In Thailand, several PCR-based meth

In Thailand, several PCR-based methods are used by private and public service laboratories for the detection of white spot
syndrome virus (WSSV) infection in penaeid shrimp post larvae (PL) before they are stocked in rearing ponds. Conflicting test
results for similar samples sent to two service laboratories has decreased confidence in PCR testing. Thus, we compared the
sensitivity of several PCR methods commonly employed in Thailand using Taqman real-time PCR as the gold standard with a
purified WSSV template stock. Using this stock for assays, we found no significant inhibitory effect by WSSV-free host shrimp
DNA over the range 0 to 300 ng per reaction or by added DNA from WSSV-infected shrimp. Real-time PCR could detect WSSV
with certainty at dilutions of approximately 5 copies per reaction while 1000 copies were needed for a common one-step PCR
method and 50 for a common single-tube nested PCR (1N-PCR) method. Of 2 two-tube nested PCR protocols tested, one required
100 and the other 1000 copies. In addition to these sensitivity tests, a triple-blind ring test was carried out employing sets of 10
WSSV-infected DNA extracts sent to 12 commercial and public laboratories in Thailand, without specifying the PCR method to be
used. Returned results included no false positives and two false negatives, the latter both from light infection vials. This translated
into a test sensitivity of 97.3% and a specificity of 100%. Overall, the results confirmed the validity of PCR-based methods in
Thailand for detection of WSSV in shrimp DNA extracts.
© 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.
Keywords: PCR-based methods; White spot syndrome virus (WSSV) infection; Penaeus monodon

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในประเทศไทย หลายผลใช้วิธีการส่วนตัวและห้องปฏิบัติราชการตรวจจุดสีขาวกลุ่มอาการติดเชื้อไวรัส (ตรวจ) กุ้ง penaeid ลงตัวอ่อน (PL) ก่อนที่พวกเขาจะเก็บในบ่อเพาะเลี้ยง ทดสอบความขัดแย้งผลลัพธ์สำหรับส่งไปยังบริการห้องปฏิบัติการทั้งสองอย่างคล้ายลดความเชื่อมั่นในการทดสอบ PCR ดังนั้น เราเปรียบเทียบการความไวของ PCR หลายวิธีจ้างทั่วไปโดยใช้ PCR แบบเรียลไทม์ Taqman เป็นมาตรฐานทองคำกับการหุ้นแม่ตรวจบริสุทธิ์ ใช้หุ้นนี้ assays เราพบผลลิปกลอสไขไม่สำคัญ โดยตรวจฟรีโฮสต์กุ้งดีเอ็นเอผ่าน ng ช่วง 0-300 ต่อปฏิกิริยา หรือ DNA เพิ่มจากกุ้งที่ติดเชื้อการตรวจ แบบเรียลไทม์ PCR สามารถตรวจพบการตรวจมีความแน่นอนที่ dilutions ประมาณ 5 สำเนาต่อปฏิกิริยาขณะ 1000 จำเป็นสำเนาสำหรับ PCR แบบขั้นตอนเดียวทั่วไปวิธีการและ 50 สำหรับทั่วไปหลอดเดียวซ้อน PCR (1N-PCR) วิธี ของ PCR ซ้อนสองท่อ 2 โพรโทคอลการทดสอบ หนึ่งต้อง100 และ 1000 เล่ม นอกจากนี้การทดสอบความไว ทำการทดสอบคนตาบอดทริแหวนออกใช้ชุด 10ติดเชื้อการตรวจดีเอ็นเอบางส่วนส่งไปยังห้องทดลองเชิงพาณิชย์ และสาธารณะในประเทศไทย 12 ไม่ระบุวิธี PCR จะใช้ ส่งคืนผลลัพธ์รวมทำงานผิดพลาดไม่เท็จและสองเท็จฟิล์ หลังทั้งจาก vials เชื้อไฟ นี้แปลเป็นการทดสอบความไวของ 97.3% และ specificity 100% โดยรวม ผลยืนยันถูกต้องของวิธีใช้ PCR ในประเทศไทยตรวจการตรวจในกุ้งแยกดีเอ็นเอ© 2005 Elsevier b.v สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมดคำสำคัญ: ผลวิธี ติดเชื้อไวรัส (ตรวจ) กลุ่มอาการจุดสีขาว กุ้งกุลาดำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในประเทศไทยหลายวิธี PCR-based จะถูกใช้โดยส่วนตัวและห้องปฏิบัติการที่ให้บริการประชาชนในการตรวจหาจุดขาว
