2.9. Free amino acids (FAA) analysi

2.9. Free amino acids (FAA) analysis
Free amino acids analysis was performed according to Han,
Rombouts, and Nout (2004). The lyophilized sample homogenates
were dissolved in sulphosalicylic acid, and supernatants were
applied to the analyzer using sodium citrate buffer system (pH 2.2,
3.3, 4.3, and 5.4) with post-column ninhydrin detection for FAA. A
known mixture of different FAA was applied to the analyzer as an
external standard for the calculation.
2.10. Microbiological analysis
Microbiological analysis was conducted according to Han, Cao,
Rombouts, and Nout (2004). Briefly, 50g of each sample were
aseptically weighed into a sterile blender jar (Oster) containing
450 mL sterile NaCl (10 g/L, pH 7.2). Samples were blended at high
speed for 2 min and subsequent decimal dilutions were prepared in
NaCl (Hollingworth et al., 1991) for microbiological analysis. For
aerobic plate count (APC) enumeration, samples were enumerated
in pour-plates of Plate Count Agar (PCA, Oxoid, England) after incubation
at 22 C for 72 h. For bacterial endospores (spores)
enumeration, samples were pasteurized (80 C, 10 min) and spores
were enumerated in pour-plates of PCA after incubated at 30 C for
72 h. Lactic acid bacteria (LAB) were enumerated in pour-plates of
MRS Agar Base (Merck Oxoid, England) after 3e4 days incubation at
30 C. Selective enumeration of viable Enterobacteriaceae was
carried out in pour-plates of Violet Red Bile Glucose agar (VRBG,
Oxoid, England) after 36 h incubation at 30 C.
2.11. Statistical analysis
All experiments were based on a completely randomized block
designs, and were performed in triplicate. Results were presented
as mean ± standard deviation (SD) of replicated measurements.
One-ways analysis of variance (ANOVA) was performed using SPSS
17 computer programs (SPSS Inc., Chicago, IL, USA), and differences
in mean values were determined with the least significant difference
(LSD, P < 0.05) procedure of the statistical analysis system.
3. Results and discussion
3.1. Enzyme production by A. elegans XH-22
Fungal genera involved in the traditional sufu production belong
to the Mucoraceae, including Mucor spp., Actinomucor spp., and
Rhizopus spp., which have enzyme systems with high proteolytic
activities, allowing it to grow on substrate rich in protein but poor
in carbohydrate (Han, Rombouts, & Nout, 2001). In the present
study, the fungal fermentation starter A. elegans XH-22 was usually
used for sufu production and has a very good safety record. Fungal
solid-state fermentation requires three stages, the first being the
growth of mold mycelia and partial protein hydrolysis by enzymes
excreted by mycelia, the second being salting of surimi and the
third being further protein hydrolysis by enzymes. It's important to
allow the mucor growas many mycelia as possible in the first stage
(Zhao & Zheng, 2009). A. elegans XH-22 grewvery quickly on surimi
surface during fermentation. After two days fermentation, mycelia
was found on surimi surface and a white-mycelia cover was
formed.
Proteases and a-amylase production by A. elegans XH-22 were
shown in Fig. 1. The neutral protease activity in surimi increased
rapidly (P < 0.05) during the fermentation process, and its activity
reached 66.3U/g at 48 h. Activity of a-amylase was also enhanced
with the increase of fermentation time, but significant increase
(P < 0.05) was only found between 0 h and 24 h, and no significant
difference was found among 24 h, 36 h and 48 h. This is not in
agreement with sufu fermentation process, during which both
protease and a-amylase production by the fungal fermentation
starters increased with the fermentation time (Han et al., 2003).
