Restriction Fragment Length Polymor

Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) Analysis


The genetic variability at a particular locus (gene) due to even minor base changes can alter the pattern of restriction enzyme digestion fragments that can be generated. Pathogenic alterations to the genotypic can be due to deletions or insertions within the gene being analyzed or even single nucleotide substitutions that can create or delete a restriction enzyme recognition site. RFLP analysis takes advantage of this and utilizes Southern blotting of restriction enzyme digested genomic DNA to detect familial patterns of the fragments of a given gene, detectable by screening the Southern blot with a probe corresponding to the gene of interest. A classic example of a disease detectable by RFLP is sickle cell anemia.
Sickle cell anemia results (at the level of the gene) from a single nucleotide change (A --> T) at codon 6 within the b-globin gene. This alteration leads to a glu ----> val amino acid substitution, while at the same time abolishing a MstII restriction site. As a result a b-globin gene probe can be used to detect the different MstII restriction fragments. It should be recalled that there are two copies of each gene in all human cells, therefore, RFLP analysis detects both copies: the affected alelle and the unaffected allele.
Size variability in detectable fragments within a family pedigree indicate differences in the pattern of restriction sites within and around the gene being analyzed. RFLP patterns are inherited and segregate in Mendelian fashion thus, allowing their use in genotyping such as in cases of paternity dispute or in criminal investigations.
Another form of DNA polymorphism detectable by classical RFLP mapping results from the inherited variations in the number of tandemly repeated DNA sequence elements that are from 2 to 60 bp in length. The number of repeats is also variable from 2 to 40 copies. These elements are termed variable number tandem repeats (VNTRs). When restriction enzyme digestion cuts DNA flanking the VNTRs, the lengths of the resultant fragments will be variable depending upon the number of repeats at a given locus. Many different VNTR loci have been identified and are extremely useful for DNA fingerprint analysis such as in forensic and paternity identity cases.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ข้อ จำกัด ความยาวส่วน Polymorphism (RFLP) วิเคราะห์แปรปรวนทางพันธุกรรมในสถานที่โดยเฉพาะอย่างยิ่ง(ยีน) เนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงฐานเล็กน้อยยังสามารถปรับเปลี่ยนรูปแบบของชิ้นส่วนการย่อยอาหารเอนไซม์ จำกัด ที่สามารถสร้าง การเปลี่ยนแปลงที่ทำให้เกิดโรคทางพันธุกรรมที่จะสามารถจะเกิดจากการลบหรือแทรกภายในยีนการวิเคราะห์หรือแม้กระทั่งการแทนเบื่อหน่ายเดียวที่สามารถสร้างหรือลบเว็บไซต์การรับรู้การทำงานของเอนไซม์ข้อ จำกัด การวิเคราะห์ RFLP ใช้ประโยชน์จากนี้และใช้ซับใต้ข้อ จำกัด การทำงานของเอนไซม์ย่อยดีเอ็นเอในการตรวจสอบรูปแบบครอบครัวของชิ้นส่วนของยีนที่กำหนดตรวจพบโดยการคัดกรอง blot ภาคใต้ที่มีการสอบสวนที่เกี่ยวข้องกับยีนที่น่าสนใจที่ ตัวอย่างคลาสสิกของโรคที่ตรวจพบโดย RFLP เป็นโรคโลหิตจางเซลล์เคียว. เคียวผลเซลล์โลหิตจาง (ในระดับของยีน) จากการเปลี่ยนแปลงเดี่ยวเบื่อหน่าย (A -> T) ที่ codon 6 ภายในยีน B-โกลบิน การเปลี่ยนแปลงนี้นำไปสู่ ​​Glu ----> วาลทดแทนกรดอะมิโนในขณะที่ในเวลาเดียวกันการยกเลิกข้อ จำกัด เว็บไซต์ MstII อันเป็นผลมาจากการสอบสวนของยีน B-โกลบินสามารถนำมาใช้ในการตรวจสอบชิ้นส่วน MstII ข้อ จำกัด ที่แตกต่างกัน มันควรจะเรียกว่ามีสองสำเนาของแต่ละยีนในเซลล์ของมนุษย์จึงวิเคราะห์ RFLP ตรวจพบสำเนาทั้งสอง. the alelle รับผลกระทบและอัลลีลได้รับผลกระทบความแปรปรวนขนาดในชิ้นส่วนที่ตรวจพบภายในสายเลือดครอบครัวบ่งบอกถึงความแตกต่างในรูปแบบของเว็บไซต์ที่จำกัด ภายในและรอบ ๆ ยีนการวิเคราะห์ รูปแบบ RFLP จะสืบทอดและแยกในแฟชั่นเมนเดลจึงช่วยให้การใช้งานของพวกเขาใน genotyping เช่นในกรณีที่มีข้อพิพาทเป็นพ่อแม่ลูกหรือในการสืบสวนทางอาญา. รูปแบบของความแตกต่างดีเอ็นเออีกที่ตรวจพบโดยผลการทำแผนที่ RFLP คลาสสิกจากรูปแบบที่ได้รับการถ่ายทอดในจำนวนของ tandemly ซ้ำดีเอ็นเอ องค์ประกอบลำดับที่ 2-60 bp ยาว จำนวนซ้ำยังเป็นตัวแปร 2-40 สำเนา องค์ประกอบเหล่านี้จะเรียกว่าจำนวนตัวแปรซ้ำควบคู่ (VNTRs) เมื่อตัดการย่อยอาหารเอนไซม์ จำกัด ดีเอ็นเอขนาบ VNTRs ที่ความยาวของชิ้นส่วนผลจะเป็นตัวแปรขึ้นอยู่กับจำนวนซ้ำที่สถานที่ที่กำหนด หลายตำแหน่ง VNTR ที่แตกต่างกันได้รับการระบุและมีประโยชน์อย่างมากสำหรับการวิเคราะห์ลายนิ้วมือดีเอ็นเอเช่นในทางนิติเวชและพ่อกรณีตัวตน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จำกัด fragment length polymorphism ( RFLP ) การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางพันธุกรรม

ในสถานที่เฉพาะ ( ยีน ) เนื่องจากแม้การเปลี่ยนแปลงฐานรองสามารถเปลี่ยนรูปแบบของเอนไซม์ย่อยสลายเศษที่สามารถสร้างเชื้อโรคเปลี่ยนแปลงไปในทางพันธุกรรมได้เนื่องจากการลบหรือแทรกภายในยีนถูกวิเคราะห์ หรือแม้แต่ยีนเดี่ยวแทน ที่สามารถสร้าง หรือลบข้อ จำกัด ของการรับรู้ของเว็บไซต์ ใช้ประโยชน์จากการวิเคราะห์ RFLP และใช้เอนไซม์ย่อยโปรตีนของภาคใต้จำกัดดีเอ็นเอเพื่อตรวจสอบรูปแบบครอบครัวของชิ้นส่วนของยีนที่กำหนด ,สามารถคัดกรองเปรอะเปื้อนภาคใต้กับการสอบสวนที่สอดคล้องกับยีนที่น่าสนใจ ตัวอย่างคลาสสิกของโรคโดยตรวจพบการติดเชื้อโรคโลหิตจางเซลล์เคียว .
ผลโรคโลหิตจางเซลล์เคียว ( ในระดับของยีน ) จากการเปลี่ยนแปลงนิวคลีโอไทด์เดี่ยว ( -- > T ) ที่โคดอน 6 ภายใน b-globin ยีน การเปลี่ยนแปลงนี้จะนำไปสู่ GLU ---- > วาลกรดอะมิโนทดแทน ,ในขณะที่ในเวลาเดียวกันมี mstii ยกเลิกข้อ จำกัด เว็บไซต์ เป็นผล b-globin ยีน Probe สามารถใช้ตรวจสอบที่แตกต่างกัน mstii จำกัดเอนไซม์ มันควรจะเรียกว่ามีสองชุดของแต่ละยีนในเซลล์มนุษย์ ทั้งหมด ดังนั้น การวิเคราะห์ RFLP ที่ตรวจพบทั้งชุด : ผลกระทบ alelle และอัลลีล
เลยขนาดของความผันแปรในเศษได้ภายในฐานะของครอบครัว พบความแตกต่างในรูปแบบของเว็บไซต์และข้อ จำกัด ภายในรอบของการวิเคราะห์ แบบแผน RFLP จะสืบทอดและแยกในแฟชั่นเมนเดลจึงช่วยให้การใช้งานของพวกเขาในการอ่าน เช่น ในกรณีของบิดาที่เป็นข้อพิพาท หรือในการตรวจสอบความผิดทางอาญา
อีกรูปแบบหนึ่งของรูปแบบดีเอ็นเอที่ตรวจพบโดยผลการทำแผนที่ RFLP คลาสสิกจากการสืบทอดการเปลี่ยนแปลงจำนวนของ tandemly ดีเอ็นเอลำดับซ้ำองค์ประกอบที่ 2 ถึง 60 BP ในความยาว จํานวนซ้ำยังมีตัวแปรตั้งแต่ 2 ถึง 40 ฉบับ องค์ประกอบเหล่านี้จะเรียกว่าหมายเลขตัวแปรตีคู่ซ้ำ ( vntrs ) เมื่อเอนไซม์ย่อยอาหารการตัดดีเอ็นเอ vntrs จ ,ความยาวของชิ้นส่วนดังกล่าวจะเป็นตัวแปรที่ขึ้นอยู่กับจำนวนซ้ำที่ได้รับความเชื่อ . ตำแหน่ง vntr แตกต่างกันมาก มีการระบุ และเป็นประโยชน์อย่างมาก เช่นในการวิเคราะห์ดีเอ็นเอลายนิ้วมือนิติวิทยาศาสตร์และกรณีความเป็นตัวตน