND 145.9 100.4 51.9 98.0 109.4 106.8 87.0
1.5 mL 0.1% TFA กลับ CH3CN 0.5 mL CH3CN อมิโลส 23.8 70.2 10.5 84.4 71.3 ND 34.6 18.4 25.1 20.3
1 mL CH3CN 1 mL CH3OH 95.3 98.0 98.2 99.3 97.5 96.0 98.6 96.4 95.5 94.3
AMP =แอมพิซิลลิน เคาะ = thiamphenicol, PG =ยาเพนนิซิลลิน G, FFC = Florfenicol, PV =ยาเพนนิซิลลิน V, OXA = Oxacillin3 68.2
1 mL CH3OH 1 mL CH3CN 65.8 107.2 80.9 101.3 98.7 73.1 93.0 99.3 76.9 74.9
CH3OH 1 mL CH3CN 1 mL 46.9 95.1 ND 107.3 101.1 52.2 22.1 97.2 30.5 28.9
1.5 TFA 0.1 mL ใน CH3CN CH3CN 0.5 mL 28.8 35.4 15.7 48.8 51.6 ND 20.5 ยาว 31.5 67.4 26.7
โอเอซิส CH3OH 28.8 61.6 34.4 80.2 เวย์ 70.9 18.9 44.7 81.0 37.8 เป็นมูลค่า 40.6
CH3CN 25.0 84.1 96.5 129.6 89.5 ND 22.4 79.6 30.4 21.5
CH3OH / CH3CN (แบบ %v/v) 84.4 113 CAP = chloramphenicol, CLO = cloxacillin และ DICLO = dicloxacillin.
TFA =กรด trifluoacetic.
E. N Evaggelopoulou, V.F. Samanidou / 1322–1329 อาหารเคมี 136 (2013) 1325

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในสัตว์น้ำและยาปฏิชีวนะรวมถึง amphenicols penicillins
มีการใช้งานเป็นหลักสำหรับวัตถุประสงค์เพื่อการบำบัดโรคและ(ยา)ป้องกันโรค
agent การบริหารงานที่หลากหลายของปลาเช่น seabream
gilthead ไปรษณีย ภัณฑ์ เพื่อการ บริโภค ของมนุษย์ได้กลายเป็นปัญหารุนแรง
เนื่องจากสารตกค้างของพวกเขาสามารถยืนกรานใน บริโภค สัตว์
เนื้อเยื่อ ใช้งานได้อย่างหลีกเลี่ยงไม่ได้นำไปสู่การเลือกกัน
ตามมาตรฐานในสัตว์น้ำและยาปฏิชีวนะรวมถึง amphenicols penicillins
มีการใช้งานเป็นหลักสำหรับวัตถุประสงค์เพื่อการบำบัดโรคและ(ยา)ป้องกันโรค
agent การบริหารงานที่หลากหลายของปลาเช่น seabream
gilthead ไปรษณีย ภัณฑ์ เพื่อการ บริโภค ของมนุษย์ได้กลายเป็นปัญหารุนแรง
เนื่องจากสารตกค้างของพวกเขาสามารถยืนกรานใน บริโภค สัตว์
เนื้อเยื่อ ใช้งานได้อย่างหลีกเลี่ยงไม่ได้นำไปสู่การเลือกกัน
ตามมาตรฐานรูปแบบของแบคทีเรียในระบบนิเวศของใช้. evaggelopoulou ( samanidou &
2007 samanidou evaggelopoulou & papadoyannis
2006 )(ดูรูป. 3 )..
