. IntroductionProviding a sufficien

. Introduction
Providing a sufficient number of cryopreserved spermatozoa for fertilization is a major challenge in the fish hatchery industry. The quality of cryopreserved rainbow trout sperm is low, so the number of cryopreserved spermatozoa required for successful fertilization is about 10 times higher than that for fresh semen (Billard, 1992). Low fertilization ability of cryopreserved semen is accompanied by low post-thaw motility (Lahnsteiner et al., 1996a). The low quality of cryopreserved semen negatively impacts rainbow trout breeding efforts. Therefore, improved techniques for rainbow trout sperm cryopreservation are needed.

Cryopreservation is used to preserve sperm for later use, but sperm can be damaged by the freezing and thawing process. To mitigate damage, extenders (media used to dilute sperm) containing cryoprotectants (compounds used to protect sperm from cold and heat shock and cytotoxicity) are used. Simple extenders that contain only permeable cryoprotectants and sugars as nonpermeable cryoprotectants have been used successfully to cryopreserve salmonid fish sperm. Permeable cryoprotectants include methanol, DMSO, DMA, and glycerol at concentrations of 5–25% and nonpermeable cryoprotectants, such as sucrose or glucose, at concentrations of 0.3–0.6 M (Bozkurt et al., 2005, Ekici et al., 2012, Holtz, 1993, Lahnsteiner et al., 1996b, Lahnsteiner et al., 1997, Mansour et al., 2006, Piironen, 1993, Sarvi et al., 2006 and Tekin et al., 2003). An extender consisting of 0.3 M glucose and 10% methanol has been used successfully to cryopreserve Arctic char semen (Mansour et al., 2006) and whitefish semen (Ciereszko et al., 2008 and Nynca et al., 2012). Our preliminary data suggest that such a simple extender is also effective for the cryopreservation of rainbow trout spermatozoa. However, our unpublished observations showed that post-thaw motility was low (Dietrich et al., unpublished), as is typical for cryopreserved rainbow trout spermatozoa (Lahnsteiner et al., 1996a).

Cryopreservation involves several parameters that need be fine-tuned to improve post-thaw survival. These factors include cryoprotectant type and concentration (Lahnsteiner et al., 1996a and Maisse, 1994), equilibration time (Babiak et al., 2001, Lahnsteiner et al., 1996b and Perez-Cerezales et al., 2010), and number of spermatozoa (Ciereszko et al., 2013). The aim of this study was to identify the optimal conditions (i.e., glucose concentration in the extender, equilibration time, and the sperm-to-extender ratio for semen dilution) for cryopreservation of rainbow trout semen. Sperm motility and fertilization rate were used as quantitative endpoint metrics.