2. Material andmethods
2.1. Experimental settings
In order to assess whether P. delicatissima have an impact on the
physiological performance of sea bass, a 45-day exposure experiment
was carried out in controlled conditions.
Juvenile sea bass (160 individuals) were supplied by the Gravelines
Marine Hatchery (Ecloserie Marine de Gravelines, France). For 14 days,
the fish were placed in two 160 L tanks (80 individuals in each)
filled with filtered seawater (1.2 μm Whatman GF/C; Table 1), and
acclimatized at 15 °C in a thermoregulated room under a 12 h:12 h
light:dark cycle.
The experimental setup consisted of 10 aquaria of 37 L (50 × 30 ×
25cm) filledwith filtered seawater (1.2 μm,Whatman GF/C) and gently
aerated by a compressed air network. On the first day of the experiment
(t0), the acclimated fish (5.95 ± 0.97 g, 85.73 ± 4.77 mm) were
anesthetized with 320 μL L−1 2-phenoxyethanol (Maršić-Lučić et al.,
2005). They were weighed (total weight, W, ±0.01 g), measured
(total length, L, ±0.1 mm) and individually tagged (Visual Implant
Tag, 1.2 mm × 2.7 mm, Northwest Marine Technology) to follow
individual growth and physiological performances over time. After
their total recovery (within 5 min), the fish were randomly distributed
into the experimental tanks (15 fish per tank i.e. 2.55 g L−1). Five
experimental conditions were considered in duplicate: a control (C1)
containing fish in filtered seawater and three exposure conditions
(tanks D1, D2, and D3), with 1 × 106 (D1), 2 × 106 (D2), and 5 × 106
(D3) P. delicatissima cells L−1. D1 corresponded to P. delicatissima
highest abundance detected in the eastern English Channel and the
southern North Sea (Antajan et al., 2013; Breton et al., 2011), whereas
tanks D2 and D3 aimed to exacerbate the potential impacts induced
by P. delicatissima exposure. Maintaining constant phytoplankton
abundance in tanks D1 to D3 required scheduled addition of
P. delicatissima cultures, i.e. f/2medium (Guillard, 1975) and associated
P. delicatissima cells and nutrients. The impact of f/2 medium addition
on fish was separately tested by setting up an additional control (C2).
At the beginning of the experiment, 750 mL of f/2 medium was added
to the C2 tanks corresponding to the P. delicatissima culture volume
added to D3 at the same time. During the course of the experiment,
30% of this initial volume was added every three days in order to
overcome daily water renewal. Each day, tanks were gently bottom
