Hyperosmolarity caused mitochondria

Hyperosmolarity caused mitochondrial DNA oxidative damage in
HCECs
In nuclear and mitochondrial DNA, 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG) is one of the
predominant forms of free radical-induced oxidative lesions, and has therefore been widely
used as a biomarker for oxidative stress [30]. Aconitase-2, one of the enzymes participating in
the tricarboxylic acid cycle, acts as a biosensor for oxidative stress and preserves mitochondrial
DNA oxidative damage [31–33]. As evaluated by Western blot analysis, aconitase-2 protein
was found to increase markedly at an osmolarity-dependent manner in HCECs exposed to
hyperosmotic media with 400 and 450 mOsM for 24 hours when compared to that in isosmolar
medium, as well as house-keeping protein β-actin (Fig 3A). The immunohistochemical
staining (Fig 3B) further showed that the punctate staining of aconitase-2 in cytoplasm, representing
the mitochondria; and the density and intensity of the punctate staining of aconitase-2
were markedly increased in the cells exposed to hypertonic media at 400–450 mOsM when
compared with cells in isosmolar medium. Interestingly, the markedly increased red brown
staining of an oxidized DNA product 8-OHdG was also observed to be localized in cytoplasm
or nuclear compartment of HCECs exposed to hyperosmotic media (400–450 mOsM) for 24hours while the most cells were stained negative in isosmolar media (Fig 3B). Furthermore, the
enlarged single cell images of 8-OHdG staining showed its homogenous staining in nuclear,
while a punctate pattern in cytoplasm. The density and intensity of 8-OHdG punctate staining
in cytoplasm were markedly increased in the cells exposed to hypertonic media at 400 and 450
mOsM, indicating mitochondrial DNA damage.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Hyperosmolarity ที่ทำให้ mitochondrial DNA oxidative เสียหายในHCECsนิวเคลียร์ และ mitochondrial DNA, 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG) เป็นหนึ่งในรูปแบบทำให้เกิดอนุมูลอิสระได้ oxidative กัน และจึงไม่ถูกกันอย่างแพร่หลายใช้เป็นแบบไบโอมาร์คเกอร์สำหรับความเครียด oxidative [30] Aconitase-2 หนึ่งของเอนไซม์ที่มีส่วนร่วมในวัฏจักรกรด tricarboxylic ทำหน้าที่เป็น biosensor สำหรับความเครียด oxidative และรักษา mitochondrialดีเอ็นเอ oxidative ความเสียหาย [31-33] เป็นประเมิน โดยการวิเคราะห์คืนในเวสตา โปรตีน aconitase-2พบเพิ่มขึ้นอย่างเด่นชัดในลักษณะ osmolarity ขึ้นอยู่กับการสัมผัสกับ HCECsสื่อ hyperosmotic 400 และ 450 mOsM 24 ชั่วโมงเมื่อเปรียบเทียบกับใน isosmolarปานกลาง เป็นบ้านเก็บโปรตีนβ-แอกติน (ฟิก 3A) Immunohistochemicalย้อมสี (ฟิก 3B) เพิ่มเติมพบว่าการย้อมสี punctate aconitase-2 ในไซโทพลาซึม แทนmitochondria และความหนาแน่นและความเข้มของการย้อมสี punctate aconitase-2ได้เพิ่มขึ้นอย่างเด่นชัดในเซลล์ที่สัมผัสกับสื่อ hypertonic ที่ 400 – 450 mOsM เมื่อเมื่อเทียบกับเซลล์ใน isosmolar เป็นเรื่องน่าสนใจ เพิ่มขึ้นอย่างเด่นชัดสีแดงสีน้ำตาลนอกจากนี้ยังได้สังเกตย้อมสีของการตกแต่ง DNA สินค้า 8-OHdG ไปเป็นภาษาท้องถิ่นในไซโทพลาซึมหรือช่องนิวเคลียร์ของ HCECs ที่ถูกสื่อ hyperosmotic (400 – 450 mOsM) 24hours ขณะเซลล์ส่วนใหญ่มีสีลบสื่อ isosmolar (ฟิก 3B) นอกจากนี้ การenlarged single cell images of 8-OHdG staining showed its homogenous staining in nuclear,while a punctate pattern in cytoplasm. The density and intensity of 8-OHdG punctate stainingin cytoplasm were markedly increased in the cells exposed to hypertonic media at 400 and 450mOsM, indicating mitochondrial DNA damage.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

hyperosmolarity เกิดจากดีเอ็นเอเกิดความเสียหายใน hcecs

และนิวเคลียร์ดีเอ็นเอ 8-hydroxy-2 ' , - deoxyguanosine ( 8-ohdg ) เป็นหนึ่งในรูปแบบของการโดด
อนุมูลอิสระแผลออกซิเดชัน และจึงได้ถูกอย่างกว้างขวาง
ใช้เป็นไบโอมาร์คเกอร์สำหรับ oxidative ความเครียด [ 30 ] aconitase-2 หนึ่งของเอนไซม์ร่วมในรอบ tricarboxylic
กรด ,ทำหน้าที่เป็นไบโอเซนเซอร์สำหรับความเครียดออกซิเดชันและไมโตคอนเดรียดีเอ็นเอเกิดความเสียหายรักษา
[ 31 33 ] ประเมินโดยการวิเคราะห์ Western blot โปรตีน ,
aconitase-2 พบเพิ่มขึ้นอย่างเด่นชัดที่ขึ้นอยู่กับลักษณะ hcecs ำได้รับการแช่ในวัคซีน
สื่อ 400 และ 450 mOsm ตลอด 24 ชั่วโมงเมื่อเทียบกับใน isosmolar
ขนาดกลาง ตลอดจนการรักษาโปรตีนแอกทิน ( บีตา - บ้านมะเดื่อ 3A )ใช้ในการย้อมสี ( รูปที่ 3B
) เพิ่มเติม พบว่า punctate staining aconitase-2 ในไซโตปลาสซึมแทน
ไมโตคอนเดรีย และความหนาแน่น และความเข้มของ punctate staining aconitase-2
ได้เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในเซลล์สัมผัสกับไฮเปอร์โทนิกสื่อที่ 400 – 450 mOsm เมื่อ
เมื่อเทียบกับเซลล์ใน isosmolar ปานกลาง น่าสนใจ เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัด
สีแดงสีน้ำตาลการย้อมสีของดีเอ็นเอ พบว่า ผลิตภัณฑ์จาก 8-ohdg เป็นภาษาท้องถิ่นในไซโตปลาสซึม
หรือช่องนิวเคลียร์ของ hcecs เปิดรับสื่อการแช่ในวัคซีน ( 400 – 450 mOsm ) สำหรับชั่วโมงในขณะที่เซลล์ส่วนใหญ่มีคราบลบใน isosmolar สื่อ ( รูปที่ 3B ) นอกจากนี้ การขยายเซลล์เดียว
ภาพ 8-ohdg staining แสดงความยึดเกาะจากนิวเคลียร์
ในขณะที่ punctate แบบแผนใน cytoplasmความหนาแน่นและความเข้มของ 8-ohdg punctate staining
ในไซโตพลาสซึมมีเพิ่มขึ้นอย่างเด่นชัดในเซลล์สัมผัสกับไฮเปอร์โทนิกสื่อที่ 400 และ 450
mOsm ระบุดีเอ็นเอเสียหาย