2.2.2. Preparation of MPPM in monolithic form and immobilization of
lipase using Taguchi methodology
MPPM was prepared by polymerizing the continuous phase of a
high internal phase emulsion consisting of organic and water
phases. The compositions of these phases are shown in Table 2.
The organic phase (5 ml) was composed of styrene, divinylbenzene, and Span 80. The water phase (45 ml) contained potassium
persulphate and polyglutaraldehyde solution. Span 80 (1.75 g)
and potassium persulphate (0.7 g) were used in all samples prepared. The aqueous phase was added dropwise to the organic
phase while stirring with a mechanical stirrer based on the conditions in Table 2. The emulsion was transferred to a mold and cured
at 80 C for 24 h (Dizge et al., 2008). The polymer was first washed
with distilled water (50 ml) and then with tert-butanol (50 ml) to
remove impurities.
Immobilization was carried out by circulating enzyme solution
in calcium acetate buffer (55 ml, 25 mM, pH 6) by a peristaltic
pump through microporous monolithic polymer in disk form
(m = 0.36 g, D = 2 cm, and h = 0.5 cm) in a holder made of stainless
steel at various temperatures and immobilization time (Fig. 1 a).
The immobilized enzyme was then washed with acetate buffer
(50 ml, 25 mM, pH 6) to remove the unbound enzyme. The supernatant and washing solutions were assayed for unbound protein.
SEM micrographs of microporous polymeric material (MPPM)
and microporous polymeric biocatalyst (MPPB) for monolithic
form are shown in Fig. 1 c.
2.2.2 . การเตรียม mppm ในแบบฟอร์มเสาหินและการตรึงเอนไซม์ ใช้ทา mppm
วิธีการเตรียมโดย polymerizing เฟสต่อเนื่องของ
สูงภายในระยะอิมัลชันประกอบด้วยอินทรีย์และน้ำ
ระยะ องค์ประกอบของขั้นตอนเหล่านี้จะถูกแสดงในตารางที่ 2 .
เฟสอินทรีย์ ( 5 ml ) ประกอบด้วยไดไวนิลเบนซีนสไตรีน , , และช่วง 80น้ำเฟส ( 45 ml ) ที่มีอยู่ persulphate
polyglutaraldehyde โพแทสเซียมและโซลูชั่น สแปน 80 ( 1.75 กรัม และโพแทสเซียม )
persulphate ( 0.7 กรัม ) ถูกใช้ในตัวอย่างที่เตรียมไว้ ระยะน้ำเพิ่ม dropwise ไประยะอินทรีย์
ในขณะที่กวนด้วย stirrer กลตามเงื่อนไขในตารางที่ 2 อิมัลชันถูกโอนไปยังแม่พิมพ์และรักษา
80 เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ( dizge et al . , 2008 )พอลิเมอร์เป็นครั้งแรกที่ล้าง
ด้วยน้ำกลั่น ( 50 มล. ) แล้วกับ tert บิวทานอล ( 50 ml )
เอาสิ่งสกปรก ควรกระทำโดยการหมุนเวียนสารละลายเอนไซม์แคลเซียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ (
55 ml 25 มม. , pH 6 ) โดยปั๊ม peristaltic
ผ่านพอลิเมอร์ในรูปแบบดิสก์
ดเสาหิน ( M = 0.36 g , D = 2 เซนติเมตร และ H = 0.5 ซม. ) ในตัวยึดทำจากสแตนเลส
เหล็กที่อุณหภูมิต่าง ๆ และไม่มีเวลา ( รูปที่ 1 ) .
เอนไซม์ จากนั้นล้างด้วยอะซิเตทบัฟเฟอร์
( 50 ml 25 มม. , pH 6 ) เพื่อลบจับกับเอนไซม์ และน่าน และล้างโซลูชั่นซีรั่มสำหรับจับกับโปรตีน micrographs
SEM ของวัสดุพอลิเมอร์ ( mppm ดและใช้ตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพ ( ด )
mppb ) แบบฟอร์มเสาหิน
แสดงในรูปที่ 1 C
การแปล กรุณารอสักครู่..
