Genotyping and data analysisThe mod

Genotyping and data analysis
The modified Dellaporta et al. (1983) DNA extraction
procedure was used to extract DNA from the plant
materials (oven-dried young leaf samples) of the
parents and their progeny. The DNA was stored at
-20 C until when needed for genotyping. The DNA
samples of the two parents of each population were
amplified with each of the 542 simple sequence repeat
(SSR) markers (represented by a pair of primers—
forward and reverse) using the protocols by Williams
et al. (1990). The PCR products (about 15 ll each)
were denatured at 95 C and 3 ll of the denatured
products were electrophoresed on 4 %polyacrylamide
gels using Bio-Rad sequencing apparatus (Bio-Rad
Inc., USA) for 15–40 min depending on the size (bp)
of the marker. The gel was then developed, air-dried
and scanned. Patterns were observed for banding
differences between the EB and LB parents and primer
pairs that distinguished between the parents were
selected as polymorphic markers (pm-p).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

genotyping และการวิเคราะห์ข้อมูล
การแก้ไข Dellaporta et al, (1983) การสกัดดีเอ็นเอ
ขั้นตอนถูกนำมาใช้ในการสกัดดีเอ็นเอจากโรงงาน
วัสดุ (ตัวอย่างใบเตาอบแห้งหนุ่ม) ของ
พ่อแม่และลูกหลานของพวกเขา ดีเอ็นเอที่ได้รับการเก็บรักษาไว้ที่
อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนกว่าจะเมื่อมีความจำเป็นสำหรับ genotyping ดีเอ็นเอ
ตัวอย่างของทั้งสองพ่อแม่ของแต่ละประชากรได้รับการ
ขยายกับแต่ละ 542 ซ้ำลำดับง่าย
(SSR) เครื่องหมาย (แสดงโดยคู่ของ primers-
ไปข้างหน้าและย้อนกลับ) โดยใช้โปรโตคอลโดยวิลเลียมส์
และคณะ (1990) ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ (ประมาณ 15 LL แต่ละ)
ถูกเอทิลแอลกอฮอล์ที่ 95 องศาเซลเซียสและ 3 LL ของเอทิลแอลกอฮอล์
ผลิตภัณฑ์ถูก electrophoresed เมื่อวันที่ 4% polyacrylamide
เจลโดยใช้ชีวภาพ -Rad ลำดับอุปกรณ์ (ชีวภาพ -Rad
Inc. , ประเทศสหรัฐอเมริกา) สำหรับ 15-40 นาทีขึ้นอยู่ กับขนาด (bp)
ของเครื่องหมาย เจลได้รับการพัฒนาแล้วอากาศแห้ง
และสแกน รูปแบบที่ถูกตั้งข้อสังเกตสำหรับแถบ
ความแตกต่างระหว่าง EB และ LB พ่อแม่และไพรเมอร์
คู่ที่แตกต่างระหว่างผู้ปกครองที่ได้รับ
การคัดเลือกให้เป็นเครื่องหมาย polymorphic (PM-P)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การอ่านและวิเคราะห์ข้อมูล
แก้ไข dellaporta et al . ( 1983 ) ขั้นตอนการสกัดดีเอ็นเอ
ใช้สกัดดีเอ็นเอจากพืช
วัสดุ ( เตาอบแห้งตัวอย่างใบเล็ก ) ของ
พ่อแม่และลูกหลานของพวกเขา ดีเอ็นเอที่ถูกเก็บไว้ที่ - 20 C
 จนถึงเวลาที่จำเป็นสำหรับการอ่าน . ดีเอ็นเอ
ตัวอย่างของทั้งสองครอบครัวของแต่ละประชากรของแต่ละคน

ผมลำดับซ้ำง่าย( SSR ) เครื่องหมาย ( แสดงโดยคู่ของไพรเมอร์ -
ไปข้างหน้าและย้อนกลับ ) โดยใช้โปรโตคอลโดยวิลเลียม
et al . ( 1990 ) ผลิตภัณฑ์ PCR ( ประมาณ 15 จะถูกใช้ในแต่ละ )
 95 องศาเซลเซียสและ 3 จะใช้เป็นผลิตภัณฑ์ electrophoresed 4 %

เจลอะคริลาไมด์ที่ใช้ราดจัดลำดับเครื่องมือไบโอ ( ไบโอ ราด
Inc . , USA ) 15 - 40 นาทีขึ้นอยู่กับขนาด ( BP )
ของเครื่องหมาย เจลแล้วพัฒนาอากาศแห้ง
และสแกน . ลวดลายที่พบในแถบ
ความแตกต่างระหว่าง EB และพ่อแม่ปอนด์และรองพื้น
คู่ที่แตกต่างระหว่างพ่อแม่
เลือกที่มีเครื่องหมาย ( pm-p )