ในตอนนี้มีกรอบกฎหมายอย่างเคร่งครัดด้วยการควบคุมการใช้
ของสารดังกล่าวในการสั่งซื้อเพื่อลดความเสี่ยงในขั้นต่ำที่มนุษย์
เพื่อ สุขภาพ ที่เกี่ยวข้องกับการ บริโภค ของสารตกค้างของพวกเขา. เพื่อตอบแทน
ตรวจสอบให้แน่ใจว่าด้านความ ปลอดภัย ของอาหารของมนุษย์ สหภาพ ยุโรป( EU )ได้ตั้งค่าปรับต่อ Fault Tolerance
ระดับสำหรับสารประกอบเหล่านี้เป็นการจำกัดสิ่งแปลกปลอมสูงสุด
( mrls )พร้อมด้วยคณะมนตรีระเบียบ EEC 37/2010 ซึ่งจะอธิบายถึงขั้นตอน
ซึ่งจะช่วยให้การจัดตั้ง mrls ของสัตวแพทย์เป็นยา
สินค้าในอาหารที่มาจากสัตว์ ห้องแล็บของรัฐของ สหภาพ ยุโรป(อียู)
ซึ่งจะช่วยให้มีการนำไปปฏิบัติได้วิธีการในการกลั่นกรองและยืนยันการตอบแทน
เป็นไปได้ว่าอาจเป็นสารตกค้างอยู่ในตัวอย่างปลา. ค่า mrl ใน
ปลากล้ามเนื้อและผิวหนังในธรรมชาติมีสัดส่วนสำหรับยาปฏิชีวนะตามที่กำหนดไว้
โดย สหภาพ ยุโรปจะได้รับในตารางที่ 1 (คณะกรรมการจัดระเบียบ( EU )ไม่มี 37 /
2010 )..
เมื่อไม่นานมานี้ที่ uhplc - MS / MS วิธีสำหรับความมุ่งมั่นของ
ยาปฏิชีวนะจากหลายชั้นเรียนใน gilthead seabream เป็น
ซึ่งจะช่วยเผยแพร่;อย่างไรก็ตาม amphenicols ไม่ได้รวมอยู่ในกระดาษ
(เปเรย์รา lopes , cazorla Reyes ,ález romero-gonz martínez vidal frenich
& garrido 2012 ) ในเอกสารเพียงหนึ่งในการวิเคราะห์วิธีการ
ซึ่งจะช่วยได้รับการพัฒนาขึ้นสำหรับความมุ่งมั่นของฝาปิดใน gilthead
seabream ( tyrpenou , rigos ,& athanassopoulou , 2002 )..
ยังมีไม่กี่ในการวิเคราะห์วิธีการที่ได้รับการพัฒนาขึ้น
ซึ่งจะช่วยให้การกำหนดและ penicillins amphenicols
ซึ่งจะช่วยในทะเลชนิดอื่นๆเช่นสีเหลืองหางปลาเทราท์สายรุ้ง, DAB ,,กุ้งปลาดุก
หญ้าปลาและ Shrimp Scampi แต่ไม่ใช่ใน seabream gilthead . ทั้งหมดที่เป็นวิธีการ
ซึ่งจะช่วยเผยแพร่ในเอกสารเกี่ยวกับ Multi - คราบ
ซึ่งจะช่วยการวิเคราะห์ของเหล่านี้ยาปฏิชีวนะในอาหารแตกต่าง - การผลิตปลาเนื้อเยื่อ
กล่าวถึงน้อยกว่าสาม analytes (อ่าง et al ., 2000 , Men - Ding , Shen ,
จาง,จีน,&แสงแดด, 2005 ; gikas , kormali , tsipi ,& tsarbopoulos ,
2004 ; hormazabal et al ., 1993 ; nagata & saeki ,1992 ; rønning ,
einarsen ,& ASP , 2006 ; tyrpenou et al ., 2002 ; wrzesinski &หมอบ,
2003 ; wrzesinski et al ., 2006 )..