This difference may partly result from the high content of protein,
but low content of carbohydrate in surimi. The high protease production
can guarantee the followed enzymatic hydrolysis of the
surimi protein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.9. ฟรีวิเคราะห์กรดอะมิโน (FAA)ทำการวิเคราะห์กรดอะมิโนอิสระตามหานRombouts และ Nout (2004) Homogenates ตัวอย่าง lyophilizedถูกละลายในกรด sulphosalicylic และ supernatantsการวิเคราะห์โดยใช้ระบบโซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 2.23.3, 4.3 และ 5.4) กับ ninhydrin หลังคอลัมน์ FAA ตรวจจับ Aเรียกว่า ส่วนผสมของ FAA แตกต่างกับตัววิเคราะห์เป็นการมาตรฐานภายนอกสำหรับการคำนวณ2.10. จุลชีววิทยาดำเนินการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาตามหาน CaoRombouts และ Nout (2004) สั้น ๆ 50 กรัมของแต่ละอย่างได้aseptically ชั่งลงในขวด (Oster) ปั่นผ่านการฆ่าเชื้อที่ประกอบด้วย450 มล.ผ่านการฆ่าเชื้อ NaCl (10 g/L ค่า pH 7.2) ตัวอย่างถูกผสมสูงความเร็วสำหรับ 2 นาทีและเจือจางทศนิยมมาวจัดทำขึ้นในNaCl (Hollingworth et al. 1991) สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา สำหรับแจงนับจำนวน (APC) แผ่นแอโรบิก ตัวอย่างที่ระบุในเทแผ่นของจำนวนแผ่นวุ้น (PCA, Oxoid อังกฤษ) หลังจากบ่ม22 c เป็นเวลา 72 ชม สำหรับแบคทีเรีย endospores (สปอร์)การแจงนับ ตัวอย่างถูกพาสเจอร์ไรส์ (80 C, 10 นาที) และสปอร์ได้ระบุในจานเทของ PCA หลังจากรับการกกที่ 30 C สำหรับ72 h. แบคทีเรียกรดแลคติก (LAB) ได้ระบุในจานเทของนางวุ้นฐาน (Merck Oxoid อังกฤษ) หลังจาก 3e4 กกไข่วันที่ถูกแจงนับเลือก 30 c ของ Enterobacteriaceae วางอนาคตดำเนินการในแผ่นเทของวุ้นสีม่วงแดงน้ำดีกลูโคส (VRBGOxoid อังกฤษ) หลังจากบ่ม 36 h ที่ 30 c2.11. สถิติวิเคราะห์การทดลองทั้งหมดจากบล็อกแบบสุ่มอย่างสมบูรณ์ออกแบบ และดำเนินการลข้อ นำเสนอผลเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD) ของการวัดที่จำลองแบบแล้วดำเนินการหนึ่งวิธีการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) โดยใช้ SPSSโปรแกรมคอมพิวเตอร์ 17 (SPSS Inc. ชิคาโก IL สหรัฐอเมริกา), และความแตกต่างหมายถึงอะไร ค่ากำหนดความแตกต่างสำคัญน้อย(LSD, P < 0.05) ของระบบวิเคราะห์ทางสถิติ3. ผล และการอภิปราย3.1. เอนไซม์ผลิต โดย A. elegans XH-22เป็นเชื้อราจำพวกที่เกี่ยวข้องในการผลิตแบบดั้งเดิม sufuถึง Mucoraceae รวม Mucor ออกซิเจน ออกซิเจน Actinomucor และบทออกซิเจน ซึ่งมีระบบเอนไซม์สูงย่อยโปรตีนกิจกรรม ปล่อยให้มันเติบโตบนพื้นผิวที่อุดมไปด้วยโปรตีนแต่ยากจนในคาร์โบไฮเดรต (ฮัน Rombouts, & Nout, 2001) ในปัจจุบันศึกษา สตาร์ทเตอร์หมักเชื้อรา A. elegans XH-22 ถูกมักจะใช้สำหรับการผลิต sufu และมีข้อมูลความปลอดภัยดีมาก เชื้อราโซลิดสเตทการหมักต้องใช้สามขั้นตอน เป็นครั้งแรกเติบโตของเชื้อรา mycelia และบางส่วนโปรตีนย่อยสลาย โดยเอนไซม์ขับออกมาจาก mycelia สองถูกขยำซูริและสาม เป็นการย่อยสลายโปรตีน