Initially the shoot tips, immature inflorescences (0.6-0.8cm in diameter), leaf
sections, capitulum explants, axillary buds, receptacle explants from the field were taken.
The vegetative explant sources from the field had high contamination rates and slow
culture growth due to harsh sterilization of explants with chemicals, which damage the
growing points. It was identified as the root cause of this problem. Finally mature seeds
were tried for establishment of Gerbera tissue culture because clean cultures can easily
be obtained with seeds. The seeds were washed with detergent and sterilized with 0.1% HgCl2 solution for two minutes and were thoroughly washed with sterile water. Seeds
were germinated on MS basal medium (Murashige & Skoog, 1962). The crushed
germinated seed mass were used as explant for callus production in media containing Kn,
BA and 2,4-D (each @ 1-5 mg/liter) supplemented with glutamine and proline (each
5mg/liter). The calli were regenerated in media containing BA, NAA and IBA (each 1-5
mg/liter) supplemented with 5mg/liter glutamine. The colchicine was used @ 0-50
mg/liter. The sterile seeds were dipped in filtered sterile colchicine solution for 6 hours.
The seeds were kept on sieve to remove colchicine solution and washed thoroughly with
sterile distilled water. The seeds were put on sterile filter paper to absorb unnecessary
water and then sown on MS basal medium solidified with 1% agar. The pH of medium
was 5.8 and the cultures were kept in normal day light at 20±5o
C. After 10 days, the
germinating seeds were crushed in Petri plates with sterile blades and the tissue mass was
kept on media containing 2, 4-D. All operations were done in sterile environment in
laminar air flow cabinet. After six weeks, calli were kept on BA, NAA, and IBA (each
@1-5mg/l) containing media. After two months, the regenerated shoots were transferred
to MS medium with BA, IBA (each 0.5mg/liter). The developing plantlets were finally
transferred to pots in high humidity, acclimatized and grown like normal plants.
เริ่มต้นเคล็ดลับยิง ช่อเขียว immature (0.6-0.8 ซม.เส้นผ่าศูนย์กลาง), ลีฟส่วนแคปปิทูลัม explants,, axillary อาหาร explants รองรับจากฟิลด์ที่ถ่ายแหล่งผักเรื้อรัง explant จากฟิลด์มีอัตราการปนเปื้อนสูง และช้าวัฒนธรรมการเจริญเติบโตเนื่องจากการฆ่าเชื้อโรค explants กับสารเคมี ที่สร้างความเสียหายรุนแรงคะแนนเพิ่มขึ้น มันระบุสาเหตุรากของปัญหานี้ สุดท้ายผู้ใหญ่เมล็ดได้พยายามสำหรับสถานประกอบการของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเยอบีร่า เพราะวัฒนธรรมสะอาดอย่างง่ายดายได้กับเมล็ดพันธุ์ เมล็ดพันธุ์ถูกล้าง ด้วยผงซักฟอก และ sterilized 0.1% ได้โซลูชัน HgCl2 สองนาที และทำได้ถูกล้าง ด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อ เมล็ดพืชมีเปลือกงอกบนสื่อโรค MS (Murashige & Skoog, 1962) ที่บดเปลือกงอกเมล็ดจำนวนมากใช้เป็น explant สำหรับผลิตแคลลัสในสื่อประกอบด้วยช็อปปิ้งBA และ 2, 4-D (แต่ละแอท 1-5 มิลลิกรัม/ลิตร) เสริม glutamine และ proline (5 