Microbiologic InvestigationRNA was

Microbiologic Investigation
RNA was extracted from 10 mg of the placenta,
lungs, heart, skin, spleen, thymus, liver, kidneys,
and cerebral cortex with the use of a TRIzol Plus
RNA purification kit (Thermo Fisher Scientific).
Real-time RT-PCR for the detection of ZIKV RNA
(NS5) and one-step RT-PCR for the detection of
the envelope-protein coding region (360 bp) were
performed as described previously.7,8 In addition,
next-generation sequencing was performed in
samples of fetal brain tissue with the use of Ion
Torrent (Thermo Fisher Scientific) and Geneious
software, version 9.0.6. Reads from both runs
were combined and mapped to the reference
sequence (ZIKV MR766; LC002520) with the use
of default measures. For phylogenetic analysis, complete-genome ZIKV sequences were used, and
multiple sequence alignments (ClustalW) were
performed. A neighbor-joining phylogenetic tree
(GTR+G+I model) was constructed, with the use
of the MEGA6 software system,9 to show the
phylogenetic relationships. The nucleotide sequence
of ZIKV that was obtained in this study
has been deposited in GenBank under accession
number KU527068. A detailed description of the
molecular methods is provided in the Supplementary
Appendix, available with the full text of
this article at NEJM.org. The results of comprehensive
serologic analyses of maternal serum
and a description of the molecular differential
diagnostic procedures used with fetal tissue
samples are provided in Tables S1 and S2 in the
Supplementary Appendix. All the authors vouch
for the completeness and accuracy of the data
and analyses presented.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจสอบ microbiologicRNA ถูกสกัดมาจากรก 10 มิลลิกรัมปอด หัวใจ ผิวหนัง ม้าม ต่อมไทมัส ตับ ไตและสมอง ด้วยการใช้ TRIzol บวกอาร์เอ็นเอบริสุทธิ์ชุด (เทอร์โม Fisher วิทยาศาสตร์)แบบเรียลไทม์ RT-PCR สำหรับตรวจหา ZIKV RNA(NS5) และเสมอ RT-PCR สำหรับตรวจหาภูมิภาครหัสโปรตีนซองจดหมาย (360 bp) ได้ดำเนินการเป็น previously.7,8 อธิบายนอกจากนี้ดำเนินการในลำดับรุ่นต่อไปตัวอย่างของเนื้อเยื่อสมองของทารกในครรภ์ มีการใช้ไอออนฝนตกหนัก (เทอร์โมวิทยาศาสตร์ Fisher) และ Geneiousซอฟต์แวร์ รุ่น 9.0.6 อ่านจากทั้งหมดรวม และแมปกับการอ้างอิงลำดับ (ZIKV MR766 LC002520) ด้วยการใช้มาตรการเริ่มต้น สำหรับการวิเคราะห์ผล ลำดับจีโนมที่สมบูรณ์ ZIKV ใช้ และมีหลายลำดับจัด (ClustalW)การดำเนินการ ต้นไม้ทางเพื่อนบ้านเข้าร่วม(รุ่น GTR + G + I) สร้างขึ้น มีการใช้MEGA6 ซอฟต์แวร์ระบบ 9 เพื่อแสดงการความสัมพันธ์ทาง ลำดับนิวคลีโอไทด์ของ ZIKV ที่ได้รับในการศึกษานี้ได้รับฝากไว้ใน GenBank ใต้ภาคยานุวัติหมายเลข KU527068 คำอธิบายโดยละเอียดของการวิธีโมเลกุลเข้าตีนจกมีข้อความเต็มของ ภาคผนวกบทความนี้ที่ NEJM.org ครอบคลุมผลการการวิเคราะห์แอนติเจนของซีรั่มมารดาและคำอธิบายของค่าต่างระดับโมเลกุลใช้กับเนื้อเยื่อทารกตรวจวินิจฉัยที่มีให้ในตาราง S1 และ S2 ในตัวภาคผนวกเสริม ผู้เขียนรับรองถึงสอบความถูกต้องของข้อมูลและการวิเคราะห์ที่นำเสนอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุลชีววิทยาสืบสวน
RNA ถูกสกัดจาก 10 มิลลิกรัมของรก,
ปอด, หัวใจ, ผิวหนังม้ามไธมัส, ตับ, ไต
และเยื่อหุ้มสมองสมองที่มีการใช้ Trizol พลัส
อาร์เอ็นเอบริสุทธิ์ Kit (Thermo Fisher Scientific).