โดยเอนไซม์ เป็นสิ่งสำคัญอนุญาตให้ mucor growas mycelia มากที่สุดในระยะแรก(Zhao และเจิ้ง 2009) A. elegans grewvery XH-22 ในซูริมิอย่างรวดเร็วพื้นผิวระหว่างการหมัก หลังจากสองวันหมัก myceliaพบบนพื้นผิวของซูริมิ และขาว mycelia ปกรูปแบบที่โปรตีเอสและอะไมเลสที่ผลิต โดย A. elegans XH-22แสดงในรูปที่ 1 กิจกรรมโปรติเอสเป็นกลางในซูริมิที่เพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว (P < 0.05) ในระหว่างกระบวนการหมัก และกิจกรรมของถึง 66.3U / g ที่ h. 48 กิจกรรมของอะไมเลสที่ถูกเพิ่มขึ้นเพิ่มเวลาหมัก แต่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ(P < 0.05) พบระหว่าง 0 h 24 h และมีความสำคัญไม่เท่านั้นพบความแตกต่างระหว่าง 24 h, 36 h และ 48 ชั่วโมง นี้ไม่ได้อยู่ในข้อตกลง ด้วยกระบวนการหมัก sufu ในระหว่างที่ทั้งสองโปรติเอสและอะไมเลสที่ผลิต โดยการหมักเชื้อราสตาร์ทเตอร์เพิ่มเวลาหมัก (Han et al. 2003)ความแตกต่างนี้บางส่วนอาจเกิดจากเนื้อหาที่สูงของโปรตีนแต่ต่ำเนื้อหาของคาร์โบไฮเดรตในซูริมิ การผลิตโปรติเอสสูงรับประกันได้ว่า การย่อยสลายด้วยเอนไซม์ในระบบของการโปรตีนซูริมิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.9 ฟรีกรดอะมิโน (FAA) การวิเคราะห์
ฟรีวิเคราะห์กรดอะมิโนที่ได้ดำเนินการตามฮั่น
Rombouts และ Nout (2004) homogenates ตัวอย่างแห้ง
ถูกละลายในกรด sulphosalicylic และ supernatants ถูก
นำไปใช้ในการวิเคราะห์โดยใช้ระบบโซเดียมซิเตรทบัฟเฟอร์ (pH 2.2,
3.3, 4.3 และ 5.4) ที่มีการโพสต์คอลัมน์ ninhydrin การตรวจสอบสำหรับจอห์นฟา
ส่วนผสมที่รู้จักกันของจอห์นฟาที่แตกต่างกันถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์เป็น
มาตรฐานภายนอกสำหรับการคำนวณ.
2.10 การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา
การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาได้ดำเนินการตามฮั่นเฉา
Rombouts และ Nout (2004) สั้น ๆ , 50g ของแต่ละตัวอย่างถูก
ชั่งน้ำหนักปลอดเชื้อลงในขวดผ่านการฆ่าเชื้อเครื่องปั่น (Oster) ที่มี
450 มลหมันโซเดียมคลอไรด์ (10 กรัม / ลิตรค่า pH 7.2) ตัวอย่างที่ถูกผสมที่สูง
ความเร็วเป็นเวลา 2 นาทีและเจือจางทศนิยมต่อมาได้จัดทำขึ้น
โซเดียมคลอไรด์ (Hollingworth et al., 1991) สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา สำหรับ
แอโรบิกแผ่นนับ (APC) นับตัวอย่างที่ถูกระบุ
ในเทแผ่นจานนับวุ้น (PCA, Oxoid อังกฤษ) หลังจากการบ่ม
ที่ 22 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง สำหรับแบคทีเรียสปอร์ (สปอร์)
นับตัวอย่างพาสเจอร์ไรส์ (80? C, 10 นาที) และสปอร์
ที่ถูกระบุในเทแผ่นของ PCA หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
72 ชั่วโมง แบคทีเรียกรดแลคติก (LAB) ที่ถูกระบุในเทแผ่น
MRS agar ฐาน (เมอร์ค Oxoid อังกฤษ) หลังจากวัน 3e4 บ่มที่
30 องศาเซลเซียส การแจงนับเลือกของที่ทำงานได้ Enterobacteriaceae ได้รับการ
ดำเนินการในเทจานสีม่วงสีแดงน้ำดีกลูโคสวุ้น (VRBG,
Oxoid อังกฤษ) หลังจากบ่ม 36 ชั่วโมงวันที่ 30 องศาเซลเซียส.