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. แนะนำให้จำนวน cryopreserved spermatozoa เพียงพอสำหรับการปฏิสนธิเป็นความท้าทายที่สำคัญในอุตสาหกรรมโรงเพาะปลา คุณภาพของอสุจิ cryopreserved เรนโบว์เทราต์เป็นต่ำ ดังนั้นจำนวน spermatozoa cryopreserved ที่จำเป็นสำหรับการประสบความสำเร็จในปัจจุบันเป็นประมาณ 10 เท่าสูงกว่าในน้ำเชื้อสด (billard ผู้ 1992) ความสามารถในการปฏิสนธิที่ต่ำของน้ำเชื้อ cryopreserved ตามมา ด้วย motility thaw หลังต่ำ (Lahnsteiner et al., 1996a) คุณภาพของน้ำเชื้อ cryopreserved ต่ำส่งผลกระทบต่อเรนโบว์เทราต์ที่พยายามปรับปรุงพันธุ์ ดังนั้น เทคนิคการปรับปรุงสำหรับเรนโบว์เทราต์สเปิร์ม cryopreservation จำเป็นCryopreservation ใช้รักษาอสุจิใช้ แต่อสุจิสามารถจะเสียหาย โดยการตรึง และ thawing เพื่อลดความเสียหาย extenders (สื่อใช้ dilute อสุจิ) ที่มี cryoprotectants (สารใช้ในการป้องกันไม่ให้อสุจิไล่ความร้อนและเย็นและ cytotoxicity) จะใช้ Extenders อย่างที่ประกอบด้วยเฉพาะ permeable cryoprotectants และน้ำตาลเป็น nonpermeable cryoprotectants มีการใช้เรียบร้อยแล้ว cryopreserve ปลา salmonid สเปิร์ม Permeable cryoprotectants ได้แก่เมทานอล DMSO, DMA และกลีเซอรที่ความเข้มข้น 5 – 25% และ cryoprotectants nonpermeable เช่นซูโครสหรือกลูโคส ที่ความเข้มข้นของ 0.3 – 0.6 M (Bozkurt et al., 2005, Ekici et al., 2012, Holtz, 1993, Lahnsteiner et al., 1996b, Lahnsteiner และ al., 1997, Mansour et al., 2006, Piironen, 1993, Sarvi และ al., 2006 และ Tekin et al., 2003) Extender 0.3 M กลูโคสและ 10% เมทานอลประกอบด้วยมีการใช้เรียบร้อยแล้วกับ cryopreserve น้ำเชื้ออักขระอาร์กติก (Mansour et al., 2006) และ whitefish น้ำเชื้อ (Ciereszko et al., 2008 และ Nynca et al., 2012) ข้อมูลเบื้องต้นแนะนำว่า extender อย่างเป็นการ cryopreservation spermatozoa เรนโบว์เทราต์ของ อย่างไรก็ตาม เราสังเกตประกาศแสดงให้เห็นว่า motility thaw หลังอยู่ในระดับต่ำ (al. et ดีทริช ยกเลิกประกาศ), ตามที่เป็นปกติสำหรับ cryopreserved เรนโบว์เทราต์ spermatozoa (Lahnsteiner et al., 1996a)Cryopreservation เกี่ยวข้องกับพารามิเตอร์ต่าง ๆ ที่จำเป็นต้องปรับแต่งเพิ่มอยู่รอดหลัง thaw ปัจจัยเหล่านี้มีความเข้มข้น (Lahnsteiner et al., 1996a และ Maisse, 1994), และชนิด cryoprotectant เวลา equilibration (Babiak และ al., 2001, Lahnsteiner et al., 1996b และเปเรซ Cerezales et al., 2010), และจำนวน spermatozoa (Ciereszko et al., 2013) จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการ ระบุเงื่อนไขที่เหมาะสม (เช่น กลูโคสความเข้มข้นใน extender เวลา equilibration และอัตราส่วนของอสุจิ extender สำหรับเจือจางน้ำเชื้อ) สำหรับ cryopreservation ของน้ำเชื้อที่เรนโบว์เทราต์ อัตรา motility และการปฏิสนธิของอสุจิได้ใช้เป็นการวัดเชิงปริมาณปลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

.
