3.3.2 วิธี Ferric-reducing antioxid

3.3.2 วิธี Ferric-reducing antioxidant power (FRAP)
โดยทำการเตรียมสารละลาย FRAP จากสารละลาย acetate buffer (pH 3.6), TPTZ 10 mMใน
HCl เข้มข้น 40 mM และสารละลาย Ferrous chloride เข้มข้น 20 mM ในอัตราส่วน 10:1:1 (v/v)
ตามลำดับ สารละลาย FRAP จะตอ้ งเตรียมใหม่ทุกครั้งก่อนใชง้ าน และนาํ ไปอุ่นในอ่างควบคุม
อุณหภูมิ ที่ 37 องศาเซลเซียส ก่อนที่จะนำมาใช้
ในทดสอบด้วยวิธีนี้ จะใช้สารสกัดปริมาณ 50 ไมโครลิตร แลว้ เติมสารละลาย FRAP
ปริมาตร 1.5 มิลลิลิตร ผสมใหเ้ ขา้ กนั เกบ็ ไวใ้ นที่มืดเป็นระยะเวลาเวลา 4 นาที นำไปวัดค่าดูดกลืน
แสงที่ 593 นาโนเมตร โดยทำการเปรียบเทียบกับกราฟมาตรฐานของสารละลาย Ferric sulfate ที่มี
ความเข้มข้นอยู่ในช่วง 100-2000 μM โดยทำการทดลองจำนวนสามซ้ำและหาค่าเฉลี่ย
3.3.3 การวเิ คราะห์ความสามารถในการต้านอนุมูลอสิ ระด้วย 2,2’-Azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-
6-sulfonic acid)
เตรียมสารละลาย ABTS+ cation radical โดยการผสมสารละลาย ABTS 14 mM 5 ml และ
4.9 mM potassium persulfate (K2S2O8) 5 ml ผสมใหเ้ ขา้ กนั ต้งั ทิ้งไวที้่อุณหภูมิหอ้ งในที่มืดเป็นเวลา
16 ชั่วโมง ก่อนใช้นำสารละลาย ABTS+ มาเจือจางด้วยเอทานอลให้มีค่าการดูดกลืนแสงอยู่ในช่วง
0.700 ± 0.020 ที่ความยาวคลื่น 734 นาโนเมตร จากนั้นปิเปตสารละลาย ABTS+ 950 ul ผสมกบั
สารสกัดตัวอย่างหรือสารมาตรฐาน 50 ul โดยใชน้ ้าํ กลนั่ เป็น Blank ผสมให้เข้ากัน ตั้งทิ้งไว้ในที่
มืดเป็นเวลา 6 นาที จากนั้นนำไปวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 734 นาโนเมตร โดยใช้
BHT และ Trolox เป็นชุดควบคุม จากนั้นคำนวณความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระ ( %) ตาม

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.3.2 วิธีลด Ferric อนุมูล (FRAP)โดยทำการเตรียมสารละลาย FRAP จากสารละลาย acetate บัฟเฟอร์ (pH 3.6), TPTZ 10 mMในHCl เข้มข้น 40 มม.และสารละลายคลอไรด์เหล็กเข้มข้นมม. 20 ในอัตราส่วน 10:1:1 (v/v)ตามลำดับสารละลายจะตอ้งเตรียมใหม่ทุกครั้งก่อนใชง้านและนาํไปอุ่นในอ่างควบคุม FRAPอุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสก่อนที่จะนำมาใช้FRAP ในทดสอบด้วยวิธีนี้จะใช้สารสกัดปริมาณ 50 ไมโครลิตรแลว้เติมสารละลายปริมาตร 1.5 มิลลิลิตรผสมใหเ้ขา้กนัเกบ็ไวใ้นที่มืดเป็นระยะเวลาเวลา 4 นาทีนำไปวัดค่าดูดกลืนแสงที่ 593 นาโนเมตรโดยทำการเปรียบเทียบกับกราฟมาตรฐานของสารละลายซัลเฟตแหล่งที่มีโดยทำการทดลองจำนวนสามซ้ำและหาค่าเฉลี่ยความเข้มข้นอยู่ในช่วง 100-2000 Μ M3.3.3 การวเิคราะห์ความสามารถในการต้านอนุมูลอสิระด้วย 2, 2'-Azino-bis (3 - ethylbenzothiazoline-กรด 6 sulfonic)เตรียมสารละลายรเรียน + รกโดยการผสมสารละลายรุนแรงรเรียน 14 มม. 5 มล.