2.11 การวิเคราะห์สถิติ
การทดสอบทั้งหมดอยู่บนพื้นฐานของบล็อกสุ่มสมบูรณ์
แบบและได้รับการดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ผลลัพธ์ที่ได้นำเสนอ
เป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD) ของการวัดการจำลองแบบ.
หนึ่งวิธีการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) คือการดำเนินการโดยใช้โปรแกรม SPSS
17 โปรแกรมคอมพิวเตอร์ (โปรแกรม SPSS อิงค์, Chicago, IL, USA) และความแตกต่าง
ในค่าเฉลี่ยได้รับการพิจารณา มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญน้อย
(LSD, p <0.05) ขั้นตอนของระบบการวิเคราะห์ทางสถิติ.
3 ผลการค้นหาและการอภิปราย
3.1 การผลิตเอนไซม์โดย A. elegans XH-22
จำพวกเชื้อราเกี่ยวข้องในการผลิตแบบดั้งเดิม sufu อยู่
กับ Mucoraceae รวมทั้ง Mucor spp. Actinomucor spp. และ
Rhizopus spp. ซึ่งมีระบบการทำงานของเอนไซม์ที่มีโปรตีนสูง
กิจกรรมปล่อยให้มันเติบโตใน พื้นผิวอุดมไปด้วยโปรตีน แต่ยากจน
ในคาร์โบไฮเดรต (ฮั่น Rombouts และ Nout, 2001) ในปัจจุบัน
การศึกษาที่เริ่มต้นการหมักเชื้อรา A. elegans XH-22 ก็มักจะ
ใช้สำหรับการผลิต sufu และมีประวัติด้านความปลอดภัยที่ดีมาก เชื้อรา
หมักแบบ solid-state ต้องสามขั้นตอนแรกเป็น
การเจริญเติบโตของเส้นใยเชื้อราและการย่อยสลายโปรตีนบางส่วนโดยเอนไซม์
ขับออกจากเส้นใยที่เป็นเกลือที่สองของซูริมิและ
สามถูกย่อยสลายโปรตีนต่อไปโดยเอนไซม์ มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะ
ช่วยให้ Mucor growas เส้นใยมากที่สุดเท่าที่เป็นไปได้ในขั้นตอนแรก
(Zhao และเจิ้งเหอ 2009) A. elegans XH-22 grewvery ได้อย่างรวดเร็วในซูริมิ
พื้นผิวระหว่างการหมัก สองวันหลังจากการหมักเส้นใย
ที่พบบนพื้นผิวที่ซูริมิและปกสีขาวเส้นใยถูก
สร้างขึ้น.
