2.3. In vitro colonic fermentation

2.3. In vitro colonic fermentation The IN fraction obtained after the in vitro intestinal digestion was incubated in vitro in the presence of human gut microbiota, which was achieved with donations of faeces from three healthy females (27–35 years, BMI 18.5–24.9 kg/m2). The protocol of the study was approved by the Ethical Committee of Clinical Research of Arnau Vilanova University Hospital, Lleida, Spain (Approval Number: CEIC-1326). Volunteers, who reported no intestinal alterations, no consumption of prebiotics and probiotics products and have declared no antibiotic treatment during the last three month previous to the donation day, transported the faecal samples in an airtight container provided with a gas generation sachet (BD GasPackTM). In the laboratory, faecal samples were maintained in the containers at 4 Candusedwithinthe2 hofdefecation.For thefermentation procedure, a media (5% faeces) was prepared mixing the faeces with a pre-reduced carbonate-phosphate buffer prepared according to Mosele et al. (2015). Ten milliliters of faecal inocula (5% faeces) were aliquoted in dispensable tubes (15 mL), mixed with 0.1 g of IN and incubated for different times (0, 2, 8, 24 and 48 h). These samples were prepared in parallel with two controls: control 1, which was faecal medium without IN, and control 2, which was carbonate-phosphate buffer with the IN fraction but without faeces. The incubation was carried out under anaerobic conditions in an orbital shaker (60 rpm) at 37 C and all incubations were performed in triplicate. Samples obtained from each time were freeze-dried and stored at 80 C until the chromatographic analysis of their phenolic compounds and antioxidants.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. เศษส่วนในการหมัก colonic ในหลอดทดลองได้รับหลังจากการย่อยอาหารที่ลำไส้ในหลอดทดลองมี incubated ในหลอดทดลองใน microbiota ลำไส้ของมนุษย์ ซึ่งสำเร็จกับบริจาคของอุจจาระจากผู้หญิงสุขภาพดีที่สาม (27 – 35 ปี BMI 18.5 – 24.9 กิโลกรัม/m2) โพรโทคอลของการศึกษาได้รับการอนุมัติ โดยจริยธรรมคณะกรรมการของทางคลินิกวิจัยของ Arnau Vilanova พยาบาลในมหาวิทยาลัย Lleida สเปน (หมายเลขการอนุมัติ: CEIC 1326) อาสาสมัคร ผู้รายงานไม่มีเปลี่ยนแปลงลำไส้ ไม่สิ้นเปลืองผลิตภัณฑ์ prebiotics และโปรไบโอติก และมีประกาศไม่มีการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะในช่วงสามเดือนสุดท้ายก่อนวันบริจาค ขนส่งตัวอย่าง faecal การเตรียมพร้อมเป็นซองรุ่นก๊าซ (BD GasPackTM) ในห้องปฏิบัติการ ตัวอย่าง faecal ถูกเก็บรักษาไว้ในภาชนะบรรจุที่ 4 Candusedwithinthe2 hofdefecation สำหรับกระบวนการ thefermentation สื่อ (5% อุจจาระ) ถูกเตรียมไว้ผสมอุจจาระกับลดก่อนคาร์บอเนตฟอสเฟตบัฟเฟอร์เตรียมตาม Mosele et al. (2015) 10 มิลลิลิตรของ faecal inocula (5% อุจจาระ) ถูก aliquoted ในหลอดกับ (15 mL), ผสมกับ 0.1 กรัมใน และเวลาที่ต่างกันได้รับการกก (0, 2, 8, 24 และ 48 ชั่วโมง) มีเตรียมตัวอย่างเหล่านี้ขนานกับสองตัวควบคุม: ควบคุม 1 ซึ่ง faecal ปานกลาง โดยใน และควบคุม 2 ซึ่งเป็นคาร์บอเนตฟอสเฟตบัฟเฟอร์ในเศษส่วน แต่ ไม่อุจจาระ บ่มที่ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนในการปั่นของวงโคจร (60 rpm) ที่ 37 C และ incubations ทั้งหมดดำเนินการลข้อ ตัวอย่างที่ได้จากแต่ละครั้งถูกอบแห้ง และเก็บไว้ที่ 80 C