The plasmid DNA–Lipofectamine2000 ratio was used according to the manufacturer protocol. The liposome–plasmid injected rats received each one ml of a Lipofectamine2000-OptiMEM (Invitrogen, France) containing 100 μg plasmid (100 μl containing 10 μg plasmid for mice) with or without the application of the USE. A group received the vehicle alone (Lipofectamine2000-OptiMEM), while the sham group had the heart exposed but was not subjected to any injections. The LacZ adenovirus group received one ml (5×200 μl) of a saline solution (NaCl) containing 9×109 viral particles (vp). Eight groups of rats were defined according to the myocardial injected vector and the time-course till sacrifice: Sham (n=4), LacZ adenovirus (n=4), liposomes alone (vehicle, n=4), liposomes-LacZ plasmid without USE (n=4), liposomes-GFP plasmid+USE (n=8) these animals were sacrificed after 4 days. Among the liposomes-LacZ plasmid+USE groups (n=12), some were sacrificed 4, 8 or 15 days after injection (n=4/group). Six mice were injected either with LacZ plasmid+USE and 4 with vehicle+USE. The siRNA–Lipofectamine2000 mix was also prepared according to the manufacturer protocol, and 30 μg of siRNA was used per injection. The negative control siRNA-Cy3 rats were sacrificed 6 h following the siRNA injections (n=12), while the siTRPC1-Cy3 after four days (n=8).
อัตราส่วน dna lipofectamine2000-พลาสมิดถูกนำมาใช้ตามโปรโตคอลของผู้ผลิต ลิโปโซม-หนูฉีดพลาสมิดที่ได้รับแต่ละคนมิลลิลิตร lipofectamine2000-optimem (Invitrogen, ฝรั่งเศส) ที่มี 100 ไมโครกรัมพลาสมิด (100 ไมโครลิตรที่มี 10 ไมโครกรัมพลาสมิดสำหรับหนู) โดยมีหรือไม่มีการประยุกต์ใช้ในการใช้งาน กลุ่มที่ได้รับรถคนเดียว (lipofectamine2000-optimem)ในขณะที่การซ้อมกลุ่มมีหัวใจสัมผัส แต่ไม่ได้อยู่ภายใต้การฉีดยาใด ๆ กลุ่ม adenovirus lacZ ได้รับหนึ่ง มล. (5 × 200 ไมโครลิตร) ของสารละลายเกลือ (NaCl) ที่มี 9 × 109 อนุภาคไวรัส (VP) แปดกลุ่มของหนูที่ถูกกำหนดไว้ตามเวกเตอร์ฉีดเนื้อหัวใจตายและเวลาที่แน่นอนจนเสียสละ: เสแสร้ง (n = 4), adenovirus lacZ (n = 4), ไลโปโซมคนเดียว (ยานพาหนะ, n = 4),ไลโปโซม-lacZ โดยไม่ต้องใช้พลาสมิด (n = 4), ไลโปโซม-GFP การใช้พลาสมิด (n = 8) สัตว์เหล่านี้ได้รับการเสียสละหลังจาก 4 วัน ในไลโปโซม-lacZ กลุ่มการใช้พลาสมิด (n = 12), บางคนเสียสละ 4, 8 หรือ 15 วันหลังจากการฉีด (n = 4/group) หกหนูที่ถูกฉีดทั้งที่มีการใช้พลาสมิด lacZ และ 4 ด้วยการใช้ยานพาหนะsiRNA-lipofectamine2000 ผสมถูกจัดทำขึ้นยังตามโปรโตคอลผู้ผลิต, และ 30 ไมโครกรัมของ siRNA ถูกนำมาใช้ต่อการฉีด siRNA-cy3 การควบคุมเชิงลบหนูเสียสละ 6 ชั่วโมงหลังฉีด siRNA (n = 12) ในขณะที่ sitrpc1-cy3 หลังจากสี่วัน (n = 8)
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
ใช้อัตราส่วน DNA–Lipofectamine2000 plasmid ตามโพรโทคอลผู้ผลิต หนู liposome–plasmid ฉีดรับ ml แต่ละหนึ่งของการ Lipofectamine2000-OptiMEM (Invitrogen ฝรั่งเศส) ประกอบด้วย plasmid μg 100 (μl 100 ที่ประกอบด้วย plasmid μg 10 สำหรับหนู) มี หรือไม่ มีการประยุกต์ใช้ กลุ่มได้รับรถคนเดียว (Lipofectamine2000-OptiMEM), ในขณะที่กลุ่มซัมซุยโปมี หัวใจสัมผัส แต่ไม่ถูกต้องใด ๆ ฉีด กลุ่ม adenovirus LacZ รับหนึ่ง ml (5 × 200 μl) ของน้ำมีเกลือ (NaCl) ประกอบด้วย 9 × 109 ที่ไวรัสอนุภาค (vp) กลุ่มแปดของหนูถูกกำหนดตามเวกเตอร์ฉีด myocardial และเวลาหลักสูตรจนถึงการเสียสละ: ซัมซุยโป (n = 4), LacZ adenovirus (n = 4), liposomes เพียงอย่างเดียว (รถ n = 4), plasmid liposomes LacZ โดยใช้ (n = 4), liposomes GFP plasmid ใช้ (n = 8) สัตว์เหล่านี้ได้เสียสละหลังจาก 4 วัน ระหว่างกลุ่มใช้ plasmid liposomes LacZ (n = 12), บางคนได้เสียสละ 4, 8 หรือ 15 วันหลังจากฉีดยา (n = 4/กลุ่ม) หนูหกถูกฉีดทั้งที่ มี plasmid LacZ ใช้และ 4 มีรถใช้ ผสม siRNA–Lipofectamine2000 ที่พร้อมตามโพรโทคอลผู้ผลิต และ μg 30 ของ siRNA ใช้สำหรับฉีด หนู siRNA Cy3 ลบควบคุมได้เสียสละต่อฉีด siRNA h 6 (n = 12), ขณะ siTRPC1 Cy3 หลังจากสี่วัน (n = 8)
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)