AbstractIn this work, the suitabili

Abstract
In this work, the suitability of employing shallow pH gradients generated using single component buffer systems as eluents through cation-exchange (CEX) monolithic columns is demonstrated for the high-resolution separation of monoclonal antibody (mAb) charge variants in three different biopharmaceuticals. A useful selection of small molecule buffer species is described that can be used within very narrow pH ranges (typically 1 pH unit) defined by their buffer capacity for producing controlled and smooth pH profiles when used together with porous polymer monoliths. Using very low ionic strength eluents also enabled direct coupling with electrospray ionisation mass spectrometry. The results obtained by the developed pH gradient approach for the separation of closely related antibody species appear to be consistent with those obtained by imaged capillary isoelectric focusing (iCE) in terms of both resolution and separation profile. Both determinants of resolution, i.e., peak compression and peak separation contribute to the gains in resolution, evidently through the Donnan potential effect, which is increased by decreasing the eluent concentration, and also through the way electrostatic charges are distributed on the protein surface. Retention mechanisms based on the trends observed in retention of proteins at pH values higher than the electrophoretic pI are also discussed using applicable theories. Employing monolithic ion-exchangers is shown to enable fast method development, short analysis time, and high sample throughput owing to the accelerated mass transport of the monolithic media. The possibility of short analysis time, typically less than 15 min, and high sample throughput is extremely useful in the assessment of charge-based changes to the mAb products, such as during manufacturing or storage.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นามธรรม
ในงานนี้ความเหมาะสมของการใช้การไล่ระดับสี ph ตื้นสร้างขึ้นโดยใช้ระบบบัฟเฟอร์องค์ประกอบเดียวเป็นตัวชะที่ผ่านการแลกเปลี่ยนไอออนบวก (CEX) คอลัมน์เสาหินที่แสดงให้เห็นถึงการแยกความละเอียดสูงของโมโนโคลนอลแอนติบอดี (mab) สายพันธุ์ที่ค่าใช้จ่ายในสามชีวเวชภัณฑ์ที่แตกต่างกัน .เลือกที่มีประโยชน์ของสายพันธุ์ที่มีขนาดเล็กบัฟเฟอร์โมเลกุลอธิบายว่าสามารถนำมาใช้ในช่วง ph แคบมาก (โดยปกติหน่วย ph 1) กำหนดโดยความจุของบัฟเฟอร์ของพวกเขาสำหรับการผลิตการควบคุมและโปรไฟล์ ph เรียบเมื่อนำมาใช้ร่วมกับเสาหินที่มีรูพรุนพอลิเมอ โดยใช้ตัวชะแรงอิออนที่ต่ำมากนอกจากนี้ยังเปิดใช้งานการเชื่อมต่อโดยตรงกับ electrospray มวลสาร Ionisationผลที่ได้รับโดยวิธีการพัฒนา ph ลาดสำหรับการแยกชนิดของแอนติบอดีที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดดูเหมือนจะสอดคล้องกับผู้ที่ได้รับจากการถ่ายภาพ isoelectric เส้นเลือดฝอยที่มุ่งเน้น (น้ำแข็ง) ทั้งในแง่ของความละเอียดและรายละเอียดการแยก ปัจจัยทั้งสองของการแก้ปัญหาคือการบีบอัดสูงสุดและการแยกยอดนำไปสู่​​การเพิ่มขึ้นในความละเอียดที่เห็นได้ชัดผ่านผลกระทบที่อาจเกิดขึ้น DONNAN ซึ่งจะเพิ่มขึ้นโดยการลดความเข้มข้นของตัวชะและยังผ่านทางค่าใช้จ่ายไฟฟ้าสถิตจะกระจายบนพื้นผิวโปรตีน กลไกการรักษาขึ้นอยู่กับแนวโน้มที่สังเกตได้ในการเก็บรักษาของโปรตีนที่ค่า ph สูงกว่าปี่ electrophoretic นอกจากนี้ยังมีการกล่าวถึงการใช้ทฤษฎีที่สามารถใช้งานได้การใช้เสาหินแลกเปลี่ยนไอออนถูกแสดงเพื่อช่วยให้การพัฒนาอย่างรวดเร็ววิธีการวิเคราะห์เวลาสั้นและสามารถวิเคราะห์สารตัวอย่างเนื่องจากการขนส่งมวลเร่งของสื่อเสาหิน เป็นไปได้ของการวิเคราะห์เวลาสั้นมักจะน้อยกว่า 15 นาทีและสามารถวิเคราะห์สารตัวอย่างเป็นประโยชน์อย่างมากในการประเมินการเปลี่ยนแปลงของค่าใช้จ่ายที่ใช้ในการผลิตภัณฑ์ mab,เช่นในระหว่างการผลิตหรือการเก็บรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นามธรรม
