2.7. Determination of antibacterial

2.7. Determination of antibacterial activity
2.7.1. Bacterial stains
Two Gram-positive (Staphylococcus aureus ATCC 25923 and
Streptococcus pyogenes ATCC19615), and two Gram-negative
(Escherchia coli ATCC 25922 and Klebsiella pneumonia ATCC
13883) bacteria were selected for antibacterial activity assay.
The cultures of bacteria were maintained in their appropriate
agar slants at 4 C throughout the study and used as stock
cultures.
2.7.2. Preparation of standard inoculums
The microorganisms were inoculated into Muller Hinton broth
(MHB) supplemented with 5% defibrinated sheep blood and
incubated at 37 C for 12–15 h. The turbidity of the resulting
suspension was diluted with MHB to match with 1 McFarland
turbidity standard. This level of turbidity is equivalent to
approximately 3.0 · 108 CFU/mL, equivalent to 0.5 Macfarland
standards.
2.7.3. Agar diffusion method
The protocols used in this study were based on guidelines of
CLSI, formerly known as NCCLS (CLSI, 2006) with slight
modification. Briefly, 200 lL fresh overnight cultures of the
indicator strains of bacteria (108 CFU/mL) were added onto
Muller Hinton agar (MHA) containing 5% defibrinated sheep
blood. The MHA was vigorously mixed and poured over Petri
plates with previously dried correspondent agar medium on
the surface of which the sterile tubes (7 mm diameters) were
placed. After solidification of the MHA, the tubes were removed
and the obtained wells were filled with 10 lL of the
M. piperita extracts and oil. In order to accelerate diffusion
of the essential oil into agar, plates were incubated at 4 C
for 1 h and were then incubated at 37 C. After 24–48 h of
incubation, the antibacterial activity was evaluated by measuring
the width of the zone of inhibition (clear) of growth against
the indicator organisms in comparison to a control of reference
standards. All tests were performed in triplicate.
Ta

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 ความมุ่งมั่นของฤทธิ์ต้านแบคทีเรีย
2.7.1 คราบแบคทีเรีย
สองแกรมบวก (Staphylococcus aureus ATCC 25923 และ
Streptococcus pyogenes ATCC19615) และแกรมลบ
(Escherchia coli ATCC 25922 และ Klebsiella ปอดบวม ATCC
13883) แบคทีเรียที่ถูกเลือกสำหรับการทดสอบฤทธิ์ต้านแบคทีเรีย.
วัฒนธรรมของเชื้อแบคทีเรียที่ถูกเก็บรักษาไว้ในที่เหมาะสมของพวกเขา
วุ้น slants ที่ 4 C ตลอดการศึกษาและนำมาใช้เป็นหุ้น
วัฒนธรรม.
2.7.2 การเตรียมหัวเชื้อแบคทีเรียมาตรฐาน
จุลินทรีย์ถูกเชื้อลงในน้ำซุปมุลเลอร์ฮินตัน
(MHB) เสริมด้วยเลือดแกะ defibrinated 5% และ
บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 12-15 ชั่วโมง ความขุ่นของผล
การระงับถูกเจือจางด้วย MHB เพื่อให้ตรงกับ 1 McFarland
มาตรฐานความขุ่น ระดับของความขุ่นนี้จะเทียบเท่ากับ
ประมาณ 3.0 · 108 CFU / ml เทียบเท่ากับ 0.5 MACFARLAND
มาตรฐาน.
