SYSTEM AND METHODS FOR CONTINUOUS P

SYSTEM AND METHODS FOR CONTINUOUS PROPAGATION AND MASS PRODUCTION OF ARBUSCULAR MYCORRHIZAL FUNGI IN LIQUID CULTURE
ข้อถือสิทธิ

1. A method of producing arbuscular mycorrhizal fungi material, said method ซึ่งประกอบรวมด้วย:
a. continuously culturing root material in liquid culture medium, โดยที่ said
root material is
i. capable of building a branched secondary root system in vitro, and ii. colonized by arbuscular mycorrhizal fungi.


2. The method of ข้อถือสิทธิ 1, further ซึ่งประกอบรวมด้วย a step of harvesting at least a portion of said root material colonized by said arbuscular mycorrhizal fungi.


3. The method of ข้อถือสิทธิ 1 or 2, further ซึ่งประกอบรวมด้วย the step of passaging at least a portion of said harvested colonized root material to fresh culture medium.


4. The method of any of ข้อถือสิทธิ 1-3, โดยที่ at least a portion of the harvested colonized root material is used as an inoculum.


5. The method of any of ข้อถือสิทธิ 2-4, โดยที่ the passaging step can precede the harvesting step.


6. The method of any of ข้อถือสิทธิ 1-5, โดยที่ said liquid culture medium contains 30 µM
or less phosphate during any of the culturing phases.


7. The method of any of ข้อถือสิทธิ 1-6, โดยที่ said liquid medium contains 20 mM
ammonium or less during any of the culturing phases.


8. The method of any ข้อถือสิทธิ 1-7, โดยที่ the arbuscular mycorrhizal fungus is selected from the fungal phylum Glomeromycota, ที่รวมถึง all classes (currently Glomeromycetes), orders (currently Parag/omerales, Archaeospora/es, Diversispora/es, Glomerales), families, genera and species in the phylum Glomeromycota.


9. The method of any of ข้อถือสิทธิ 1-8, โดยที่ the root material is derived from a plant selected from the group of chicory, clover, carrot, cucumber, potato, soybean, haricot bean, ginger, kalanchoe, strawberry or bindweed.


10. The method of any one of ข้อถือสิทธิ 1-9, โดยที่ the root material is transformed with
T-DNA.


11. The method of ข้อถือสิทธิ 10, โดยที่ said T-DNA is derived from Agrobacterium.
12. The method of any one of ข้อถือสิทธิ 1-11, โดยที่ the liquid medium is supplemented with plant hormones and/or vitamins.


13. The method of any one of ข้อถือสิทธิ 1-12, โดยที่ the liquid medium further contains

antibiotics


14. A contamination-free arbuscular mycorrhizal inoculum composition produced under sterile conditions by the method of any one of ข้อถือสิทธิ 1-13, ซึ่งประกอบรวมด้วย arbuscular mycorrhizal fungi propagules in a particle size in the range down to 30 µm and propagule densities of up to more than 106 arbuscular mycorrhizal fungi propagules per gram dry mass of root material.


15. A bioreactor for continuous in vitro cultivation of arbuscular mycorrhizal fungi, ซึ่งประกอบรวมด้วย
a. root material capable of building a branched secondary root system inoculated with and colonized by arbuscular mycorrhizal fungi as defined in ข้อถือสิทธิ 8;
b. and liquid culture medium of any one of ข้อถือสิทธิ 5-7 or 12.


16. Use of root material that is capable of building a branched secondary root system in vitro for continuously producing arbuscular mycorrhizal fungi material in liquid culture medium.
ABSTRACT


