2.7. Parasite lactate dehydrogenase

2.7. Parasite lactate dehydrogenase assay for antimalarial
activity
In vitro antimalarial activity was performed by Parasite Lactate
Dehydrogenase Assay (pfLDH) [21] by using P. falciparum
3D7 strain. Pure compounds and standard drugs were serially
diluted (two fold) with complete culture medium in 96-well plates.
Infected RBCs solution with 2% parasitemia and 1% hematocrit was
added, making the total volume 200 L in each well. Plates were
incubated in candle jar with 5% CO2, 5% O2 and 90% N2 at 37 ◦C for
72 h. For malstat reaction, in 100 L of malstat solution, 20 L solution
from each well of Plate 1 to respective well of malstat plate was
added. Plates were placed in shaking water bath at 37 ◦C for 30 min.
25 L solution (1:1 solution of nitro blue tetrazolium, 2 mg/mL and
phenazine ethano sulphate, 0.1 mg/mL) was added in each well and
the plates were keptin dark for complete reaction. Plates were read
at 650 nm, and the OD was recorded. IC50 value was calculated with
the help of EZfit (Software for enzyme inhibition kinetic study by
Perrella Scientific, USA) computer program.
3.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7. ปรสิต lactate dehydrogenase วิเคราะห์สำหรับมาลาเรียกิจกรรมดำเนินกิจกรรมในมาลาเรีย โดยปรสิต Lactateทดสอบ dehydrogenase (pfLDH) [21] โดย P. falciparum3 D 7 สายพันธุ์ สารบริสุทธิ์และมาตรฐานยาถูก seriallyผสม (สองพับ) กับวัฒนธรรมขนาดกลางที่สมบูรณ์ในแผ่น 96-ดีโซลูชั่น RBCs ติดไวรัส ด้วย hematocrit parasitemia และ 1% 2%เพิ่ม ทำปริมาตรรวม 200 L ในแต่ละดี แผ่นได้incubated ในขวดเทียนกับ 5% CO2, 5% O2 และ 90% N2 ที่ ◦C 37 สำหรับ72 h สำหรับปฏิกิริยา malstat ใน L 100 ของ malstat โซลูชั่น 20 Lจากบ่อละ 1 แผ่นเพื่อความเกี่ยวข้องของ malstat เป็นแผ่นเพิ่ม แผ่นถูกวางในสั่นอาบน้ำที่ 37 ◦C สำหรับ 30 นาทีโซลูชั่น 25 L (1:1 โซลูชั่นของ tetrazolium บลูไนโตร 2 mg/mL และphenazine ethano ซัลเฟต 0.1 mg/mL) เข้ามาในแต่ละบ่อ และแผ่น keptin มืดสำหรับปฏิกิริยาที่สมบูรณ์ได้ แผ่นไม่อ่านที่ 650 nm และ OD ถูกบันทึก คำนวณมีค่า IC50ความช่วยเหลือของ EZfit (ซอฟต์แวร์การศึกษาเดิม ๆ ยับยั้งเอนไซม์โดยโปรแกรม Perrella วิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา)3

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 ปรสิตทดสอบนม dehydrogenase มาลาเรียสำหรับ
กิจกรรม
ในกิจกรรมต้านมาลาเรียหลอดทดลองได้ดำเนินการโดยพยาธิให้น้ำนม
ดีไฮโดรจี Assay (pfLDH) [21] โดยใช้พี falciparum
ความเครียด 3D7 สารบริสุทธิ์และยามาตรฐานลำดับ
เจือจาง (สองเท่า) กับสื่อวัฒนธรรมที่สมบูรณ์ในแผ่น 96 หลุม.
ที่ติดเชื้อแก้ปัญหาเม็ดเลือดแดงที่มีเชื้อ 2% และ hematocrit% 1 ถูก
เพิ่มทำให้ปริมาณรวม 200 ลิตรละกัน แผ่นถูก
บ่มในขวดเทียนกับ CO2 5%, 5% O2 และ N2 90% ที่ 37 ◦Cสำหรับ
72 ชั่วโมง สำหรับปฏิกิริยา malstat ใน 100 L ของการแก้ปัญหา malstat 20 L วิธีการแก้ปัญหา
จากกันของแต่ละแผ่นที่ 1 ถึงกันตามลำดับของแผ่น malstat ถูก
เพิ่ม แผ่นถูกวางไว้ในอ่างน้ำสั่นที่ 37 ◦Cเป็นเวลา 30 นาที.
25 การแก้ปัญหา L (1: 1 การแก้ปัญหาของ tetrazolium สีฟ้าไนโตร, 2 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรและ
phenazine ซัลเฟต ethano 0.1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) ถูกเพิ่มเข้ามาในแต่ละดีและ
แผ่น ถูก keptin มืดปฏิกิริยาที่สมบูรณ์ อ่านแผ่น
ที่ 650 นาโนเมตรและมี OD ได้รับการบันทึก ค่า IC50 ที่คำนวณได้ด้วย
ความช่วยเหลือของ Ezfit (ซอฟแวร์ในการยับยั้งเอนไซม์การศึกษาเกี่ยวกับการเคลื่อนไหวโดย
Perrella วิทยาศาสตร์สหรัฐอเมริกา) โปรแกรมคอมพิวเตอร์.
3

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . ปรสิตและ lactate dehydrogenase assay เพื่อกิจกรรม

ในหลอดทดลองและกิจกรรมที่ดำเนินการโดยปรสิต lactate dehydrogenase assay (
pfldh ) [ 21 ] โดยใช้หน้าใหม่
3d7 สายพันธุ์ สารประกอบที่บริสุทธิ์และเป็นยามาตรฐาน
เจือจาง ( 2 เท่า ) กับอาหารเลี้ยงเชื้อที่สมบูรณ์ใน 96 ดีแผ่น .
ติดเชื้อ rbcs สารละลายที่มีเชื้อ 2% และ 1% ก่อนคือ
เพิ่มทำให้ปริมาณรวม 200 ลิตรในแต่ละครั้งได้อีกด้วย แผ่น )
) เทียนโถกับ CO2 5 % , 5 % O2 และ 90 % N2 ที่ 37 ◦ C
72 ชั่วโมงสำหรับปฏิกิริยา malstat ใน 100 ลิตร 20 ลิตร malstat โซลูชั่นโซลูชั่นจากแต่ละอย่างดี
1 จานแต่ละจานจะดี malstat
เพิ่ม จานถูกวางลงในอ่างน้ำที่ 37 ◦เขย่าเป็นเวลา 30 นาที 25 ลิตร ( 1 : 1 1 :
โซลูชั่นโซลูชั่นไนโตร tetrazolium สีฟ้า ,2 mg / ml และ
phenazine ethano ซัลเฟต 0.1 มก. / มล. ) เพิ่มในแต่ละแผ่นมีแล้ว
keptin มืดสำหรับปฏิกิริยาที่สมบูรณ์ แผ่นอ่าน
ที่ 650 nm และ OD จะถูกบันทึก ic50 คำนวณด้วยค่า
ezfit ( ซอฟต์แวร์เพื่อช่วยในการยับยั้งเอนไซม์จลนศาสตร์การศึกษาโดย
perrella ทางวิทยาศาสตร์ , USA ) โปรแกรมคอมพิวเตอร์ .
3