siphoned with a tube to eliminate feces. Care was taken not to stress
the fish, and seawater was renewed (10% of total tank volume) with
1.2 μm-filtered seawater stored and aerated in the thermo-regulated
room.
2. วัสดุ andmethods2.1. ทดลองการตั้งค่าเพื่อประเมินว่า P. delicatissima มีผลต่อการทดสอบประสิทธิภาพการทำงานทางสรีรวิทยาของปลา แสง 45 วันดำเนินการในสภาวะที่ควบคุมกะพงเยาวชน (160 คน) ได้มาจากการ Gravelinesน้ำบ่อเพาะ (Ecloserie มารีเด Gravelines ฝรั่งเศส) วันที่ 14ปลาถูกวางไว้ในถัง 160 L สอง (80 บุคคลในแต่ละ)เต็มไป ด้วยน้ำทะเลกรอง (1.2 ไมครอน Whatman GF/C ทางตารางที่ 1), และacclimatized ที่ 15 ° C ในห้อง thermoregulated ภายใต้ h:12 ใน 12 ชมวงจรแสงสว่าง: มืดการตั้งค่าการทดลองประกอบด้วยอควาเรีย 10 ของ L 37 (50 × 30 ×25 ซม.) filledwith กรองน้ำทะเล (1.2 ไมครอน Whatman GF/C) และค่อย ๆห่างจากเครือข่ายเครื่องอัดอากาศ ในวันแรกของการทดลองt (0), ปลา acclimated (5.95 ± 0.97 g, 85.73 ±มม. 4.77) ได้ด้วยกับ 320 μL L−1 2-phenoxyethanol (Maršić-Lučić et al.,2005) . พวกเขามีน้ำหนัก (น้ำหนักรวม W ค่าความคลากเคลื่อนกรัม) วัด(ความยาวรวม L ถึง mm) และแต่ละแท็ก (Visual เทียมแท็ก 1.2 มม. × 2.7 มม. เทคโนโลยีทางทะเลตะวันตกเฉียงเหนือ) ทำตามแต่ละคนเจริญเติบโตและสรีรวิทยาแสดงช่วงเวลา หลังจากที่การกู้คืนทั้งหมด (ภายใน 5 นาที), ปลาถูกสุ่มลงในถังทดลอง (15 ปลาต่อถังเช่น 2.55 กรัม L−1) ห้าพิจารณาว่าเงื่อนไขทดลองในรายการซ้ำ: ตัวควบคุม (C1)ประกอบด้วยปลาในน้ำทะเลกรองและเงื่อนไขสามแสง(tanks D1, D2, and D3), with 1 × 106 (D1), 2 × 106 (D2), and 5 × 106(D3) P. delicatissima cells L−1. D1 corresponded to P. delicatissimahighest abundance detected in the eastern English Channel and thesouthern North Sea (Antajan et al., 2013; Breton et al., 2011), whereastanks D2 and D3 aimed to exacerbate the potential impacts inducedby P. delicatissima exposure. Maintaining constant phytoplanktonabundance in tanks D1 to D3 required scheduled addition ofP. delicatissima cultures, i.e. f/2medium (Guillard, 1975) and associatedP. delicatissima cells and nutrients. The impact of f/2 medium additionon fish was separately tested by setting up an additional control (C2).At the beginning of the experiment, 750 mL of f/2 medium was addedto the C2 tanks corresponding to the P. delicatissima culture volumeadded to D3 at the same time. During the course of the experiment,30% of this initial volume was added every three days in order toovercome daily water renewal. Each day, tanks were gently bottomsiphoned with a tube to eliminate feces. Care was taken not to stressthe fish, and seawater was renewed (10% of total tank volume) with1.2 μm-filtered seawater stored and aerated in the thermo-regulatedroom.
