For H+-ATPase activity assay, 3 mL

For H+-ATPase activity assay, 3 mL reaction solution contained
0.3 mL mitochondria extract, 30 mM Tris–HCl (pH 8.0), 0.1 mM
Na3VO4, 0.1 mM (NH4)2MoO4, 3 mM Mg2SO4, 50 mM KCl and
50 mM NaNO3. For Ca2+-ATPase activity assay, 3 mL reaction solution
contained 0.3 mL mitochondria extract, 30 mM Tris–HCl
(pH 8.0), 0.1 mM Na3VO4, 0.1 mM (NH4)2MoO4, 3 mM Ca(NO3)2,
50 mM KCl and 50 mM NaNO3. The reaction was initiated by
adding 100 lL 30 mMTris-HCl buffer (pH 8.0) and ended by adding
0.2 mL of 30 mM trichloroacetic acid. The whole reaction was
performed at 37
C for 20 min in water bath. One unit of
H+-ATPase and Ca2+-ATPase activities was defined as the release
of 1 lmol of phosphorus per minute at 660 nm absorbance, measured
by a spectrophotometer (UV-1750, Shimadzu Corporation,
Tokyo, Japan).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สำหรับ H + -ATPase กิจกรรมทดสอบ 3 มล.ปฏิกิริยาโซลูชันที่มีอยู่สารสกัดจาก mitochondria 0.3 มล. 30 มม. (pH 8.0), ทริสเรทติ้ง – HCl 0.1 mMNa3VO4, 0.1 mM (NH4) 2MoO4, Mg2SO4 3 mM, 50 mM KCl และ50 มม. NaNO3 สำหรับ Ca2 + -ATPase กิจกรรมทดสอบ โซลูชันปฏิกิริยา 3 mLสารสกัดจาก mitochondria มี 0.3 มล. 30 มม.ทริสเรทติ้ง – HClNa3VO4 (pH 8.0), 0.1 mM, 0.1 mM (NH4) 2MoO4, 3 มม. Ca (NO3) 2KCl 50 มม.และ 50 มม. NaNO3 จุดเริ่มต้นของปฏิกิริยาโดยเพิ่ม 100 lL 30 mMTris HCl บัฟเฟอร์ (pH 8.0) และสิ้นสุดลง โดยการเพิ่ม0.2 มิลลิลิตรของกรด trichloroacetic 30 มม. ปฏิกิริยาทั้งหมดดำเนินการใน 37 C 20 นาทีในอ่างน้ำ หนึ่งหน่วยH + -ATPase และ Ca2 + -ATPase กิจกรรมถูกกำหนดเป็นการเปิดตัวของ lmol 1 ของฟอสฟอรัสต่อนาทีที่ 660 nm ค่า วัดตามสเปค (UV-1750 บริษัท Shimadzuโตเกียว ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับ H + กิจกรรม ATPase นาทดสอบ 3 วิธีการแก้ปัญหาการเกิดปฏิกิริยามิลลิลิตรบรรจุ
0.3 มลสารสกัด mitochondria, 30 มิลลิเมตร Tris-HCl (pH 8.0) 0.1 มิลลิ
Na3VO4 0.1 มิลลิเมตร (NH4) 2MoO4, 3 mm Mg2SO4 50 มิลลิ KCl และ
ขนาด 50 มม NaNO3 สำหรับ Ca2 + ATPase นากิจกรรมการทดสอบ 3 วิธีการแก้ปัญหาการเกิดปฏิกิริยามิลลิลิตร
บรรจุ 0.3 มลสารสกัด mitochondria, 30 มิลลิเมตร Tris-HCl
(pH 8.0) 0.1 มิลลิ Na3VO4 0.1 มิลลิเมตร (NH4) 2MoO4, 3 mm Ca (NO3) 2
ขนาด 50 มมโพแทสเซียมคลอไรด์และ ขนาด 50 มม NaNO3 ปฏิกิริยาที่ถูกริเริ่มโดย
การเพิ่ม 100 LL-30 mMTris HCl บัฟเฟอร์ (pH 8.0) และจบลงด้วยการเพิ่ม
0.2 มิลลิลิตร 30 มิลลิเมตรกรดไตรคลอโร ปฏิกิริยาทั้งหมดถูก
ดำเนินการที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาทีในอ่างน้ำ หนึ่งหน่วยของ
H + ATPase นาและ Ca2 + ATPase นากิจกรรมถูกกำหนดเป็นปล่อย
ของ 1 lmol ของฟอสฟอรัสต่อนาทีที่ 660 นาโนเมตรการดูดกลืนแสงวัด
โดยสเปก (UV-1750 Shimadzu คอร์ปอเรชั่น
กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับ H + - ATPase activity assay , 3 ml สารละลายที่มีปฏิกิริยา0.3 ml ) สารสกัดจาก 30 มม. และ HCl ( pH 8.0 ) , 0.1 มม.na3vo4 0.1 มม. ( NH4 ) 2moo4 3 มม. mg2so4 , 50 mm . และ50 mm NaNO3 . สำหรับแคลเซียม + - ATPase กิจกรรมการทดสอบปฏิกิริยา 3 มิลลิลิตร โซลูชั่นอยู่ 0.3 ml ) สารสกัดจาก 30 มม. และกรดเกลือ( pH 8.0 ) na3vo4 0.1 มิลลิเมตร , 0.1 มม. ( NH4 ) 2moo4 3 มม. CA ( 3 ) 2. 50 มม. และ NaNO3 50 มิลลิเมตร ปฏิกิริยาที่ถูกริเริ่มโดยเพิ่ม 100 จะ 30 mmtris HCl บัฟเฟอร์ pH 8.0 ) และสิ้นสุด โดยการเพิ่ม0.2 มิลลิลิตรของกรดไตรคลอโรอะซิติก 30 mm . ปฏิกิริยาทั้งหมด คือดำเนินการใน 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาทีในน้ำอาบ หนึ่งหน่วยของH + - ATPase แคลเซียม + - ATPase และกิจกรรมที่ถูกกำหนดไว้เป็นรุ่น1 lmol ของฟอสฟอรัสต่อนาทีที่ 660 นาโนเมตรวัดการดูดกลืนแสงโดย Spectrophotometer ( uv-1750 Shimadzu Corporation ,โตเกียว , ญี่ปุ่น )