Samples were stained according to a

Samples were stained according to an established protocol
(Alonso et al., 2012b, 2013c). Samples from cultures were accordingly
harvested by centrifugation at 16,000g for 5 min. Before
staining, cells were washed twice in phosphate-buffered saline
(PBS, pH 7.4, sterile and filtered at 0.22 lm). Propidium iodide
(PI, Invitrogen), bis-(1,3-dibutylbarbituric acid) trimethine oxonol
(bis-oxonol, DiBAC4(3), Invitrogen) and carboxyfluorescein diacetate
(cFDA, Invitrogen) were used as fluorescent dyes in a double
dual-staining procedure (DiBAC4(3)/PI and cFDA/PI) in order to
evaluate cell physiological status (metabolic activity, membrane
integrity and membrane polarization were evaluated through
cFDA, PI and DiBAC4(3) staining, respectively). Staining procedures
were conducted as previously reported by Alonso et al. (2012b).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างมีสีตามโพรโทคอลการกำหนดขึ้น(Alonso et al., 2012b, 2013c) ตัวอย่างจากวัฒนธรรมก็ตามเก็บเกี่ยว โดย centrifugation ที่ 16000 g สำหรับ 5 นาทีก่อนย้อมสี เซลล์ถูกล้างในน้ำเกลือฟอสเฟต buffered ครั้ง(PBS, pH 7.4 กรอง และฆ่าเชื้อที่$ 0.22 lm) ไอโอไดด์ Propidium(PI, Invitrogen), bis- (1,3-dibutylbarbituric กรด) oxonol trimethine(bis-oxonol, DiBAC4(3), Invitrogen) และ carboxyfluorescein diacetate(cFDA, Invitrogen) ใช้เป็นสีเรืองแสงใน doubleขั้นตอนการย้อมสีคู่ (DiBAC4 (3) /PI และ cFDA/PI) เพื่อประเมินสถานะสรีรวิทยาเซลล์ (กิจกรรมเผาผลาญ เมมเบรนสมบูรณ์และเมมเบรนโพลาไรซ์ได้ประเมินผ่านcFDA, PI และ DiBAC4(3) ย้อมสี ตามลำดับ) ขั้นตอนการย้อมสีได้ดำเนินการก่อนหน้านี้ที่ รายงานโดย Alonso et al. (2012b)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างสีตามโปรโตคอลที่จัดตั้งขึ้น
(อลอนโซ่ et al., 2012b, 2013c) ตัวอย่างจากวัฒนธรรมที่ถูกตามเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 16,000g เป็นเวลา 5 นาที ก่อนที่จะย้อมสีเซลล์ถูกล้างครั้งที่สองในน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์(พีบีเอสพีเอช 7.4 ผ่านการฆ่าเชื้อและกรองที่ 0.22 LM) ไอโอไดด์ Propidium (PI, Invitrogen) bis- (1,3-dibutylbarbituric กรด) trimethine oxonol (ทวิ oxonol, DiBAC4 (3), Invitrogen) และ carboxyfluorescein diacetate (CFDA, Invitrogen) ถูกนำมาใช้เป็นสีย้อมเรืองแสงในสองdual- ขั้นตอนการย้อมสี (DiBAC4 (3) / PI และ CFDA / PI) เพื่อประเมินสถานะทางสรีรวิทยาของเซลล์(กิจกรรมการเผาผลาญเมมเบรนความซื่อสัตย์และโพลาไรซ์เมมเบรนได้รับการประเมินผ่านCFDA, PI DiBAC4 และ (3) การย้อมสีตามลำดับ) ขั้นตอนการย้อมสีได้ดำเนินการตามที่รายงานก่อนหน้านี้โดยอลอนโซ่, et al (2012b)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จำนวนที่เปื้อนตามการสร้างโปรโตคอล
( อลอนโซ่ et al . , 2012b 2013c , ) ตัวอย่างจากวัฒนธรรมตามข้อมูลการเก็บเกี่ยวโดยการปั่นเหวี่ยงที่ 16000g

5 นาทีก่อนการย้อมสีเซลล์ถูกล้างสองครั้งในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (
( PBS , pH 7.4 , ฆ่าเชื้อและกรองที่ 0.22 LM ) propidium ไอโอไดด์
( พี , Invitrogen ) bis - ( 1,3-dibutylbarbituric acid ) trimethine oxonol
( oxonol ทวิ ,dibac4 ( 3 ) Invitrogen ) และ carboxyfluorescein ได ซิเตท
( CFDA Invitrogen , ) ถูกใช้เป็นหลอดสีในคู่สองขั้นตอน (
. dibac4 ( 3 ) / พี และ CFDA / PI ) เพื่อประเมินสถานภาพเซลล์สรีรวิทยา
( กิจกรรมการเผาผลาญเยื่อเมมเบรนประเมินความสมบูรณ์และโพลาไรเซชัน

CFDA ผ่าน , ปี่ และ ( 3 ) การ dibac4 ตามลำดับ ) ขั้นตอน
.การทดลองก่อนหน้านี้ที่รายงานโดยอลอนโซ่ et al . ( 2012b )