มากที่สุดของวิธีการทางด้านบนใช้เป็นขั้นตอนสำหรับการขุดเจาะที่
ซึ่งจะช่วยขจัดเสียงรบกวนของ analytes จากเนื้อเยื่อ( gikas et al ., 2004 ;
mottier , parisod , gremaud , Guy ,& stadler , 2003 ; nagata & saeki ,
1992 ; tyrpenou et al ., 2002 ; wrzesinski &หมอบ, 2003 ; wrzesinski
et al ., 2006 )และเพียงหนึ่งใช้ก๊าซ chromatography ( Men - Ding et al ., 2005 ; gikas
et al ., 2004 ; hormazabal et al ., 1993 ; mottier et al ., 2003 ; nagata
& saeki , 1992 ; takino et al ., 2003 ; tyrpenou et al ., 2002 ;
wrzesinski &หมอบ, 2003 ) การตรวจจับทำได้ด้วย UV หรือวัตถุ
spectrometry (อ่าง et al . 2000 Men - Ding et al . 2005 gikas et al . 2004
hormazabal et al . 1993 mottier et al . 2003 nagata และ saeki
1992ส่วนที่เหลือใช้วิธีการผสมน้ำยาทำความสะอาดที่ผสมน้ำยาทำความสะอาดด้วยการขุดเจาะ
แตกต่างกันการรวมตัวกันของตัวทำละลายเช่นเอทิลเช่นอะคีเทต, dichloromethane ,
ยุคต้นๆและ N - solvent production unit (อ่าง et al ., 2000 , Men - Ding et al .,
2005 ; hormazabal , steffenak ,& yndestad , 1993 ; rønning et al .,
2006 ; takino , daishima ,& nakahara , 2003 ). N สุดท้ายโดยส่วนใหญ่ของวิธีการมีส่วนเกี่ยวข้อง hplc สำหรับการวิเคราะห์,
oxacillin ( oxa ), cloxacillin (แรงงานกัมพูชา)และ dicloxacillin
( diclo )และสาม amphenicols ยาปฏิชีวนะ( chloramphenicol
(ฝาครอบ), florfenicol ( ffc )และ thiamphenicol ( TAP )ใน gilthead
seabream เนื้อเยื่อ. การดึงถอนของยาปฏิชีวนะตรวจสอบที่เป็น
ซึ่งจะช่วยดำเนินการโดยการขุดเจาะที่ผสมน้ำยาทำความสะอาด - น้ำยาล้างจานเล็กน้อยตามด้วยขั้นตอนการทำความสะอาด - ขึ้น
ช่วงที่แข็งแกร่ง วิธีการพัฒนาที่เป็น
ตามมาตรฐานอย่างครบครันเปเรย์รา lopes et al ., 2012 ; rønning et al ., 2006 ; takino
et al ., 2003 ; tyrpenou et al ., 2002 ; wrzesinski และหมอบ, 2003 ;
wrzesinski et al ., 2006 ; mottier et al . 2003 )..
เป้าหมายของการศึกษาในปัจจุบันคือการพัฒนาและการประเมินรับรอง
hplc วิธีสำหรับการกำหนดหกอย่างไรสืบเนื่องยาปฏิชีวนะ
( ampicillin (และ) g อย่างไรสืบเนื่องหรือ benzylpenicillin ( PG )
อย่างไรสืบเนื่อง V (ระบบไฮบริด)ได้รับการตรวจสอบในเรื่องของความต่อเนื่องเป็นแนวนอน,ตัวเลือกความถูกต้องแม่นยำ
เสถียรภาพ และความไวตามกรรมาธิการยุโรป
ซึ่งจะช่วยการตัดสินใจ 2002/657 / ec .
2 . ทดลอง
2.1 . reagents และ
และ PG (เกลือ,โปแตสเซียม)ระบบไฮบริด(เกลือ,โปแตสเซียม) oxa แรงงานกัมพูชา diclo
แตะและ ffc ได้ซื้อจาก Six Sigma ( St . Louis , MO USA ) ฝาครอบ
ก็ซื้อจาก Alfa Production aesar GmbH cokg ( Karlsruhe .เยอรมนี)..