การแปล กรุณารอสักครู่..

2. วัสดุ andmethods
2.1 การตั้งค่าการทดลอง
เพื่อประเมินว่าพี delicatissima มีผลกระทบต่อ
ประสิทธิภาพการทำงานทางสรีรวิทยาของปลากะพงขาว, การทดสอบการสัมผัส 45 วัน
ได้ดำเนินการในสภาวะควบคุม.
กะพงเด็กและเยาวชน (160 บุคคล) ถูกจัดทำโดยเก
ทะเลฟักไข่ (Ecloserie มารีนเดอเกฝรั่งเศส) เป็นเวลา 14 วัน,
ปลาถูกวางไว้ในสอง 160 ถัง L (80 บุคคลในแต่ละ)
ที่เต็มไปด้วยน้ำทะเลกรอง (1.2 ไมครอน Whatman GF / C; ตารางที่ 1) และ
ปรับสภาพที่ 15 ° C ในห้อง thermoregulated ภายใต้ 12 ชั่วโมง: 12 ชั่วโมง
แสง:. รอบเข้ม
การตั้งค่าการทดลองประกอบด้วย 10 ตู้ 37 L (50 × 30 ×
25 ซม) filledwith กรองน้ำทะเล (1.2 ไมโครเมตร Whatman GF / C) และค่อยๆ
มวลเบาโดยเครือข่ายการบีบอัดอากาศ ในวันแรกของการทดลอง
(t0) ปลาปรับตัว (5.95 ± 0.97 กรัม 85.73 ± 4.77 มม) ได้รับการ
ดมยาสลบกับ 320 ไมโครลิตร L-1 2-Phenoxyethanol (Maršić-Lučić et al.,
2005) พวกเขาได้รับการชั่งน้ำหนัก (น้ำหนักรวม, W, ± 0.01 กรัม) วัด
(ความยาวรวม, L, ± 0.1 มิลลิเมตร) และการติดแท็รายบุคคล (เทียมภาพ
Tag, 1.2 มม× 2.7 มมภาคตะวันตกเฉียงเหนือทะเลเทคโนโลยี) ที่จะปฏิบัติตาม
การเจริญเติบโตของแต่ละบุคคลและการแสดงทางสรีรวิทยา ล่วงเวลา. หลังจากที่
การกู้คืนทั้งหมดของพวกเขา (ภายใน 5 นาที) ปลามีการกระจายแบบสุ่ม
เข้าไปในถังทดลอง (15 ปลาต่อถังคือ 2.55 กรัม L-1) ห้า
เงื่อนไขการทดลองได้รับการพิจารณาในที่ซ้ำกัน: การควบคุม (C1)
มีปลาในน้ำทะเลที่ผ่านการกรองและสามเงื่อนไขการสัมผัส
(ถัง D1, D2 และ D3) กับ 1 × 106 (D1), 2 × 106 (D2) และ 5 × 106
(D3) พีเซลล์ delicatissima L-1 D1 ตรงกับพี delicatissima
อุดมสมบูรณ์สูงสุดที่ตรวจพบในภาคตะวันออกของช่องแคบอังกฤษและ
ภาคใต้ทะเลเหนือ (Antajan et al, 2013;.. เบร et al, 2011) ในขณะที่
รถถัง D2 และ D3 มีวัตถุประสงค์เพื่อทำให้รุนแรงส่งผลกระทบต่อศักยภาพในการเหนี่ยวนำ
โดยพี การสัมผัส delicatissima การดูแลรักษาแพลงก์ตอนพืชคง
ความอุดมสมบูรณ์ในถัง D1 เพื่อ D3 ต้องกำหนดไว้นอกเหนือจาก
พี วัฒนธรรม delicatissima เช่น f / 2medium (Guillard, 1975) และที่เกี่ยวข้อง
พี เซลล์ delicatissima และสารอาหาร ผลกระทบของ f / 2 นอกจากกลาง
ปลาได้รับการทดสอบโดยแยกการตั้งค่าการควบคุมเพิ่มเติม (C2).
ที่จุดเริ่มต้นของการทดสอบ 750 มล f / 2 ขนาดกลางถูกบันทึก
ไปยังถัง C2 สอดคล้องกับวัฒนธรรม delicatissima พี ปริมาณ
เพิ่มไปยัง D3 ในเวลาเดียวกัน ในช่วงของการทดลองที่
30% ของปริมาณเริ่มต้นนี้ถูกบันทึกทุกสามวันเพื่อที่จะ
เอาชนะการต่ออายุน้ำทุกวัน ในแต่ละวันมีรถถังเบา ๆ ด้านล่าง
ดูดกับหลอดที่จะกำจัดอุจจาระ การดูแลที่ถูกนำมาไม่ได้ที่จะเน้น
ปลาและน้ำทะเลขึ้นมาใหม่ (10% ของปริมาณถังทั้งหมด) กับ
1.2 น้ำทะเลไมครอนกรองการจัดเก็บและมวลเบาในเทอร์โมระเบียบการ
ห้องพัก
การแปล กรุณารอสักครู่..