แบบ Real-time RT- PCR ในการตรวจหา ZIKV อาร์เอ็นเอ
(NS5) และขั้นตอนเดียว-RT-PCR สำหรับการตรวจสอบของ
ซองโปรตีนภูมิภาคเข้ารหัส (360 BP) ได้รับการ
ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ใน previously.7,8 นอกจากนี้
รุ่นต่อไปลำดับที่ได้ดำเนินการใน
ตัวอย่างของเนื้อเยื่อสมองของทารกในครรภ์ที่มีการใช้ไอออน
Torrent (Thermo Fisher Scientific) และ Geneious
ซอฟแวร์เวอร์ชั่น 9.0.6 อ่านจากทั้งสองวิ่ง
มารวมกันและแมปไปอ้างอิง
ลำดับ (ZIKV MR766; LC002520) กับการใช้งาน
ของมาตรการการเริ่มต้น สำหรับการวิเคราะห์สายวิวัฒนาการที่สมบูรณ์จีโนมลำดับ ZIKV ถูกนำมาใช้และ
หลายการจัดแนวลำดับ (ClustalW) ได้รับการ
ดำเนินการ เพื่อนบ้านเข้าสู่ต้นไม้สายวิวัฒนาการ
(GTR + G + I Model) ถูกสร้างขึ้นด้วยการใช้งาน
ของระบบซอฟแวร์ MEGA6, 9 เพื่อแสดง
ความสัมพันธ์ phylogenetic ลำดับเบส
ของ ZIKV ที่ได้รับในการศึกษาครั้งนี้
ได้รับการฝากใน GenBank ภายใต้การภาคยานุวัติ
จำนวน KU527068 คำอธิบายรายละเอียดของ
วิธีการโมเลกุลให้ไว้ในเสริม
ภาคผนวกที่สามารถใช้ได้กับเนื้อหาเต็มของ
บทความนี้ที่ NEJM.org ผลของการที่ครอบคลุม
เรื่องเซรุ่มวิเคราะห์ของซีรั่มของมารดา
และคำอธิบายของโมเลกุลที่แตกต่างกัน
ขั้นตอนการวินิจฉัยใช้กับเนื้อเยื่อของทารกในครรภ์
ตัวอย่างได้แสดงไว้ในตาราง S1 และ S2 ใน
เสริมภาคผนวก ผู้เขียนทั้งหมดรับรอง
ความครบถ้วนและความถูกต้องของข้อมูล
และการวิเคราะห์ที่นำเสนอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสอบสวนเกี่ยวกับ microbiologyซึ่งสกัดจาก 10 มิลลิกรัม รกปอด หัวใจ ผิวหนัง ม้าม ต่อมไทมัส ตับ ไตซีรีบรัล คอร์เท็กซ์ และมีใช้ใน trizol พลัสชุดบำบัดน้ำเสีย อาร์เอ็นเอ ( เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ )4 . เวลาจริงสำหรับการตรวจสอบ zikv .( NS5 ) และ Real-Time RT-PCR เพื่อตรวจหาซองจดหมายโปรตีนเขตนะครับ ( 360 BP ) ได้แก่ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ . 7 , 8 นอกจากนี้การกระทำในรุ่นต่อไปตัวอย่างเนื้อเยื่อสมองของทารกในครรภ์ด้วยการใช้ไอออนฝนตกหนัก ( เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ ) และ geneiousซอฟต์แวร์ รุ่น 9.0.6 . อ่านทั้งหมดถูกรวมและแมปไปอ้างอิงลำดับ ( zikv mr766 ; lc002520 ) ด้วยการใช้โดยค่าเริ่มต้น สำหรับการวิเคราะห์การยืนยันลำดับจีโนมที่สมบูรณ์ zikv ใช้และการลำดับหลาย ( clustalw ) ได้แก่แสดง เพื่อนบ้านร่วม phylogenetic ต้นไม้( GTR + G + I Model ) ที่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้ระบบซอฟต์แวร์ mega6 , 9 เพื่อแสดงความสัมพันธ์ของสิ่งมีชีวิตชนิดต่างๆ . การลำดับนิวคลีโอไทด์ของ zikv ที่ได้ในการศึกษานี้ได้รับเงินในการพบภายใต้หมายเลข ku527068 . รายละเอียดของวิธีการที่ระบุไว้ในแบบโมเลกุลภาคผนวก , ใช้ได้กับข้อความเต็มของบทความนี้ใน nejm.org . ผลอย่างละเอียดtest แต่ต้นทุนวิเคราะห์ซีรั่มของมารดาและรายละเอียดของความแตกต่างของโมเลกุลขั้นตอนการวินิจฉัยที่ใช้กับเนื้อเยื่อของทารกในครรภ์ตัวอย่างที่ให้ไว้ในตาราง S1 และ S2 ในเพิ่มเติมภาคผนวก ผู้เขียนทั้งหมด ยืนยันเพื่อความสมบูรณ์และความถูกต้องของข้อมูลวิเคราะห์และนำเสนอ