เช่นอะคีเทต its ammonium ก็ซื้อจาก riedel - de haen ( SG สวิตเซอร์แลนด์ buchs
)และอะซีโตนจาก merck ( damstadt เยอรมนี)..
lamotrigine (พลโท)มีการซื้อจาก wellcome มูลนิธิ
(สหราชอาณาจักร)และใช้เป็นมาตรฐาน ภายใน (มี) hplc โรงงานเมธานอลเกรด
( meoh )และ acetonitrile ( ACN )ได้มาจากชาวประมงทางวิทยาศาสตร์
( loughborough leicestershine สหราชอาณาจักร) trifluoroacetic ชนิดตะกั่วกรดแบบซีล 99%
gilthead seabream เนื้อเยื่อมีการซื้อจากตลาดในพื้นที่.

ตารางที่ 1 การปรับแต่งการใช้งาน Solid ขั้นตอนการขุดโปรโตคอล.
SPE Bar and Restaurant เจลหรือโลชั่นโกนหนวด elution ตัวทำละลายการกู้คืนข้อมูล(%)
และแตะ PG เป็นระบบไฮบริด ffc oxa ฝาครอบแรงงานกัมพูชา diclo
lichrolut RP - 18 CH 3 โอ 40.7 111.2 56.0 ตัน 99.9 89.4 53.5 ( 73.9 93.1 65.6 54.5
CH 3 CN 12.9 124.9 18.3 87.0 101.6 ร้อยละ 19.3 ตามลำดับทั้งนี้ 24.8 99.1 30.8 27.6
CH 3 โอ/ CH 3 CN ( 50/50% v / v ) 50.6 92.2 65.8 82.5 81.2 65.4 70.3 82.5 65 .3 68.2
1 มล. ch 3 โอ 1 มล. ch 3 CN 65.8 80.9 107.2 101.3 98.7 73.1 93.0 99.3 76.9 74.9
1 มล. ch 3 CN 1 มล. ch 3 โอ 46.9 เงินทุนมี NPL คงค้าง 95.1 ) 107.3 101.1 52.2 22.1 97.2 30.5 28.9
1.5 มล. 0.1% tfa ใน CH 3 CN 0.5 มล. ch 3 CN 28.8 35.4% 15.7 48.8 51.6 . 20.5 67.4 26.7 31.5
โอเอซิส CH 3 โอ 28.8 61.6 34.4 80.2 ระดับ 70.9 18.9 ขึ้น 44.7% 81.0 37.8 40.6
CH 3 CN เท่ากับร้อยละ 25.0 ใกล้เคียงกับเพิ่มขึ้น 84.1 96.5 129.6 89.5 มอเตอร์ด้าน ND 79.6 22.4 30.4 ปอนด์ 21.5
CH 3 โอ/ CH 3 CN ( 50/50% v / v ) 84.4 113 .9 53.2 144.3 103.5 55.6 98.4 พื้นที่ขนาด 111.5 107.8 88.8
1 มล. ch 3 โอ 1 มล. ch 3 CN 81.7 สินค้า ประเภท semiconductors มอเตอร์ด้าน ND 127.4 145.9 100.4 51.9 98.0 109.4 106.8 87.0
1.5 มล. 0.1% อีกครั้ง tfa CH 3 CN 0.5 มล. ch 3 CN — 23.8 70.2 10.5 84.4 71.3 . 34.6 ร้อยละ 25.1 ร้อยละ 20.3 18.4
1 มล. ch 3 CN 1 มล. ch 3 โอ 95.3 98.0 98.2 99.3 97.5 96.0 98.6 96.4 95.5 และ 94.3
= ampicillin ,แตะ= thiamphenicol , PG =อย่างไรสืบเนื่อง G , ffc = florfenicol , PV =กลุ่มเพ็นนิซิลิน V , oxa = oxacillin ,ฝาครอบ= chloramphenicol และแรงงานกัมพูชา= cloxacillin diclo = dicloxacillin .
tfa = trifluoacetic กรด. N .
E . evaggelopoulou V F . samanidou อาหารเคมี 136 ( 2013 ) 1322-1329 1325