Denaturing gels are run under condi

Denaturing gels are run under conditions that disrupt the natural structure of the analyte, causing it to unfold into a linear chain. Thus, the mobility of each macromolecule depends only on its linear length and its mass-to-charge ratio. Thus, the secondary, tertiary, and quaternary levels of biomolecular structure are disrupted, leaving only the primary structure to be analyzed.

Nucleic acids are often denatured by including urea in the buffer, while proteins are denatured using sodium dodecyl sulfate, usually as part of the SDS-PAGE process. For full denaturation of proteins, it is also necessary to reduce the covalent disulfide bonds that stabilize their tertiary and quaternary structure, a method called reducing PAGE. Reducing conditions are usually maintained by the addition of beta-mercaptoethanol or dithiothreitol. For general analysis of protein samples, reducing PAGE is the most common form of protein electrophoresis.

Denaturing conditions are necessary for proper estimation of molecular weight of RNA. RNA is able to form more intramolecular interactions than DNA which may result in change of its electrophoretic mobility. Urea, DMSO and glyoxal are the most often used denaturing agents to disrupt RNA structure. Originally, highly toxic methylmercury hydroxide was often used in denaturing RNA electrophoresis,[12] but it may be method of choice for some samples.[13]

Denaturing gel electrophoresis is used in the DNA and RNA banding pattern-based methods DGGE (denaturing gradient gel electrophoresis),[14] TGGE (temperature gradient gel electrophoresis), and TTGE (temporal temperature gradient electrophoresis).[15]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เจ denaturing จะรันภายใต้เงื่อนไขที่ทำลายโครงสร้างธรรมชาติของ analyte ก่อให้เกิดการแฉเป็นลูกโซ่เชิงเส้น ดังนั้น ความคล่องตัวของแต่ละสมควรเท่านั้นขึ้นอยู่กับความยาวเชิงเส้นและอัตราส่วนของมวลการชาร์จ ดังนั้น รอง ลำดับที่สาม และสี่ระดับของโครงสร้าง ๕๐๘ จะหยุดชะงัก ออกเฉพาะโครงสร้างหลักเพื่อที่จะวิเคราะห์กรดนิวคลีอิกมีมักเอทิลแอลกอฮอล์ โดยรวม urea ในบัฟเฟอร์ ในขณะที่โปรตีนมีเอทิลแอลกอฮอล์โดยใช้โซเดียมซัลเฟต dodecyl มักจะเป็นส่วนหนึ่งของกระบวนการหน้า SDS สำหรับแปรสภาพเต็มโปรตีน ก็ยังจำเป็นต้องลดพันธะโควาเลนต์ซัลไฟด์ที่เสถียรภาพระดับตติยภูมิ และสี่โครงสร้าง วิธีที่เรียกว่าลดหน้า ลดเงื่อนไขจะมักจะรักษา โดยการเพิ่ม beta mercaptoethanol หรือ dithiothreitol สำหรับการวิเคราะห์ทั่วไปตัวอย่างโปรตีน ลดหน้าเป็นแบบทั่วไปของโปรตีนอิDenaturing เงื่อนไขจำเป็นสำหรับการประเมินที่เหมาะสมของน้ำหนักโมเลกุลของ RNA อาร์เอ็นเอเป็นการโต้ตอบ intramolecular เพิ่มเติมกว่าดีเอ็นเอซึ่งอาจทำให้การเปลี่ยนแปลงของจำนวน electrophoretic ยูเรีย DMSO และ glyoxal เป็นตัวแทน denaturing มักใช้เพื่อทำลายโครงสร้างของ RNA แต่เดิม ไฮดรอกไซด์ methylmercury พิษสูงที่มีใช้บ่อยใน denaturing RNA อิ, [12] แต่อาจมีวิธีการเลือกตัวอย่างบาง [13]Denaturing อิเจใช้ใน DNA และ RNA ที่แถบลายตามวิธี DGGE (denaturing ไล่ระดับเจอิ), [14] TGGE (อิเจอุณหภูมิ), และ TTGE (การไล่ระดับอุณหภูมิขมับอิ) [15]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เจล denaturing จะดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ส่งผลกระทบต่อโครงสร้างตามธรรมชาติของการวิเคราะห์ทำให้มันจะแฉในห่วงโซ่เส้น ดังนั้นการเคลื่อนไหวของแต่ละโมเลกุลขึ้นอยู่กับความยาวเพียงเส้นและอัตราส่วนโดยมวลต่อค่าใช้จ่ายของมัน ดังนั้นมัธยมศึกษาอุดมศึกษาและสี่ระดับของโครงสร้างชีวโมเลกุลจะหยุดชะงักเหลือเพียงโครงสร้างหลักที่จะวิเคราะห์.