โรคไวรัส (WSSV) การติดเชื้อใน penaeid กุ้งตัวอ่อนโพสต์ (PL) ก่อนที่พวกเขาจะถูกเก็บไว้ในบ่อเลี้ยง การทดสอบที่ขัดแย้งกัน
ผลที่คล้ายกันสำหรับตัวอย่างที่ส่งไปยังห้องปฏิบัติการสองบริการได้ลดลงความเชื่อมั่นในการทดสอบ PCR ดังนั้นเราเมื่อเทียบกับ
ความไวของวิธี PCR หลายลูกจ้างทั่วไปในประเทศไทยโดยใช้วิธี PCR TaqMan เรียลไทม์เป็นมาตรฐานทองคำที่มี
แม่แบบหุ้นตัวแดงดวงขาวบริสุทธิ์ โดยใช้หุ้นนี้ได้ตรวจพบว่าไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญโดยการยับยั้งกุ้ง WSSV โฮสต์ฟรี
ดีเอ็นเอในช่วง 0-300 นาโนกรัมต่อปฏิกิริยาหรือดีเอ็นเอเพิ่มจากกุ้งที่ติดเชื้อ WSSV PCR แบบ Real-time สามารถตรวจสอบ WSSV
ด้วยความมั่นใจที่เจือจางประมาณ 5 ชุดต่อปฏิกิริยาในขณะที่ 1000 เล่มที่จำเป็นสำหรับการ PCR ขั้นตอนหนึ่งที่พบบ่อย
และวิธีการสำหรับ 50 หลอดเดียวร่วมกันซ้อนกัน PCR (1N-PCR) วิธีการ 2 สองหลอดโปรโตคอลซ้อนกัน PCR ทดสอบหนึ่งต้อง
100 และอีก 1,000 เล่ม นอกจากนี้การทดสอบความไวของการทดสอบแหวนสามคนตาบอดได้ดำเนินการจ้างชุด 10
สารสกัดดีเอ็นเอที่ติดเชื้อ WSSV ส่งไปยังห้องปฏิบัติการ 12 เชิงพาณิชย์และสาธารณะในประเทศไทยโดยไม่ต้องระบุวิธี PCR ที่จะ
นำมาใช้ ผลกลับไม่รวมผลบวกปลอมและสองเชิงลบเท็จหลังทั้งจากการติดเชื้อขวดแสง นี้แปล
เป็นความไวของการทดสอบของ 97.3% และความจำเพาะของ 100% โดยรวมผลการยืนยันความถูกต้องของวิธี PCR-อยู่ใน
ประเทศไทยในการตรวจหา WSSV ในสารสกัดดีเอ็นเอกุ้ง.
© 2005 Elsevier BV สงวนลิขสิทธิ์.
คำสำคัญ: วิธี PCR ตาม; ไวรัสโรคจุดขาว (WSSV) การติดเชื้อ; กุ้งกุลาดำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในประเทศไทย หลายวิธี PCR จากใช้ส่วนบุคคลและห้องปฏิบัติการบริการสาธารณะเพื่อตรวจหาเชื้อไวรัสจุดขาว
( ี ) โรคติดเชื้อในกุ้งวัยอ่อนชนิดโพสต์ ( PL ) ก่อนที่จะเลี้ยงในบ่อเลี้ยง . ผลการทดสอบ
ขัดแย้งกันสำหรับที่คล้ายกันตัวอย่างที่ส่งถึงห้องปฏิบัติการบริการสองลดลงความมั่นใจในการทดสอบ PCR ดังนั้น เราเทียบ
ความไวของวิธีการทั่วไปที่ใช้โดยหลายในประเทศไทยโดยใช้ taqman เรียลไทม์ซึ่งเป็นมาตรฐานทองคำกับหุ้นแม่แบบ
บริสุทธิ์ี . ใช้สำหรับตรวจหุ้นนี้ เราพบว่าผลโดยี ฟรีโฮส กุ้ง
ดีเอ็นเอมากกว่าช่วง 0 ถึง 300 นาโนกรัมต่อปฏิกิริยาหรือโดยการเพิ่มดีเอ็นเอจากีกุ้งติดเชื้อ เวลาจริงตรวจจับี
ดีเอ็นเอด้วยความเชื่อมั่นในวิธีการประมาณ 5 เล่มต่อปฏิกิริยาในขณะที่ 1000 เล่มที่จําเป็นสําหรับ Real-Time PCR โดยวิธีทั่วไป
50 หลอดเดียวด้วย PCR ( 1n-pcr ) วิธี 2 สองท่อซ้อนกันและโปรโตคอลการทดสอบหนึ่งต้อง
100 และอีก 1 , 000 เล่ม นอกจากการทดสอบความไวเหล่านี้ ทดสอบแหวนสามตาบอดได้ดําเนินการใช้ชุด 10
ีสารติดเชื้อดีเอ็นเอส่งไป 12 ในเชิงพาณิชย์และสาธารณะของห้องปฏิบัติการในประเทศไทย โดยไม่มีการระบุวิธีพีซีอาร์เป็น
ใช้ . ส่งกลับผลลัพธ์รวม ไม่มีบวกเท็จและเท็จเชิงลบ หลังการติดเชื้อทั้งจากหลอดแสงสว่าง นี้แปล
เป็นทดสอบความไว 97.3 % และความจำเพาะ 100% โดยรวมแล้ว ยืนยันความถูกต้องของวิธี PCR ใน
ตามประเทศไทยในการตรวจหาดีเอ็นเอในกุ้งีสารสกัด
© 2005 สามารถนำเสนอสงวนลิขสิทธิ์ .
คำสำคัญ : PCR โดยวิธี ไวรัสดวงขาว ( ี ) การติดเชื้อ ; กุ้งกุลาดำ