Example 2 -The inhibiting effect of

Example 2 -The inhibiting effect of สารประกอบฟีโนลิก



The experiments were done using producing fungal and yeast strains

Aspergillusoryzae, Mortierella. isabellina and Lipomyces starkeyi. Two different

5 ไฮโดรไลเซตประเภทลิกโนเซลลูโลสs from autohydrosis treatment of lignocellulose containing ประเภทเฮมิเซลลูโลส sugars and notable amounts of phenolics were tested, ออโตไฮโดรไลซิส liquid e A and ออโตไฮโดรไลซิส liquid B. The สารประกอบฟีโนลิกs were determined according to the โฟลิน-ซิโอแคลตู method with gallic acid as standard (Waterhouse,
2002).

10

From the sporulating fungus grown on PDA-plates a spore สารแขวนลอย was made by adding 12 ml of sterile water and the spores were scraped off with inoculation loop to the liquid. The spore สารแขวนลอย was used for media inoculation.
The medium base components are presented in the table 3. All of them contained

15 these basic nutrients, and small amount of fine cellulose to prevent the fungus from clumping.


Table 3: Composition of growth medium

rill glucose 20 malt extract 30 peptone 3
20
The medium was made using tap water.
The ออโตไฮโดรไลซิส liquid A or B was added in so that the concentration of phenolics was 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7 g/l. After this the pH of the media was adjusted to 6.5 using 3 M NaOH. The medium was distributed to 50 ml batches into

25 250 ml erlenmayerflasks. The media was sterilized in autoclave 121C15 min. After cooling down, each flask was inoculated using 0,5 ml spore สารแขวนลอย mentioned earlier in the case of fungi, and with the yeast pre-cultured yeast สารแขวนลอย was used. For each concentration, parallel cultivations were made. The fungal cultivations were incubated in 160 rpm shaking, and the yeasts in 160 rpm, all at 28
30 C for 5 days. The growth was observed twice daily with a microscope, and in the end of the cultivation the biomass contents were determined.







The fungal biomass content was determined by vacuum filtering the whole content of the flask and washing the biomass with 50 ml of distilled water. After this the biomass cakes were frozen and dried overnight in freeze dryer and the biomass
5 content was determined.


The yeast biomass content was determined by measuring to pre-weighted tubes 7 ml of test growth สารแขวนลอย, parallel samples from each flask. The samples were centrifuged 6000 rpm for 10 min, after which the supernatant was removed, 7 ml of
10 distilled water was added, the tube content was well mixed and the centrifugation repeated. The washing water was then removed, and both the biomass pellets and the supernatants were frozen. Later on, the biomass samples were freeze dried and the biomass content was determined.


15 Results:

By microscopic observations it could be seen that when the phenolic concentration rose, the time needed for the growth to begin grew a little longer with some microbes. The cultivations were monitored twice in a day, so determining the exact moment when the growth began is not possible, but rough estimations can be made.
20 With the yeast L. starkeyi and the fungus A. oryzae there was no notable lag in any

of the tested phenolic concentrations, and all were growing after one day of incubation. The fungus M. isabellina on the other hand the growth began more slowly when the phenolic concentration rose above 4 g/l.


25 A. oryzae could grow even in the highest phenolic concentration tested: 7 g/l, but the biomass content was decreasing when the phenolic concentration grew higher. L. starkeyi and M. isabel/ina could grow up to 6 g/l concentration, in 7 g/l no growth was detected. Similar to A. oryzae, the biomass content was decreasing when the phenolic concentration grew higher. No differences between different hydrolysates
30 from autohydolysis inhibition were detected. In the following table, the biomass content for the microbes tested in various phenolic concentrations are given.





Table 4: Biomass content for the microbes tested in different phenolic concentrations.