ในงานนี้ ความเหมาะสมของการใช้ pH ตื้นไล่ระดับสีที่สร้างโดยใช้คอมโพเนนต์เดียวระบบบัฟเฟอร์เป็น eluents ผ่าน cation-แลกเปลี่ยน (CEX) เสาหินคอลัมน์จะแสดงการแบ่งแยกย่อย monoclonal แอนติบอดี (มาบ) ค่าธรรมเนียมใน biopharmaceuticals สามแตกต่างกันมีความละเอียดสูง เลือกประโยชน์ของโมเลกุลเล็กบัฟเฟอร์อธิบายชนิดที่สามารถใช้ได้ในช่วง pH แคบมาก (ค่า pH โดยปกติ 1 หน่วย) กำหนด โดยกำลังการผลิตของบัฟเฟอร์สำหรับการผลิตควบคุม และเรียบค่า pH เมื่อใช้ร่วมกับโรพอลิเมอร์ porous นอกจากนี้ยังใช้กำลังต่ำมาก ionic eluents ใช้คลัปโดยตรง ด้วยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ionisation รเมท ผลได้รับ โดยวิธีการไล่ระดับค่า pH ที่พัฒนาสำหรับแยกชนิดแอนติบอดีที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดจะ ต้องสอดคล้องกับผู้รับ โดย imaged รูพรุน isoelectric เน้น (น้ำแข็ง) ในส่วนกำหนดค่าความละเอียดและแยก ทั้งสองดีเทอร์มิแนนต์ของการแก้ปัญหา เช่น การบีบอัดสูงสุดและสูงสุดแยกเป็นส่วนหนึ่งของกำไรในความละเอียด กรีซ ผ่าน Donnan เกิด ผล ซึ่งจะเพิ่มขึ้น โดยลดความเข้มข้นของ eluent และ ผ่านทางค่าสถิตที่กระจายบนพื้นผิวโปรตีน กลไกการเก็บข้อมูลตามแนวโน้มในการเก็บข้อมูลของโปรตีนที่สูงกว่าปี่ด้วยค่า pH จะยังกล่าวโดยใช้ทฤษฎีที่เกี่ยวข้อง ใช้ไอออนแลกเปลี่ยนเสาหินแสดงวิธีที่รวดเร็วพัฒนา วิเคราะห์สั้นเวลา และสามารถประมวลผลได้อย่างสูง เพราะการขนส่งมวลชนเร่งสื่อเสาหิน สามารถวิเคราะห์สั้นเวลา โดยทั่วไปน้อยกว่า 15 นาที และสามารถประมวลผลได้อย่างสูงเป็นประโยชน์อย่างยิ่งในการประเมินผลของการเปลี่ยนแปลงตามค่าธรรมเนียมผลิตภัณฑ์มาบ เช่นในระหว่างการผลิตหรือจัดเก็บ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็นนามธรรม
ซึ่งจะช่วยในเรื่องนี้ทำงาน,ความเหมาะสมของใช้น้ำตื้น pH การไล่สีสร้างขึ้นโดยใช้คอมโพเนนต์เดียวบัฟเฟอร์ระบบ eluents ผ่านละออง - แลกเปลี่ยน( cex )เป็นเสาหินเสามีแสดงให้เห็นถึงการที่ความละเอียดสูงการแบ่งแยก monoclonal แอนทิบอด - อิ(ควบคุม)คิดค่าบริการแตกต่างกันในสาม biopharmaceuticals .ทางเลือกที่เป็นประโยชน์ของสายพันธุ์บัฟเฟอร์โมเลกุลขนาดเล็กเป็นที่อธิบายว่าสามารถใช้อยู่ในช่วงแคบมากค่า pH (ซึ่งโดยทั่วไปจะถูก 1 ชุด PH )ที่กำหนดไว้โดยความจุบัฟเฟอร์สำหรับการผลิตส่วนกำหนดค่า pH การควบคุมและเรียบเนียนเมื่อใช้ร่วมกับโล่งโพลิเมอร์ที่มีรูพรุน การใช้ความเข้มของฟังก์ชั่น Ionic ต่ำมาก eluents เปิดใช้งานการเชื่อมต่อโดยตรงกับ ionisation electrospray spectrometry จำนวนมากยังผลที่ได้รับจากการใช้การไล่ระดับสี pH พัฒนาขึ้นได้สำหรับการแยกสายพันธุ์ของแอนทิบอด - อิอย่างใกล้ชิดที่เกี่ยวข้องจะปรากฏขึ้นเพื่อให้สอดคล้องกับผู้ที่ได้รับการสร้างอิมเมจด้วยซอฟท์แวร์สร้างอิมเมจของบริษัทซึ่งมีรูเล็ก isoelectric โฟกัส(เย็น)ในเรื่องของความละเอียดและโปรไฟล์การแยก ตัวกำหนดทั้งสองของความละเอียดสูงสุดเช่นการบีบอัดและการแยกสูงสุดมีส่วนช่วยในการเพิ่มขึ้นในความละเอียดเห็นได้ชัดว่าผ่านมีผลต่อ ศักยภาพ donnan ซึ่งจะเพิ่มขึ้นโดยการลดการให้ความเอาใจใส่ eluent ได้และนอกจากนั้นยังมีค่าบริการผ่านทางไฟฟ้าสถิตมีการเผยแพร่บนพื้นผิวโปรตีนที่. กลไกการยึดกับแนวโน้มที่พบในการยึดของโปรตีนที่ PI ค่า pH สูงกว่า electrophoretic ที่จะกล่าวถึงการใช้ทฤษฎีที่เกี่ยวข้องด้วยใช้เป็นเสาหินไอออน - ฮัลลาไคลเมตคอนโทรลจะแสดงในการเปิดใช้งานการพัฒนาวิธีการอย่างรวดเร็วเวลาในการวิเคราะห์เพื่อไปถึงได้ไม่ไกลนักและความเร็วในการรับส่งข้อมูลสูงตัวอย่างจากการขนส่งมวลชนที่เร่งตัวขึ้นของสื่อที่เป็นเสาหิน ความเป็นไปได้ที่จะมีเวลาในการวิเคราะห์เพื่อไปถึงได้ไม่ไกลนักโดยทั่วไปแล้วไม่น้อยกว่า 15 นาทีและความเร็วในการรับส่งข้อมูลตัวอย่างสูงจะเป็นประโยชน์อย่างมากในการประเมินผลการปฏิบัติงานของการเปลี่ยนแปลงการชาร์จซึ่งใช้ในการสินค้าควบคุมได้เช่นในระหว่างการจัดเก็บหรือการผลิต.