(129] The การประดิษฐ์นี้ relates to a method and a system for the production of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF). More specifically, the การประดิษฐ์ described herein relates to a method and a system for the continuous in vitro culture of arbuscular mycorrhizal fungi, ที่ควรใช้คือ ที่รวมถึง steps of harvesting and/or passaging. Further, the การประดิษฐ์ relates to culture conditions suitable for said continuous cultivation method and system. Another aspect of the การประดิษฐ์ is a sterile inoculum ซึ่งประกอบรวมด้วย AMF-colonized root material and other propagules, like AMF spores. Yet another aspect of the การประดิษฐ์ relates to the use of AMF-colonized root material for continuous production of arbuscular mycorrhizal fungi material in liquid culture medium.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ระบบและวิธีการเผยแพร่อย่างต่อเนื่องและผลิตเชื้อ MYCORRHIZAL ARBUSCULAR ในวัฒนธรรมของเหลวข้อถือสิทธิ1. วิธีการผลิตซึ่งประกอบรวมด้วย arbuscular mycorrhizal เชื้อวิธีการวัสดุ กล่าวว่า:a. เนื่อง culturing วัสดุรากในวัฒนธรรมเหลว โดยที่กล่าวว่าเป็นวัสดุหลักเพิ่มความสามารถในการสร้างระบบรากแขนงการรองในหลอดทดลอง และ ii อาณานิคม arbuscular mycorrhizal เชื้อ2. วิธีการข้อถือสิทธิ 1 ไปซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนเกี่ยวน้อยส่วนของวัสดุดังกล่าวรากอาณานิคมว่า arbuscular mycorrhizal เชื้อ3. วิธีการข้อถือสิทธิ 1 หรือ 2 การซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนของ passaging น้อยส่วนของวัสดุดังกล่าวรากยึดครองหวงปานกลางวัฒนธรรมสด4. วิธีการของข้อถือสิทธิ 1-3 โดยที่น้อยส่วนวัสดุรากยึดครองหวงใช้เป็น inoculum5. วิธีการของข้อถือสิทธิ 2-4 โดยที่ขั้นตอนการ passaging สามารถนำขั้นตอนการเก็บเกี่ยว6. วิธีการของข้อถือสิทธิ 1-5 โดยที่กล่าวว่า วัฒนธรรมเหลวประกอบด้วย 30 µMหรือฟอสเฟตน้อยกว่าในระยะ culturing7. วิธีการของข้อถือสิทธิ 1-6 โดยที่ว่า เหลวประกอบด้วย 20 มม.แอมโมเนีย หรือน้อยกว่าในระยะ culturing8. วิธีการใด ๆ โดยที่ 1-7 ข้อถือสิทธิเลือกเชื้อรา mycorrhizal arbuscular จากไฟลัมรา Glomeromycota ที่รวมถึงทุกชั้น (ปัจจุบัน Glomeromycetes), ใบสั่ง (ปัจจุบัน Parag omerales, Archaeospora/es, Diversispora/es, Glomerales), ครอบครัว สกุล และชนิดในไฟลัม Glomeromycotaเลือกวิธีการของข้อถือสิทธิ 1-8 โดยที่วัสดุหลักมาจากพืชจากกลุ่มของกาด โคลเวอร์ แครอท แตงกวา มันฝรั่ง ถั่วเหลือง ถั่ว haricot ขิง ไร kalanchoe สตรอเบอร์รี่ หรือ bindweed10. วิธีการหนึ่งข้อถือสิทธิ 1-9 โดยที่วัสดุรากแก่นด้วยT-ดีเอ็นเอ11. วิธีการข้อถือสิทธิ 10 โดยที่กล่าวว่า T-ดีเอ็นเอมาอโกรแบคทีเรียม 12. วิธีการหนึ่งข้อถือสิทธิ 1-11 โดยที่ขนาดกลางของเหลวที่เสริม ด้วยวิตามินหรือฮอร์โมนพืช13. วิธีการหนึ่งข้อถือสิทธิ 1-12 โดยที่ขนาดกลางของเหลวเพิ่มเติมประกอบด้วยยาปฏิชีวนะ14. การประพันธ์ mycorrhizal inoculum arbuscular ปราศจากการปนเปื้อนที่ผลิตภายใต้สภาพปลอดเชื้อ โดยวิธีการของข้อถือสิทธิ 1-13 ซึ่งประกอบรวมด้วย arbuscular เชื้อ mycorrhizal propagules ขนาดอนุภาคในช่วงลงไป 30 µm และ propagule ความหนาแน่นของถึง propagules เชื้อ mycorrhizal arbuscular กว่า 106 ต่อกรัมแห้งมวลวัสดุราก15.