Example 3 - Fungal growth and ไลปิด productionon wheat straw hemicelluse and cellulose hydrolysatesugars
5 The experiments were done using a ไลปิด producing fungal strain A.oryzae. From the sporulating fungus grown on PDA-plates a spore สารแขวนลอย was made by adding
12 ml of sterile water and the spores were scraped off with inoculation loop to the

liquid. 24 ml of the spore สารแขวนลอย was directly used for fermentor inoculation. The medium composition is presented in table 5.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างที่ 2 -The ยับยั้งผลกระทบของสารประกอบฟีโนลิกการทดลองทำโดยการใช้การผลิตเชื้อราและยีสต์สายพันธุ์Aspergillusoryzae, Mortierella isabellina และ Lipomyces starkeyi สองแตกต่างกัน5 ไฮโดรไลเซตประเภทลิกโน เซลลูโลส S จากการรักษาลิกโนเซลลูโลส autohydrosis มีประเภทเฮมิเซลลูโลสน้ำตาลและจำนวนเงินที่โดดเด่นของฟีนอลได้รับการทดสอบออโตไฮโดรไลซิสอีของเหลวและออโตไฮโดรไลซิส ของเหลวขสารประกอบฟีโนลิก s ได้รับการพิจารณาให้เป็นไปตามโฟลิน - ซิโอแคลตูวิธีการที่มีกรดฝรั่งเศสเป็นมาตรฐาน (วอเตอร์เฮาส์. 2002) 10 จากเชื้อรา sporulating ที่ปลูกบน PDA แผ่นสปอร์สารแขวนลอย ที่ถูกสร้างขึ้นโดยการเพิ่ม 12 มล. น้ำหมันและสปอร์ที่ถูกขูดออกด้วยการฉีดวัคซีนห่วงสภาพคล่อง ปอร์สารแขวนลอยที่ใช้สำหรับการฉีดวัคซีนสื่อ. กลางส่วนประกอบฐานถูกแสดงไว้ในตารางที่ 3 ทั้งหมดของพวกเขาที่มีอยู่15 สารอาหารพื้นฐานเหล่านี้และจำนวนเล็ก ๆ ของเซลลูโลสที่ดีเพื่อป้องกันไม่ให้เชื้อราจาก clumping. ตารางที่ 3: องค์ประกอบของสื่อการเจริญเติบโตระดับน้ำตาลในลำธาร 20 สารสกัดจากมอลต์ 30 เปปโตน 3 20 กลางที่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้น้ำประปา. ออโตไฮโดรไลซิสของเหลว A หรือ B ถูกเพิ่มเข้ามาในเพื่อให้ความเข้มข้นของฟีนอลเป็น 0, 1, 2, 3, 4, 5 , 6 และ 7 กรัม / ลิตร หลังจากนี้ค่า pH ของสื่อที่ถูกปรับ 6.5 ใช้ 3 M NaOH สื่อที่ได้รับการกระจายไปยัง 50 มล. สำหรับกระบวนการเข้า25 250 มล erlenmayerflasks สื่อได้รับการฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดัน 121C15 นาที หลังจากที่เย็นลงในแต่ละขวดได้รับเชื้อโดยใช้ 0.5 มล. สปอร์สารแขวนลอยกล่าวก่อนหน้านี้ในกรณีของเชื้อราและยีสต์ก่อนการเพาะเลี้ยงยีสต์สารแขวนลอยถูกนำมาใช้ สำหรับแต่ละความเข้มข้นของการเพาะปลูกแบบขนานที่ถูกสร้างขึ้น ปลูกเชื้อราถูกบ่มใน 160 รอบต่อนาทีสั่นและยีสต์ใน 160 รอบต่อนาทีทุกวันที่ 28 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วัน