จนการวิเคราะห์โครมาม่อฮ่อมและสารต้านอนุมูลอิสระ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 ในการหมัก colonic หลอดทดลองในส่วนที่ได้รับหลังจากที่ในหลอดทดลองลำไส้การย่อยอาหารถูกบ่มในหลอดทดลองในการปรากฏตัวของ microbiota ลำไส้ของมนุษย์ซึ่งก็ประสบความสำเร็จด้วยการบริจาคอุจจาระจากสามหญิงที่มีสุขภาพดี (27-35 ปี BMI 18.5-24.9 กก. / m2 ) โปรโตคอลของการศึกษาได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยทางคลินิกของ Arnau Vilanova โรงพยาบาลมหาวิทยาลัยเลย์สเปน (จำนวนการอนุมัติ: CEIC-1326) อาสาสมัครที่ไม่มีการรายงานการเปลี่ยนแปลงลำไส้บริโภคของ prebiotics ไม่มีและผลิตภัณฑ์โปรไบโอติกและได้ประกาศไม่มีการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะในช่วงสามเดือนก่อนหน้านี้ในวันบริจาคส่งตัวอย่างอุจจาระในภาชนะให้กับซองแก๊สรุ่น (BD GasPackTM) . ในห้องปฏิบัติการตัวอย่างอุจจาระถูกเก็บรักษาในภาชนะบรรจุที่ 4 ขั้นตอน thefermentation Candusedwithinthe2 hofdefecation.For เป็นสื่อ (5% อุจจาระ) ถูกจัดทำขึ้นผสมกับอุจจาระบัฟเฟอร์ก่อนลดลงคาร์บอเนตฟอสเฟตจัดทำขึ้นตาม Mosele et al, (2015) สิบมิลลิลิตร inocula อุจจาระ (5% อุจจาระ) ถูก aliquoted ในหลอดก็ได้ (15 มิลลิลิตร) ผสมกับ 0.1 กรัมในและบ่มสำหรับเวลาที่แตกต่างกัน (0, 2, 8, 24 และ 48 ชั่วโมง) ตัวอย่างเหล่านี้ถูกจัดทำขึ้นในแบบคู่ขนานกับสองการควบคุม: การควบคุม 1 ซึ่งเป็นสื่อกลางในอุจจาระได้โดยไม่ต้อง IN, และการควบคุมที่ 2 ซึ่งเป็นบัฟเฟอร์คาร์บอเนตฟอสเฟตที่มีส่วนใน แต่ไม่มีอุจจาระ บ่มได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนในเครื่องปั่นโคจร (60 รอบต่อนาที) ที่ 37 องศาเซลเซียสและฟักตัวของเชื้อทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ตัวอย่างที่ได้รับจากทุกครั้งที่ถูกแห้งและเก็บไว้ที่ 80 องศาเซลเซียสจนการวิเคราะห์สารของสารประกอบฟีนอของพวกเขาและสารต้านอนุมูลอิสระ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 ในหลอดทดลองสมองในส่วนที่ได้จากการหมักบ่มในการย่อยอาหารเป็นหลอดไส้หลอด ในการปรากฏตัวของไมโครไบโ ้าไส้มนุษย์ ซึ่งได้รับบริจาคจากผู้ที่มีมูล 3 ( 27 - 35 ปี ดัชนีมวลกาย 18.5 - 24.9 กิโลกรัม / ตารางเมตร ) ขั้นตอนของการศึกษาได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยทางคลินิกของ arnau vilanova โรงพยาบาลมหาวิทยาลัย Lleida , สเปน , ( หมายเลขการอนุมัติ : ceic-1326 ) อาสาสมัครที่ระบุว่าไม่มีการเปลี่ยนแปลงในลำไส้ ไม่บริโภคและผลิตภัณฑ์โปรไบโอติก และพรีไบโอติก ประกาศไม่มียาปฏิชีวนะในช่วงสามเดือนก่อนที่จะบริจาควันขนส่งตัวอย่างพันธุ์ในคอนเทนเนอร์ที่ airtight ให้กับรุ่นแก๊สซอง ( BD gaspacktm ) ในห้องปฏิบัติการที่ถูกเก็บรักษาไว้ในภาชนะบรรจุตัวอย่างกลุ่มที่ 4 candusedwithinthe2 hofdefecation สำหรับขั้นตอน thefermentation , สื่อ ( 5 % อุจจาระ ) เตรียมผสมอุจจาระด้วยก่อนลดคาร์บอเนตฟอสเฟตบัฟเฟอร์เตรียมไว้ตาม mosele et al . ( 2015 ) 10 มิลลิลิตร ใน inocula ( 5% อุจจาระ ) aliquoted ในหลอดที่ไม่จำเป็น ( 15 มิลลิลิตร ) ผสมกับ 0.1 กรัมและบ่มสำหรับเวลาที่ต่างกัน ( 0 , 2 , 6 , 24 และ 48 ชั่วโมง ) ตัวอย่างเหล่านี้ถูกเตรียมไว้ในแบบคู่ขนานกับการควบคุม 2 : 1 ซึ่งในอาหารที่ไม่ และการควบคุมที่ 2 ซึ่งคาร์บอเนตฟอสเฟตบัฟเฟอร์กับเศษส่วน แต่ไม่มีอุจจาระ บ่มเพาะได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขในการใช้เครื่องปั่นโคจร ( 60 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 37 และ incubations มีการปฏิบัติทั้งสามใบ ตัวอย่างที่ได้จากแต่ละครั้งที่ถูกแช่แข็งและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียส จนถึงการวิเคราะห์และสารประกอบฟีนอลิกและสารต้านอนุมูลอิสระ