2.7.3 วิธีการแพร่กระจายวุ้น
โปรโตคอลที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้อยู่บนพื้นฐานของคำแนะนำของ
CLSI เป็นที่รู้จักกัน NCCLS ได้เปลี่ยนชื่อ (CLSI 2006) ด้วยเล็กน้อย
การปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , 200 LL สดวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของ
สายพันธุ์ของเชื้อแบคทีเรียตัวบ่งชี้ (? 108 CFU / มิลลิลิตร) ถูกเพิ่มเข้าสู่
มุลเลอร์ Hinton agar (หมา) ที่มีแกะ defibrinated 5%
ในเลือด เลดก็แตกต่างกันอย่างจริงจังและราด Petri
แผ่นที่มีขนาดกลางผู้สื่อข่าววุ้นแห้งก่อนหน้านี้ใน
พื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อหลอด (7 มิลลิเมตร) ถูก
วางไว้ หลังจากการแข็งตัวของเลดหลอดถูกถอดออก
และบ่อได้รับเต็มไปด้วย 10 LL ของ
เอ็ม สารสกัดจาก piperita และน้ำมัน เพื่อที่จะเร่งการแพร่กระจาย
ของน้ำมันหอมระเหยลงไปในอาหารเลี้ยงเชื้อ, จานถูกบ่มที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส
เป็นเวลา 1 ชั่วโมงและถูกบ่มแล้วที่ 37 องศาเซลเซียสหลังจาก 24-48 ชั่วโมงของ
การบ่มกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรียที่ถูกประเมินโดยการวัด
ความกว้างของเขตของ ยับยั้ง (ชัดเจน) ของการเจริญเติบโตกับ
ชีวิตตัวบ่งชี้ในการเปรียบเทียบกับการควบคุมของการอ้างอิง
มาตรฐาน การทดสอบทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า.
ตา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . ความมุ่งมั่นของฤทธิ์ต้านแบคทีเรียการพัก . คราบแบคทีเรีย2 กรัม ( Staphylococcus aureus ATCC 25923 และบวกบสัตว์ atcc19615 ) และสองกรัมลบ( escherchia coli ATCC 25922 และเชื้อ Klebsiella ปอดบวม13883 ) แบคทีเรียที่คัดเลือกแบคทีเรียกิจกรรมการทดสอบวัฒนธรรมของแบคทีเรียถูกเก็บรักษาไว้ในที่เหมาะสมวุ้น slants 4 C ตลอดการศึกษาและใช้เป็นหุ้นวัฒนธรรม2.7.2 . การเตรียม 18 ชั่วโมงมาตรฐานจุลินทรีย์เป็นเชื้อน้ำ มุลเลอร์ ฮินตัน( mhb ) เสริมด้วย 5 % ที่เอาไฟบรินออกแล้วแกะ เลือด และบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 12 – 15 ชั่วโมง ความขุ่นของที่เกิดขึ้นการเจือจางด้วย mhb ตรงกับ 1 แมคฟาร์แลนด์มาตรฐานความขุ่น ที่ระดับความขุ่นนี้ เทียบเท่ากับประมาณ 3.0 ด้วย 108 CFU / ml เท่ากับ 0.5 แม็คฟาร์แลนด์มาตรฐาน2.7.3 . วิธี agarโปรโตคอลที่ใช้ในการศึกษา คือ ตามแนวทางของต่าง เดิมชื่อแบรนด์ ( ต่างๆ , 2006 ) กับเล็กน้อยการปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , วัฒนธรรมสด 200 จะคืนของตัวบ่งชี้สายพันธุ์ของแบคทีเรีย ( 108 CFU / ml ) ถูกเพิ่มลงบนมุลเลอร์ ฮินตัน ( MHA ) ประกอบด้วย 5 % ที่เอาไฟบรินออกแล้วแกะเลือด ส่วนมะถูกแรงผสมและเทมากกว่าเพทรีแผ่นอบแห้งอาหารวุ้นในก่อนหน้านี้ ผู้สื่อข่าวพื้นผิวที่หลอดฆ่าเชื้อ ( 7 เส้นผ่าศูนย์กลาง มม. ) คือวาง หลังจากการแข็งตัวของมะ หลอดถูกลบออกและได้รับหลุมที่เต็มไปด้วย 10 จะของเมตร piperita สารสกัดและน้ำมัน เพื่อเร่งการแพร่ของน้ำมันหอมระเหยลงในแผ่นวุ้น อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง และจากนั้นบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 และ 48 ชั่วโมงของบ่ม , ฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรียที่ประเมินโดยการวัดความกว้างของเขตของการยับยั้ง ( ชัดเจน ) ของการเจริญเติบโตกับตัวบ่งชี้ที่สิ่งมีชีวิตในการเปรียบเทียบกับการควบคุมของการอ้างอิงมาตรฐาน การทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการทั้งสามใบทา