การเจริญเติบโตเป็นที่สังเกตวันละสองครั้งด้วยกล้องจุลทรรศน์และในตอนท้ายของการเพาะปลูกเนื้อหาชีวมวลที่ถูกกำหนด. เนื้อหาชีวมวลเชื้อราถูกกำหนดโดยสูญญากาศการกรองเนื้อหาทั้งหมดของกระติกน้ำและล้างชีวมวลที่มี 50 มล. น้ำกลั่น หลังจากนี้เค้กชีวมวลถูกแช่แข็งและแห้งค้างคืนในตู้แช่แข็งและชีวมวลเนื้อหา 5 ถูกกำหนด. เนื้อหายีสต์ชีวมวลถูกกำหนดโดยการวัดหลอดก่อนถ่วงน้ำหนัก 7 มล. ของการเจริญเติบโตการทดสอบสารแขวนลอยตัวอย่างขนานจากแต่ละขวด ตัวอย่างถูกปั่น 6000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีหลังจากที่ใสจะถูกลบออก 7 มล10 น้ำกลั่นถูกเพิ่มเนื้อหาหลอดถูกผสมกันและหมุนเหวี่ยงซ้ำ น้ำซักผ้าจะถูกลบออกแล้วและทั้งสองเม็ดชีวมวลและ supernatants ถูกแช่แข็ง ต่อมาเมื่อกลุ่มตัวอย่างชีวมวลที่ถูกแช่แข็งแห้งและเนื้อหาชีวมวลถูกกำหนด. 15 ผล: โดยการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์จะเห็นได้ว่าเมื่อความเข้มข้นของฟีนอลเพิ่มขึ้นเวลาที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตที่จะเริ่มต้นขยายตัวเล็กน้อยอีกต่อไปด้วยจุลินทรีย์บาง เพาะปลูกได้รับการตรวจสอบครั้งที่สองในวันดังนั้นการกำหนดช่วงเวลาที่แน่นอนเมื่อการเจริญเติบโตที่จะเริ่มต้นเป็นไปไม่ได้ แต่ประมาณหยาบสามารถทำ. 20 ด้วยยีสต์ลิตร starkeyi และเชื้อรา A. oryzae ไม่มีความโดดเด่นความล่าช้าในการใด ๆของ ความเข้มข้นของฟีนอลที่ผ่านการทดสอบและทั้งหมดกำลังเติบโตหลังจากที่วันหนึ่งของการบ่ม เชื้อรา M. isabellina บนมืออื่น ๆ ที่เจริญเติบโตช้าที่จะเริ่มต้นขึ้นเมื่อความเข้มข้นของฟีนอลสูงกว่า 4 กรัม / ลิตร. 25 A. oryzae สามารถเจริญเติบโตได้แม้ในความเข้มข้นของฟีนอลสูงสุดทดสอบ: 7 กรัม / ลิตร แต่เนื้อหาชีวมวลลดลง เมื่อความเข้มข้นของฟีนอลที่ขยายตัวสูงขึ้น ลิตร starkeyi เมตรและอิซาเบล / INA สามารถเติบโตได้ถึง 6 กรัมเข้มข้น / ลิตรใน 7 g / l การเจริญเติบโตไม่ถูกตรวจพบ คล้ายกับ A. oryzae เนื้อหาชีวมวลลดลงเมื่อความเข้มข้นของฟีนอลที่ขยายตัวสูงขึ้น ไม่มีความแตกต่างระหว่างไฮโดรไลเซที่แตกต่างกัน30 จากการยับยั้ง autohydolysis ถูกตรวจพบ ในตารางต่อไปเนื้อหาชีวมวลสำหรับจุลินทรีย์ที่ผ่านการทดสอบในระดับความเข้มข้นฟีนอลต่าง ๆ จะได้รับ. ตารางที่ 4: สารชีวมวลสำหรับจุลินทรีย์ที่ผ่านการทดสอบในระดับความเข้มข้นฟีนอลที่แตกต่างกัน. ตัวอย่างที่ 3 - การเจริญเติบโตของเชื้อราและไลปิด productionon ฟางข้าวสาลี hemicelluse และเซลลูโลส hydrolysatesugars 5 ทดลองทำโดยใช้ไลปิดการผลิตสายพันธุ์เชื้อรา A.oryzae จากเชื้อรา sporulating ที่ปลูกบน PDA แผ่นสปอร์สารแขวนลอยที่ถูกสร้างขึ้นโดยการเพิ่ม12 มล. น้ำหมันและสปอร์ที่ถูกขูดออกด้วยการฉีดวัคซีนห่วงกับของเหลว 24 มล. ของสปอร์สารแขวนลอยถูกนำมาใช้โดยตรงสำหรับการฉีดวัคซีนถังหมัก องค์ประกอบกลางจะนำเสนอในตารางที่ 5

