Specificity appears to be harder to

Specificity appears to be harder to change than mechanism
through site-directed mutagenesis. However, a recent
paper shows a double mutant of the xylanase 10A from
Pseudomonas cellulosa with significantly improved specificity
for the hydrolysis of glucose-derived substrates compared
with that of their xylose equivalents [47•]. Success in
changing specificity has also been achieved in the absenceof
structural information by using directed molecular evolution,
involving multiple rounds of mutagenesis,
functional screening, and amplification. An excellent
example of this has been provided by Zhang et al. [48]
using PCR-based DNA shuffling. After seven rounds of
shuffling, a 1000-fold increase in the specificity for a chromogenic
fucoside substrate over that for a galactoside was
obtained using the Escherichia coli (lacZ) -galactosidase.
Although the bulk of the specificity change was effected
through a destruction of galactosidase activity, there was a
significant (10- to 20-fold) increase in fucosidase activity.
Useful changes in glycosidase specificity through directed
molecular evolution should be expected in the next few
years given the relative ease of screening these enzymes
and the large number of families known.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Specificity ดูเหมือนจะ เป็นหนักเมื่อกว่ากลไกผ่าน mutagenesis ไซต์โดยตรง อย่างไรก็ตาม การล่าสุดกระดาษแสดง mutant คู่ของไซลาเนส 10A จากCellulosa ลี มี specificity ดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญสำหรับไฮโตรไลซ์ของพื้นผิวน้ำตาลกลูโคสมาเปรียบเทียบที่เทียบเท่าของ xylose [47•] ความสำเร็จในเปลี่ยน specificity นอกจากนี้ยังได้รับความใน absenceof ข้อมูลโครงสร้างโดยตรงวิวัฒนาการระดับโมเลกุลเกี่ยวข้องกับหลายรอบ mutagenesisตรวจการทำงาน และขยาย ที่ดีเยี่ยมเช่นมีการให้โดย Zhang et al. [48]ใช้สลับใช้ PCR ดีเอ็นเอ หลังจากรอบที่เจ็ดสลับ เพิ่ม 1000-fold ใน specificity สำหรับการ chromogenicfucoside พื้นผิวที่มากกว่าสำหรับ galactoside ถูกรับใช้ Escherichia coli (lacZ) -galactosidaseถึงแม้ว่าจำนวนมากของ specificity การเปลี่ยนแปลง มีผลผ่านทำลายกิจกรรม galactosidase มีการอย่างมีนัยสำคัญ (10-การ 20-fold) เพิ่มในกิจกรรม fucosidaseเปลี่ยนแปลงประโยชน์ specificity glycosidase ผ่านโดยตรงวิวัฒนาการระดับโมเลกุลควรคาดหวังในสิ่งต่อไปปีที่ได้รับการคัดกรองเอนไซม์เหล่านี้ได้อย่างง่ายดายญาติและชื่อเสียงของครอบครัว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพาะดูเหมือนจะยากที่จะเปลี่ยนมากกว่ากลไก
ผ่านเว็บไซต์โดยตรงของ . อย่างไรก็ตาม รายงานล่าสุด
แสดงคู่ของเอนไซม์กลายพันธุ์กลับจาก Pseudomonas cellulosa ที่มีการปรับปรุงอย่างมากต่อ

สำหรับการย่อยสลายกลูโคสที่ได้มาเมื่อเทียบกับที่ของพวกเขาเทียบเท่า 6
- [ 47 ] ความสำเร็จใน
เปลี่ยนเฉพาะเจาะจงยังได้รับการประสบความสำเร็จใน absenceof
โครงสร้างข้อมูลโดยใช้กำกับวิวัฒนาการระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับหลายรอบ

การคัดกรอง , การทำงาน , และขยาย . ตัวอย่างที่ดีของนี้
ได้รับให้โดย Zhang et al . [ 48 ]
ใช้ PCR DNA สับไพ่ตาม หลังจากเจ็ดรอบ
สับ , 1000 พับเพิ่มความจำเพาะสำหรับการสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันที
fucoside พื้นผิวที่เป็น galactoside คือ
ได้รับใช้เชื้อ Escherichia coli ( lacz )  - galactosidase
ถึงแม้ว่าเป็นกลุ่มของเปลี่ยนความจำมีผลต่อ
ผ่านทำลายกิจกรรม galactosidase มี
) ( 10 - 20 เท่า ) เพิ่มกิจกรรม fucosidase .
มีประโยชน์ในการตรวจหาทางที่ไกลโคซิเดส
วิวัฒนาการโมเลกุลควรจะคาดว่าในไม่กี่ปีถัดไปให้ความสะดวกญาติ

และคัดกรองเอนไซม์เหล่านี้จำนวนมากของครอบครัวที่รู้จักกัน

.