โปรตีเอสและอะไมเลสผลิตโดย A. elegans XH-22 ถูก
แสดงในรูป 1. กิจกรรมโปรติเอสที่เป็นกลางในซูริมิที่เพิ่มขึ้น
อย่างรวดเร็ว (P <0.05) ในระหว่างกระบวนการหมักและกิจกรรม
ถึง 66.3U / g ใน 48 ชั่วโมง กิจกรรมของอะไมเลสยังได้รับเพิ่มขึ้น
กับการเพิ่มเวลาในการหมัก แต่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ
(P <0.05) พบเฉพาะระหว่าง 0 ชั่วโมงและ 24 ชั่วโมงและไม่มีนัยสำคัญ
พบความแตกต่างในหมู่ 24 ชั่วโมง, 36 ชั่วโมงและ 48 ชั่วโมง นี้ไม่ได้อยู่ใน
ข้อตกลงกับกระบวนการหมัก sufu ในระหว่างที่ทั้งสอง
โปรติเอสและอะไมเลสผลิตจากการหมักเชื้อรา
เริ่มเพิ่มขึ้นตามระยะเวลาการหมัก (Han et al., 2003).
ความแตกต่างนี้ส่วนหนึ่งอาจเป็นผลมาจากเนื้อหาของโปรตีนสูง,
แต่เนื้อหาที่ต่ำของคาร์โบไฮเดรตในซูริมิ การผลิตเอนไซม์โปรติเอสูง
สามารถรับประกันการย่อยของเอนไซม์ตามของ
โปรตีนซูริมิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9 . กรดอะมิโนอิสระ ( FAA ) การวิเคราะห์การวิเคราะห์กรดอะมิโนอิสระดำเนินการตามฮันrombouts และข้างนอก ( 2004 ) โปรตีนที่ homogenates ตัวอย่างsulphosalicylic ละลายในกรดและ supernatants คือใช้กับเครื่องวิเคราะห์ โดยใช้ระบบบัฟเฟอร์ pH 2.2 โซเดียมซิเตรท3.3 4.3 และ 5.4 ) กับการตรวจหา ninhydrin คอลัมน์โพสต์สำหรับการบิน เป็นรู้จักส่วนผสมของที่แตกต่างกัน ฟา ถูกนำมาใช้เพื่อวิเคราะห์เป็นมาตรฐานภายนอกสำหรับการคำนวณ2.10 . การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาศึกษาตามฮัน เคาrombouts และข้างนอก ( 2004 ) สั้น ๆ , 50 กรัมของแต่ละกลุ่มตัวอย่างaseptically ชั่งใส่โถเครื่องปั่นเป็นหมัน ( Oster ) ที่มีเกลือปลอดเชื้อ 450 ml ( 10 กรัมต่อลิตร pH 7.2 ) ตัวอย่างที่ผสมสูงความเร็วได้ 2 นาทีต่อมาวิธีการเตรียมในทศนิยมโซเดียมคลอไรด์ ( ฮอลลิงก์เวิร์ท et al . , 1991 ) สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา . สำหรับนับจานแอโรบิก ( APC ) การระบุตัวอย่างในการใส่แผ่น Planetmath reference ( PCA oxoid , อังกฤษ ) หลังการบ่มที่ 22 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 72 ชั่วโมง สำหรับแบคทีเรียนโดสปอร ( spores )การแจกแจงตัวอย่าง พาสเจอร์ไรส์ ( 80 C 10 นาที ) และสปอร์ถูกระบุในเทแผ่นของ PCA หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 30 C สำหรับ72 ชั่วโมง แบคทีเรียกรดแล็กติก ( Lab ) ที่ระบุในแผ่นของเทนาง agar ( Merck ฐาน oxoid , อังกฤษ ) หลังการบ่มที่ 3e4 วัน30 . เลือกการวางอนาคตผิดเพี้ยน คือออกมาใส่จานวุ้นตาล ม่วงแดง ( vrbg น้ำดี ,oxoid , อังกฤษ ) หลังจาก 36 ชั่วโมงบ่มที่ 30 องศาเซลเซียส2.11 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลทุกการทดลองตามบล็อกแบบสุ่มสมบูรณ์ออกแบบและดำเนินการทั้งสามใบ ผลลัพธ์ที่ได้นำเสนอเป็นค่าเฉลี่ย ค่าความเบี่ยงเบนมาตรฐาน ( SD ) ±ของแบบวัดการวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) หนึ่งวิธีของการใช้สถิติ17 โปรแกรม คอมพิวเตอร์ ( SPSS Inc , Chicago , IL , USA ) , และความแตกต่างในหมายความว่า ค่าถูก ที่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญน้อยที่สุด( LSD , p < 0.05 ) ตามขั้นตอนของระบบการวิเคราะห์ทางสถิติ3 . ผลและการอภิปราย3.1 . การผลิตเอนไซม์ถิ่น xh-22 โดยเชื้อราสกุลที่เกี่ยวข้องในการผลิตเต้าหู้ยี้แบบดั้งเดิมอยู่การ mucoraceae รวมทั้ง actinomucor Mucor spp . ) และเชื้อรา Rhizopus spp . ซึ่งมีเอนไซม์ที่มีความสามารถในระบบกิจกรรมที่ช่วยให้มันเติบโตบนพื้นผิวที่อุดมไปด้วยโปรตีน แต่ยากจนในคาร์โบไฮเดรต ( ฮัน rombouts & ออก , 2001 ) ใน ปัจจุบันการศึกษาเริ่มต้นการหมักด้วยเชื้อราถิ่น xh-22 ปกติ .ใช้สำหรับการผลิตเต้าหู้ยี้ และมีบันทึกความปลอดภัยที่ดีมาก เชื้อราของหมักต้องใช้สามขั้นตอนแรกเป็นการเจริญเติบโตของเส้นใยเชื้อราย่อยโปรตีนบางส่วนโดยเอนไซม์ขับโดยแต่ละ วินาทีที่ถูกทำจากซูริมิและการย่อยโปรตีนที่สามถูกเพิ่มเติมโดยเอนไซม์ มันเป็นเรื่องสำคัญอนุญาตให้ growas Mucor หลายเส้นใยเป็นไปได้ในระยะแรก( จ้าว & เจิ้ง , 2009 ) 1 . xh-22 ถิ่น grewvery รวดเร็วใน ซูริมิพื้นผิวในระหว่างการหมัก หลังจากสองวัน การหมักเส้นใยถูกพบบนพื้นผิวและเส้นใยสีขาวปกคลุม ซูริมิรูปแบบคุณค่าทางอาหารและการผลิต a-amylase ถิ่น xh-22 ) โดยแสดงในรูปที่ 1 กิจกรรมเอนไซม์โปรตีเอสเป็นกลางในซูริที่เพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว ( P < 0.05 ) ในระหว่างกระบวนการหมัก และ กิจกรรมถึง 66.3u/g ที่เวลา 48 ชั่วโมง กิจกรรมของ a-amylase ยังปรับปรุงด้วยการเพิ่มขึ้นของระยะเวลาในการหมัก แต่ 4อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( P < 0.05 ) แต่พบว่าระหว่าง 0 ชั่วโมงและ 24 ชั่วโมง และไม่แตกต่างกันความแตกต่างที่พบใน 24 ชั่วโมง และ 48 ชั่วโมง 36 H นี้ไม่ได้ข้อตกลงกับกระบวนการหมักเต้าหู้ยี้ ในระหว่างที่ทั้งa-amylase protease และผลิตโดยการหมักด้วยเชื้อราเริ่มที่เพิ่มขึ้นกับเวลาการหมัก ( Han et al . , 2003 )ความแตกต่างนี้อาจส่วนหนึ่งเป็นผลมาจากปริมาณสูงของโปรตีนแต่เนื้อหาของคาร์โบไฮเดรตต่ำในซูริมิ การผลิตเอนไซม์โปรตีเอสสูงสามารถรับประกันตามปฏิกิริยาของเอนไซม์โปรตีน )