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่าง 2 - ยับยั้งผลของสารประกอบฟีโนลิกการทดลองทำโดยใช้การผลิตเชื้อราและยีสต์สายพันธุ์aspergillusoryzae mortierella , . และ isabellina lipomyces starkeyi . สองคนที่แตกต่างกัน5 ไฮโดรไลเซตประเภทลิกโนเซลลูโลสจากการรักษา autohydrosis ของลิกโนเซลลูโลสที่มีน้ำตาลและปริมาณฟีนอลิกประเภทเฮมิเซลลูโลสเด่นทดสอบออโตไฮโดรไลซิสของเหลวและของเหลว B E A ออโตไฮโดรไลซิสสารประกอบฟีโนลิก s ถูกกำหนดตามการโฟลิน - ซิโอแคลตูด้วยวิธีที่เป็นมาตรฐาน ( วอเตอร์เฮาส์เพิ่มขึ้น ,2002 )10จากผลิตสปอร์เชื้อราเติบโตบน PDA แผ่นสปอร์สารแขวนลอยทำโดยการเพิ่ม 12 มล. ของน้ำหมันและสปอร์ถูกขูดออกด้วยใส่ห่วงให้เหลว การสร้างสปอร์สารแขวนลอยถูกใช้สำหรับการฉีดวัคซีนฐานกลางเป็นส่วนประกอบแสดงในตารางที่ 3 ทั้งหมดของพวกเขาที่มีอยู่15 สารอาหารพื้นฐานเหล่านี้และจำนวนน้อยได้เซลลูโลสป้องกันเชื้อราจาก clumping .ตารางที่ 3 : องค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อริลกลูโคส 20 malt extract extract 3 3020สื่อได้ใช้น้ำประปาการออโตไฮโดรไลซิสของเหลว A หรือ B เพิ่มเพื่อให้ความเข้มข้นของโพลีฟีนอลคือ 0 , 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 และ 7 กรัม / ลิตร หลังจากนี้ ของสื่อคือปรับ 6.5 ใช้ 3 M NaOH อาหารถูกแจกจ่ายให้กลุ่มใน 50 มิลลิลิตร25 erlenmayerflasks 250 ml . สื่อถูกฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดัน 121c15 นาทีเมื่อเย็นลง แต่ละขวดใช้ 0 , 5 ml เป็นเชื้อสปอร์สารแขวนลอยกล่าวถึงก่อนหน้านี้ในกรณีของเชื้อราและยีสต์สารแขวนลอยเพาะเลี้ยงยีสต์ก่อนใช้ สำหรับแต่ละความเข้มข้น เพาะแบบขนานได้ การเพาะเลี้ยงเชื้อราได้ 160 รอบสั่น และยีสต์ใน 160 รอบต่อนาทีที่ 28 ทั้งหมด30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วัน การตรวจสอบสองครั้งทุกวัน ด้วยกล้องจุลทรรศน์ และในตอนท้ายของการเนื้อหาชีวมวลต่างตัดสินใจปริมาณมวลชีวภาพเชื้อราถูกกำหนดโดยสูญญากาศการกรองเนื้อหาทั้งหมดของขวด แล้วล้างต่อด้วย 50 มล. น้ำกลั่น หลังจากนั้นมวลชีวภาพเค้กแช่แข็ง และค้างคืนในเครื่องอบแห้งแบบแช่แข็งและแห้งชีวมวล5 ) มีการกำหนดยีสต์ที่ถูกกำหนดโดยการวัดปริมาณชีวมวลก่อนท่อหนัก 7 ml สารแขวนลอยเติบโตแบบคู่ขนาน ตัวอย่าง จากแต่ละขวด จำนวนระดับ 6000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที หลังจากที่นำออก 7 มิลลิลิตร10 น้ำกลั่นเพิ่มหลอดเนื้อหาผสมและปั่นซ้ำ เครื่องซักผ้าน้ำถูกลบออกแล้ว และทั้ง 2 เม็ด และ supernatants ถูกแช่แข็ง ต่อมา ชีวมวลที่ตรึงแห้งชีวมวล จำนวนและปริมาณกำหนดผลลัพธ์ที่ได้ : 15โดยสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์จะเห็นว่าเมื่อความเข้มข้นฟีนอลเพิ่มขึ้น เวลาที่จำเป็นสำหรับการเริ่มต้นขึ้นอีกหน่อยด้วยจุลินทรีย์ ที่เพาะได้ตรวจสอบ 2 ครั้งใน 1 วัน ดังนั้น การกำหนดช่วงเวลาที่แน่นอนเมื่อการเจริญเติบโตเริ่มเป็นไปไม่ได้ แต่ประมาณการคร่าวๆ ก็ได้20 กับยีสต์และเชื้อรา A . oryzae . starkeyi ไม่มีความล่าช้าใด ๆเด่นทดสอบความเข้มข้นของฟีนอลและปลูกหลังจากวันที่ของการบ่ม เชื้อรา M . isabellina ในทางกลับกันการเจริญเติบโตเริ่มช้าลงเมื่อความเข้มข้นฟีนอลเพิ่มขึ้นเหนือ 4 กรัม / ลิตร25 . oryzae สามารถเติบโตได้แม้ในความเข้มข้นสูงสารทดสอบ : 7 กรัม / ลิตร แต่ปริมาณชีวมวลมีค่าลดลงเมื่อความเข้มข้นฟีนอลที่เติบโตสูงขึ้น ฉัน starkeyi และ เบล / อินาสามารถเติบโตได้ถึง 6 กรัมต่อลิตร ปริมาณ 7 กรัม / ลิตร ไม่มีการตรวจสอบ คล้ายกับ A . oryzae , ชีวมวลที่ปริมาณลดลงเมื่อความเข้มข้นของฟีนอลที่เติบโตสูงขึ้น ไม่มีความแตกต่างระหว่างของที่แตกต่างกัน30 จาก autohydolysis ยับยั้งถูกตรวจพบ ในตารางต่อไปนี้ เนื้อหาชีวมวลสำหรับจุลินทรีย์ทดสอบในความเข้มข้นฟีนอลต่างๆ จะได้รับตารางที่ 4 : ปริมาณชีวมวลสำหรับจุลินทรีย์ทดสอบในความเข้มข้นฟีนอลที่แตกต่างกันตัวอย่าง 3 - เชื้อราไลปิด productionon และฟางข้าวสาลีและ hydrolysatesugars hemicelluse เซลลูโลส5 ชุดการทดลองทำโดยใช้ไลปิดการผลิตเชื้อราสายพันธุ์ a.oryzae . จากผลิตสปอร์เชื้อราเติบโตบน PDA แผ่นสปอร์สารแขวนลอยได้โดยการเพิ่ม12 มล. ของน้ำหมันและสปอร์ถูกขูดออกด้วยการใส่ห่วงของเหลว 24 ml ของ สปอร์สารแขวนลอยได้โดยตรงใช้สำหรับถังปลูกเชื้อ สื่อองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 5