2 . วิธีการวัสดุ2.1 . การตั้งค่าการทดลองเพื่อประเมินว่ามีผลกระทบต่อหน้าเทอโรโทรฟิกผลทางสรีรวิทยาของปลากะพง เป็น 45 วัน การ ทดลองดำเนินการในเงื่อนไขที่ควบคุมเยาวชนปลากะพง ( 160 คน ) จัดโดย เกรฟทะเลที่ฟักไข่ ( ecloserie ทางทะเล de Dunkerque , ฝรั่งเศส ) สำหรับ 14 วันปลาที่ถูกวางไว้สอง 160 ลิตรถัง ( 80 บุคคลในแต่ละ )เต็มไปด้วยกรองน้ำทะเล ( 1.2 μ M whatman GF / C ; ตารางที่ 1 )ปรับสภาพที่ 15 ° C ใน thermoregulated ห้องใต้ 12 H : 12 ชั่วโมง: วงจรไฟมืดการติดตั้งทดลองจำนวน 10 นุกูล 37 ลิตร ( 50 × 3 ×25 ซม. ) ผสมกรองน้ำทะเล ( 1.2 μ M , whatman GF / C ) และเบา ๆโดยการอัดอากาศเครือข่าย ในวันแรกของการทดลอง( t0 ) แบบ ปลา ( 5.95 ± 0.97 กรัม 85.73 ± 4.77 มม. ) คืออสัญญี 320 μ L L − 1 2-phenoxyethanol ( มาร์ซิค - ลู่čผมć et al . ,2005 ) มันหนัก ( น้ำหนักรวม , W , ± 0.01 กรัม ) , วัด( ความยาวรวม L , ± 0.1 มิลลิเมตร ) และแบบแท็ก ( ภาพเทียมแท็ก 1.2 มม. × 2.7 มม. เทคโนโลยีทางทะเลตะวันตกเฉียงเหนือ ) ตามสรีรวิทยาการเจริญเติบโตและการแสดงแต่ละช่วงเวลา หลังจากกู้คืนทั้งหมดของพวกเขา ( ภายใน 5 นาที ) , ปลามีการกระจายแบบสุ่มในถังทดลอง ( เช่น 2.55 กรัมต่อถัง 15 ปลา L − 1 ) ห้าเงื่อนไขการทดลอง คือ พิจารณาซ้ำ : ควบคุม ( C1 )มีปลาในน้ำทะเลกรองและสามการเงื่อนไข( ถัง D1 , D2 และ D3 ) กับ 1 × 106 ( D1 ) , 2 × 106 ( D2 ) , และ 5 × 106 คน( D3 ) หน้าเทอโรโทรฟิกเซลล์ L − 1 D1 ตรงกับหน้าเทอโรโทรฟิกไพบูลย์สูงสุดที่ตรวจพบในช่องภาษาอังกฤษตะวันออกและใต้เหนือทะเล ( antajan et al . , 2013 ; Breton et al . , 2011 ) , ในขณะที่ถัง D2 และ D3 มีวัตถุประสงค์เพื่อเพิ่มศักยภาพและผลกระทบโดย เทอโรโทรฟิก เปิดเผย การรักษาค่าคงที่แพลงค์ตอนพืชความอุดมสมบูรณ์ในถัง D1 กับ D3 ต้องกำหนดเพิ่มวัฒนธรรมหน้าเทอโรโทรฟิก เช่น f / 2medium ( guillard , 1975 ) และที่เกี่ยวข้องหน้าเทอโรโทรฟิกเซล และรัง ผลกระทบของ F / 2 เพิ่มกลางปลาถูกทดสอบโดยแยกการตั้งค่าการควบคุมเพิ่มเติม ( C2 )ที่จุดเริ่มต้นของการทดลอง 750 มิลลิลิตรของ F / 2 ) เพิ่มกับ C2 รถถังที่สอดคล้องกับวัฒนธรรม เล่มหน้า เทอโรโทรฟิกเพิ่ม D3 ในเวลาเดียวกัน ในระหว่างการทดลอง30 % ของปริมาณเริ่มต้นนี้ ได้เพิ่มทุกๆ 3 วัน เพื่อเอาชนะการต่ออายุน้ำทุกวัน แต่ละวัน รถถังเบา ๆด้านล่างคือดูดด้วยหลอดเพื่อขจัดอุจจาระ สนใจถ่ายไม่เครียดปลาและน้ำทะเลถูกต่ออายุ ( 10 % ของปริมาตรถังทั้งหมด ) กับ1.2 μ m-filtered น้ำทะเลเก็บน้ำอัดลมในเทอร์โมควบคุมห้อง
การแปล กรุณารอสักครู่..