ถังปฏิกรณ์ชีวภาพสำหรับปลูกในหลอดทดลองต่อเนื่อง arbuscular mycorrhizal เชื้อ ซึ่งประกอบรวมด้วยก.หลักความสามารถในการสร้างระบบรากแขนงรอง inoculated ด้วย และอาณานิคม arbuscular mycorrhizal เชื้อตามที่กำหนดในข้อถือสิทธิ 8b. และวัฒนธรรมขนาดกลางของเหลวหนึ่งข้อถือสิทธิ 5-7 หรือ 1216. การใช้วัสดุหลักที่สามารถสร้างเป็นแขนงรองระบบรากในหลอดทดลองอย่างต่อเนื่องผลิตวัสดุเชื้อ mycorrhizal arbuscular ในวัฒนธรรมของเหลว บทคัดย่อ(129] การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับวิธีและระบบในการผลิตเชื้อรา mycorrhizal arbuscular (AMF) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับวิธีการและระบบวัฒนธรรมในหลอดทดลองต่อเนื่องเชื้อ mycorrhizal arbuscular ที่ควรใช้คือที่รวมถึงตอนเก็บเกี่ยว หรือ passaging เพิ่มเติม การประดิษฐ์เกี่ยวข้องกับวัฒนธรรมเงื่อนไขเหมาะสมกับระบบและวิธีการเพาะปลูกอย่างต่อเนื่องดังกล่าว อีกด้านของการประดิษฐ์คือ ซึ่งประกอบรวมด้วย inoculum ผ่านการฆ่าเชื้อวัสดุราก AMF colonized และ propagules อื่น ๆ เช่นรา AMF ยัง อีกด้านของการประดิษฐ์เกี่ยวข้องกับการใช้ราก AMF colonized วัสดุสำหรับผลิตวัสดุเชื้อ mycorrhizal arbuscular ในเหลววัฒนธรรมอย่างต่อเนื่อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ระบบและวิธีการอย่างต่อเนื่องขยายพันธุ์และการผลิตโดยรวมของ arbuscular mycorrhizal เชื้อราอาหารเหลว
ข้อถือสิทธิ1 วิธีการในการผลิตวัสดุเชื้อรา Arbuscular mycorrhizal กล่าวว่าวิธีการซึ่งประกอบรวมด้วย: อย่างต่อเนื่องเลี้ยงวัสดุรากในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลวโดยที่กล่าวว่าวัสดุที่เป็นรากผม ความสามารถในการสร้างระบบรากกิ่งรองในหลอดทดลองและครั้งที่สอง อาณานิคมโดยเชื้อรา Arbuscular. 2 วิธีการข้อถือสิทธิ 1 ต่อไปซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนของการเก็บเกี่ยวอย่างน้อยส่วนหนึ่งของการกล่าวว่าวัสดุที่รากอาณานิคมโดยกล่าวว่า Arbuscular เชื้อราได้. 3 วิธีการข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 2 ต่อไปซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนของ passaging อย่างน้อยส่วนหนึ่งของการเก็บเกี่ยวกล่าวว่าวัสดุที่รากอาณานิคมกลางวัฒนธรรมสดที่. 4 วิธีการใด ๆ ของข้อถือสิทธิที่ 1-3 โดยที่อย่างน้อยในส่วนของวัสดุที่รากเก็บเกี่ยวอาณานิคมถูกนำมาใช้เป็นหัวเชื้อ. 5 วิธีการใด ๆ ของข้อถือสิทธิที่ 2-4 โดยที่ขั้นตอน passaging สามารถนำหน้าขั้นตอนการเก็บเกี่ยว. 6 วิธีการใด ๆ ของข้อถือสิทธิ 1-5, โดยที่กล่าวว่าอาหารเลี้ยงเชื้อของเหลวบรรจุ 30 ไมครอนหรือฟอสเฟตน้อยลงในช่วงใด ๆ ของขั้นตอนการเพาะเลี้ยงได้. 