และ4.9 มม.โพแทสเซียมเพอร์ซัลเฟต (K2S2O8) 5 ml ผสมใหเ้ขา้กนัต้งัทิ้งไวที้่อุณหภูมิหอ้งในที่มืดเป็นเวลา16 ชั่วโมงก่อนใช้นำสารละลายรเรียน + มาเจือจางด้วยเอทานอลให้มีค่าการดูดกลืนแสงอยู่ในช่วง0.700 ± 0.020 ที่ความยาวคลื่น 734 นาโนเมตรจากนั้นปิเปตสารละลายรเรียน + 950 ul ผสมกบัสารสกัดตัวอย่างหรือสารมาตรฐาน 50 ul โดยใชน้้าํกลนั่ความผสมให้เข้ากันเปล่าตั้งทิ้งไว้ในที่มืดเป็นเวลา 6 นาทีจากนั้นนำไปวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 734 นาโนเมตรโดยใช้บาทและ Trolox เป็นชุดควบคุมจากนั้นคำนวณความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระ (%) ตาม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.3.2 วิธี Ferric ลดอำนาจสารต้านอนุมูลอิสระ (FRAP)
โดยทำการเตรียมสารละลาย FRAP จากสารละลายบัฟเฟอร์อะซิเตท (pH 3.6) TPTZ 10 มิลลิใน
HCl เข้มข้น 40 มิลลิเมตรและสารละลายธาตุเหล็กคลอไรด์เข้มข้น 20 มิลลิเมตรในอัตราส่วน 10: 1: 1 (V / v)
ตามลำดับสารละลาย FRAP จะตอ้งเตรียมใหม่ทุกครั้งก่อนใชง้าหนังสือนและนาํไปอุ่นในห้างหุ้นส่วนจำกัดอ่างควบคุม
อุณหภูมิที่ 37 องศาเซลเซียสก่อนที่จะนำมาใช้
ในห้างหุ้นส่วนจำกัดทดสอบด้วยวิธีนี้จะใช้สารสกัดปริมาณ 50 ไมโครลิตร แลว้เติมสารละลาย FRAP
ปริมาตร 1.5 มิลลิลิตรผสมใหเ้ขา้กนัเก บ็ไวใ้นที่มืดเป็นระยะเวลาเวลา 4 นาทีความสามารถในนำไปวัดค่าดูดกลืน
แสงที่ 593 นาโนเมตรโดยทำการเปรียบเทียบกับกราฟมาตรฐาน ของสารละลาย เฟอร์ริกซัลเฟตที่มี
ความเข้มข้นอยู่ในช่วง 100-2000 ไมครอนโดยทำการทดลองจำนวนสามซ้ำและหา ค่าเฉลี่ย
3.3.3 การวเิคราะห์ความสามารถ ในการต้านอนุมูลอสิระด้วย 2,2'-Azino-Bis (3 ethylbenzothiazoline -
กรด 6 sulfonic)
เตรียมสารละลาย ABTS + ไอออนรุนแรงโดยการผสมสารละลาย ABTS 14 mm 5 มล. และ
4.9 มมโพแทสเซียมเพอร์ซัลเฟต (K2S2O8) 5 มิลลิลิตรผสมใหเ้ขา้กนัต้งั ทิ้งไวที้่อุณหภูมิหอ้งในที่มืดเป็นเวลา
16 ชั่วโมงก่อนใช้นำสารละลาย ABTS + มาเจือจางด้วยเอทานอลให้ มีค่าการดูดกลืนแสงอยู่ในช่วง
0.700 ± 0.020 ที่ความยาวคลื่น 734 นาโนเมตรจากนั้นปิเปตสารละลาย ABTS + 950 UL ผสมกบั
สารสกัดตัวอย่าง arrow หรือสารมาตรฐาน 50 UL โดยใชน้้าํกลนั่เป็นที่ว่างเปล่าผสมให้เข้ากันตั้งทิ้งไว้ในห้างหุ้นส่วนจำกัดที่
มืดเป็นเวลา 6 นาทีจากนั้นนำไปวัดค่าการ ดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 734 นาโนเมตรโดยใช้
BHT และ Trolox เป็นชุดควบคุมจากนั้นคำนวณความ สามารถในการต้านอนุมูลอิสระ (%) ตาม