กรดนิวคลีอิกมักจะเอทิลแอลกอฮอล์โดยรวมทั้งยูเรียในบัฟเฟอร์ในขณะที่โปรตีนเอทิลแอลกอฮอล์โดยใช้โซเดียมโดเดซิลซัลเฟตมักจะเป็นส่วนหนึ่งของ กระบวนการระบบ SDS-PAGE สำหรับการสูญเสียสภาพธรรมชาติของโปรตีนเต็มรูปแบบก็ยังเป็นสิ่งจำเป็นเพื่อลดพันธะโควาเลนซัลไฟด์ที่มีเสถียรภาพโครงสร้างในระดับอุดมศึกษาและสี่ของพวกเขาวิธีการที่เรียกว่าการลดหน้า เงื่อนไขการลดมักจะถูกเก็บรักษาไว้โดยนอกเหนือจากเบต้า mercaptoethanol หรือ dithiothreitol สำหรับการวิเคราะห์ทั่วไปของตัวอย่างโปรตีนลดหน้าเป็นรูปแบบที่พบมากที่สุดของ electrophoresis โปรตีน.

เงื่อนไข denaturing เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการประมาณค่าที่เหมาะสมของน้ำหนักโมเลกุลของอาร์เอ็นเอ RNA คือสามารถที่จะสร้างปฏิสัมพันธ์ภายในโมเลกุลมากกว่าดีเอ็นเอซึ่งอาจส่งผลให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของการเคลื่อนไหวของ electrophoretic ยูเรีย, DMSO และ glyoxal จะใช้บ่อยที่สุด denaturing ตัวแทนในการทำลายโครงสร้างอาร์เอ็นเอ แต่เดิมเป็นพิษสูงไฮดรอกไซ methylmercury มักจะถูกใช้ใน denaturing electrophoresis อาร์เอ็นเอ [12] แต่มันอาจจะเป็นวิธีการเลือกตัวอย่างบางส่วน. [13]

denaturing ข่าวคราวที่ใช้ใน DNA และ RNA แถบวิธีการรูปแบบตาม DGGE (denaturing ลาด เจลอิเล็ก) [14] TGGE (อุณหภูมิลาด gel electrophoresis) และ TTGE (ชั่วคราวอุณหภูมิลาด electrophoresis). [15]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เจลี่ ทำงานภายใต้เงื่อนไขที่ทำลายโครงสร้างธรรมชาติของครู ก่อให้เกิดการแฉในห่วงโซ่เชิงเส้น ดังนั้น การเคลื่อนไหวของแต่ละโมเลกุลขึ้นอยู่กับความยาวของเส้นและมวลของค่าอัตราส่วน ดังนั้น , มัธยมศึกษา , อุดมศึกษา และระดับโครงสร้างชีวโมเลกุลซึ่งพอดี เหลือเพียงโครงสร้างหลักที่จะวิเคราะห์กรดนิวคลีอิกมักจะใช้โดยรวมทั้งยูเรียในบัฟเฟอร์ ในขณะที่โปรตีนเกิดการใช้โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต , มักจะเป็นส่วนหนึ่งของกระบวนการการศึกษา . สำหรับ ( เต็มไปด้วยโปรตีน นอกจากนี้ยังจำเป็นต้องลดโควาเลนต์พันธบัตรซัลไฟด์ที่เสถียรภาพโครงสร้างตติย Quaternary และของวิธีการที่เรียกว่าการลดหน้า การลดเงื่อนไขที่มักจะรักษาโดยการเพิ่มของเบต้า mercaptoethanol หรือบัตรแข็ง . ข้อมูลทั่วไปของตัวอย่างโปรตีน ลดหน้า เป็นรูปแบบที่พบมากที่สุดของเอนไซม์โปรตีนเงื่อนไขที่จำเป็นสำหรับการี่เหมาะสมของน้ำหนักโมเลกุลของ RNA ซึ่งสามารถสร้างปฏิสัมพันธ์ intramolecular มากกว่าดีเอ็นเอซึ่งอาจส่งผลในการเปลี่ยนแปลงของยูไนเต็ด . ยูเรียและ DMSO Glyoxal เป็นส่วนใหญ่มักจะใช้ี่ตัวแทนที่จะทำลายโครงสร้าง RNA เดิมที เป็นพิษสูงเมตทิลเมอร์คิวรีไฮดรอกไซด์ก็มักจะใช้ในี่นี้อิเล็ก [ 12 ] แต่มันอาจเป็นวิธีการของทางเลือกสำหรับบางตัวอย่าง [ 13 ]ี่เจลใช้ใน DNA และ RNA ประเทศไทยใช้วิธีการทดลอง ( ี่ลาด gel electrophoresis ) [ 14 ] tgge ( อุณหภูมิลาด gel electrophoresis ) และ ttge ( Electrophoresis การกระจายอุณหภูมิชั่วคราว ) [ 15 ]