7 วิธีการใด ๆ ของข้อถือสิทธิ 1-6, โดยที่กล่าวว่าอาหารเหลวมี 20 มิลลิเมตรแอมโมเนียมหรือน้อยลงในช่วงใด ๆ ของขั้นตอนการเพาะเลี้ยงได้. 8 วิธีการใด ๆ ข้อถือสิทธิที่ 1-7 โดยที่เชื้อราไมคอไรซา Arbuscular ถูกเลือกจากประเภทเชื้อรา Glomeromycota, ที่รวมถึงทุกชั้น (ปัจจุบัน Glomeromycetes) คำสั่งซื้อ (ปัจจุบัน Parag / omerales, Archaeospora / E, Diversispora / E, Glomerales) ครอบครัวจำพวกและสายพันธุ์ในไฟลัม Glomeromycota. 9 วิธีการใด ๆ ของข้อถือสิทธิ 1-8 โดยที่วัสดุรากมาจากพืชที่เลือกจากกลุ่มสีน้ำเงิน Clover, แครอท, แตงกวา, มันฝรั่ง, ถั่วเหลือง, ถั่วถั่วขิง Kalanchoe สตรอเบอร์รี่หรือ bindweed 10 วิธีการของหนึ่งในข้อถือสิทธิ 1-9 ใด ๆ โดยที่วัสดุที่รากจะเปลี่ยนกับT-DNA. 11 วิธีการของข้อถือสิทธิ 10 โดยที่กล่าวว่า T-DNA มาจาก Agrobacterium. 12 วิธีการของหนึ่งในข้อถือสิทธิ 1-11 ใด ๆ โดยที่อาหารเหลวเสริมด้วยฮอร์โมนพืชและ / หรือวิตามิน. 13 วิธีการของหนึ่งในข้อถือสิทธิ 1-12 ใด ๆ โดยที่อาหารเหลวต่อไปมียาปฏิชีวนะ14 ปนเปื้อนฟรี Arbuscular mycorrhizal องค์ประกอบหัวเชื้อผลิตภายใต้สภาพปลอดเชื้อโดยวิธีการหนึ่งในข้อถือสิทธิ 1-13 ใด ๆ ซึ่งประกอบรวมด้วย Arbuscular propagules เชื้อราในขนาดอนุภาคในช่วงลงไป 30 ไมโครเมตรและมีความหนาแน่นของ propagule ขึ้น ให้มากขึ้นกว่า 106 Arbuscular propagules เชื้อราต่อกรัมมวลแห้งของวัสดุที่ราก. 15 เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพสำหรับการเพาะปลูกอย่างต่อเนื่องในหลอดทดลองของเชื้อรา Arbuscular, ซึ่งประกอบรวมด้วย รากที่มีความสามารถในการสร้างระบบรากแขนงรองเชื้อด้วยและอาณานิคมโดยเชื้อรา Arbuscular ที่กำหนดไว้ในข้อถือสิทธิ 8 วัสดุB กลางและวัฒนธรรมของเหลวของหนึ่งในสิทธิข้อถือ 5-7 หรือ 12. ใด ๆ16 การใช้วัสดุหลักที่มีความสามารถในการสร้างระบบรากกิ่งรองในหลอดทดลองอย่างต่อเนื่องสำหรับการผลิตวัสดุเชื้อรา Arbuscular mycorrhizal ในสื่อวัฒนธรรมของเหลว. บทคัดย่อ(129] ในการประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับวิธีการและระบบการผลิตเชื้อรา Arbuscular ที่ (AMF). โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการประดิษฐ์ที่อธิบายไว้ในเอกสารฉบับนี้เกี่ยวข้องกับวิธีการและระบบวัฒนธรรมอย่างต่อเนื่องในหลอดทดลองของเชื้อรา Arbuscular, ที่ควรใช้คือที่รวมถึงขั้นตอนของการเก็บเกี่ยวและ / หรือ passaging. นอกจากนี้การที่ประดิษฐ์ ที่เกี่ยวข้องกับสภาพวัฒนธรรมที่เหมาะสมสำหรับการกล่าวว่าวิธีการเพาะปลูกอย่างต่อเนื่องและระบบ. ด้านของผู้อื่นการประดิษฐ์เป็นหัวเชื้อผ่านการฆ่าเชื้อซึ่งประกอบรวมด้วย AMF-อาณานิคมวัสดุรากและ propagules อื่น ๆ เช่นสปอร์สารเลว. แต่ทุกแง่มุมของการประดิษฐ์อื่นที่เกี่ยวข้องกับ การใช้วัสดุราก AMF-อาณานิคมสำหรับการผลิตอย่างต่อเนื่องของวัสดุเชื้อรา Arbuscular mycorrhizal ในสื่อวัฒนธรรมของเหลว