มิลลิกรัม/ลิตร) Calli ถูกสร้างในสื่อที่ประกอบด้วย BA, NAA และอิบา (ละ 1-5มิลลิกรัม/ลิตร) เสริม ด้วย glutamine 5 มิลลิกรัม/ลิตร มีใช้โคลชิซีนแอท 0-50มิลลิกรัม/ลิตร เมล็ดพืชใส่ถูกจุ่มลงในโซลูชันโคลชิซีนใส่กรอง 6 ชั่วโมงเมล็ดเก็บไว้ในตะแกรงเอาโซลูชันโคลชิซีน และล้างอย่างละเอียดด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ เมล็ดพันธุ์ใส่ในกระดาษกรองใส่ซับไม่จำเป็นน้ำแล้ว หว่านบนสื่อโรค MS หล่อกับ agar 1% PH ของตัวกลางมี 5.8 และวัฒนธรรมที่ถูกเก็บไว้ในวันปกติไฟที่ 20±5oC. หลังจาก 10 วัน การมีบดเมล็ด germinating ใน Petri แผ่นใบมีดที่ผ่านการฆ่าเชื้อและเนื้อเยื่อ เป็นจำนวนมากเก็บไว้ในสื่อที่ประกอบด้วย 2, 4-ดี การดำเนินงานทั้งหมดทำในสภาพแวดล้อมที่ผ่านการฆ่าเชื้อในตู้กระแสอากาศ laminar หลังจากหกสัปดาห์ calli ถูกเก็บไว้บน BA, NAA และอิบา (ในแต่ละแอท 1-5 mg/l) ประกอบด้วยสื่อ หลังจากสองเดือน ยอด regenerated ได้โอนย้ายระดับปานกลาง MS กับ BA อิบา (ละ 0.5 มิลลิกรัม/ลิตร) Plantlets พัฒนาได้ในที่สุดโอนย้ายไปหม้อในความชื้นสูง acclimatized และเติบโตเช่นพืชปกติ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ในขั้นต้นเคล็ดลับการถ่ายช่อดอกที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ (0.6-0.8cm ในเส้นผ่าศูนย์กลาง)
ใบส่วนชิ้นส่วนดอกตูมรักแร้ชิ้นรองรับจากสนามถูกนำ. แหล่งที่มาของชิ้นส่วนพืชจากสนามมีอัตราการปนเปื้อนสูงและช้าการเจริญเติบโตของวัฒนธรรมอันเนื่องมาจากการฆ่าเชื้อที่รุนแรงของชิ้นส่วนด้วยสารเคมีซึ่งสร้างความเสียหายจุดที่เพิ่มขึ้น มันถูกระบุว่าเป็นสาเหตุของปัญหานี้ราก เมล็ดในที่สุดผู้ใหญ่กำลังพยายามจัดตั้งการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเยอบีร่าเพราะวัฒนธรรมที่สะอาดสามารถรับได้ด้วยเมล็ด เมล็ดถูกล้างด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อที่มี 0.1% วิธีการแก้ปัญหา HgCl2 สองนาทีและล้างด้วยน้ำสะอาดผ่านการฆ่าเชื้อ เมล็ดงอกบน MS กลางพื้นฐาน (Murashige & Skoog, 1962) บดมวลเมล็ดงอกถูกนำมาใช้เป็นชิ้นส่วนสำหรับการผลิตแคลลัสในสื่อที่มี Kn, ปริญญาตรีและ 2,4-D (แต่ละ @ 1-5 มก. / ลิตร) เสริมด้วย glutamine และโพรลีน (แต่ละ5mg / ลิตร) แคลลัสที่ถูกสร้างใหม่ในสื่อที่มีปริญญาตรี NAA และ IBA (แต่ละ 1-5 มก. / ลิตร) เสริมด้วย 5mg / glutamine ลิตร โคลชิซินที่ใช้ @ 0-50 มก. / ลิตร เมล็ดหมันถูกจุ่มลงในการแก้ปัญหาการกรอง colchicine หมัน 6 ชั่วโมง. เมล็ดถูกเก็บไว้บนตะแกรงที่จะลบการแก้ปัญหา colchicine และล้างให้สะอาดด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ เมล็ดวางอยู่บนกระดาษกรองผ่านการฆ่าเชื้อที่ไม่จำเป็นในการดูดซับน้ำและการหว่านแล้วบนอาหารสูตร MS ฐานผลึกกับวุ้น 1% ค่า pH ของกลางเป็น5.8 และวัฒนธรรมที่ถูกเก็บไว้ในที่มีแสงวันปกติที่ 20 ± 5o ซี หลังจาก 10 วันเมล็ดงอกถูกบดขยี้ในจานเลี้ยงเชื้อด้วยใบมีดผ่านการฆ่าเชื้อและมวลเนื้อเยื่อที่ถูกเก็บไว้ในสื่อที่มี2, 4-D การดำเนินงานทั้งหมดได้ทำในสภาพแวดล้อมที่ผ่านการฆ่าเชื้อในชั้นตู้ไหลของอากาศ หลังจากหกสัปดาห์, แคลลัสที่ถูกเก็บไว้ในบริติชแอร์เวย์, NAA และ IBA (แต่ละ@ 1-5mg / ลิตร) ที่มีสื่อ หลังจากสองเดือนหน่ออาศัยถูกย้ายไปยังสูตร MS ที่มี BA, ไอบีเอ (แต่ละ 0.5mg / ลิตร) ต้นกล้าที่ได้รับการพัฒนาในที่สุดก็โอนไปยังกระถางในที่มีความชื้นสูงและปรับสภาพการเจริญเติบโตเช่นพืชปกติ
การแปล กรุณารอสักครู่..