การแนะนำให้จำนวนที่เพียงพอของตัวอสุจิแช่แข็งสำหรับการปฏิสนธิเป็นความท้าทายที่สำคัญในอุตสาหกรรมโรงเพาะฟักปลา คุณภาพของสเปิร์มเรนโบว์เทราท์แช่แข็งอยู่ในระดับต่ำดังนั้นจำนวนตัวอสุจิแช่แข็งที่จำเป็นสำหรับการประสบความสำเร็จในการปฏิสนธิประมาณ 10 เท่าสูงกว่าที่น้ำอสุจิสด (Billard, 1992) ความสามารถในการปฏิสนธิต่ำของน้ำอสุจิแช่แข็งจะมาพร้อมกับการเคลื่อนไหวหลังการละลายต่ำ (Lahnsteiner et al., 1996a) ที่มีคุณภาพต่ำของน้ำอสุจิแช่แข็งผลกระทบในเชิงลบความพยายามเพาะพันธุ์เรนโบว์เทราท์ ดังนั้นเทคนิคที่ดีขึ้นสำหรับการเก็บรักษาสเปิร์มเรนโบว์เทราท์ที่มีความจำเป็น. Cryopreservation จะใช้ในการรักษาสเปิร์มเพื่อใช้ในภายหลัง แต่สเปิร์มได้รับความเสียหายจากการแช่แข็งและขั้นตอนการละลาย เพื่อลดความเสียหายยืด (สื่อที่ใช้ในการเจือจางสเปิร์ม) ที่มี cryoprotectants (สารประกอบที่ใช้ในการป้องกันสเปิร์มจากการกระแทกที่หนาวเย็นและความร้อนและพิษ) จะใช้ ยืดที่เรียบง่ายที่มี cryoprotectants ซึมเข้าไปได้เท่านั้นและน้ำตาลเป็น cryoprotectants nonpermeable ได้ถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จกับสเปิร์ม cryopreserve ปลา salmonid cryoprotectants ดูดซึม ได้แก่ เมทานอล DMSO, DMA และกลีเซอรีนที่ความเข้มข้น 5-25% และ cryoprotectants nonpermeable เช่นซูโครสหรือน้ำตาลกลูโคสที่ความเข้มข้น 0.3-0.6 M (Bozkurt et al., 2005 Ekici et al., 2012, โฮลต์ซ 1993 Lahnsteiner et al., 1996b, Lahnsteiner et al., 1997 Mansour et al., 2006 Piironen 1993 Sarvi et al., 2006 และ Tekin et al., 2003) ขยายประกอบด้วย 0.3 M กลูโคสและเมทานอล 10% ได้รับการใช้ประสบความสำเร็จในการ cryopreserve น้ำอสุจิขั้วถ่าน (Mansour et al., 2006) และน้ำอสุจิสัด (Ciereszko et al., 2008 และ Nynca et al., 2012) ข้อมูลเบื้องต้นของเราแสดงให้เห็นว่าดังกล่าวขยายง่ายนอกจากนี้ยังเป็นที่มีประสิทธิภาพสำหรับการเก็บรักษาตัวอสุจิปลาเทราท์รุ้ง อย่างไรก็ตามข้อสังเกตที่ไม่ได้เผยแพร่ของเราแสดงให้เห็นว่าการเคลื่อนไหวของการโพสต์ละลายอยู่ในระดับต่ำ (ทริช et al., ไม่ถูกเผยแพร่) เช่นเป็นเรื่องปกติสำหรับเรนโบว์เทราท์แช่แข็งอสุจิ (Lahnsteiner et al., 1996a). Cryopreservation เกี่ยวข้องกับพารามิเตอร์หลายอย่างที่จำเป็นต้องปรับเพื่อ เพิ่มอัตราการรอดชีวิตหลังการละลาย ปัจจัยเหล่านี้รวมถึงประเภท cryoprotectant และความเข้มข้น (Lahnsteiner et al., 1996a และ Maisse, 1994) เวลาสมดุล (Babiak et al., 2001, Lahnsteiner et al., 1996b และ Perez-Cerezales et al., 2010) และจำนวนของ สเปิร์ม (Ciereszko et al., 2013) จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการระบุสภาวะที่เหมาะสม (เช่นความเข้มข้นของกลูโคสในขยายเวลาสมดุล, และอัตราสเปิร์มต่อการขยายสำหรับการเจือจางน้ำเชื้อ) สำหรับเก็บรักษาของน้ำอสุจิเรนโบว์เทราท์ การเคลื่อนไหวของอสุจิและอัตราการปฏิสนธิถูกนำมาใช้เป็นตัวชี้วัดเชิงปริมาณปลายทาง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. บทนำ
ให้หมายเลขเพียงพอสำหรับการตรวจสอบคุณภาพของอสุจิ ความท้าทายหลักในปลาที่ฟักไข่ในอุตสาหกรรม คุณภาพของการตรวจสอบคุณภาพของปลาเรนโบว์เทราท์สเปิร์มต่ำ ดังนั้นจำนวนของที่จำเป็นสำหรับการตรวจสอบคุณภาพของอสุจิที่ประสบความสำเร็จเป็น 10 ครั้งสูงกว่าสำหรับน้ำเชื้อสด ( บิลเลียด , 1992 )ความสามารถในการปฏิสนธิของอสุจิต่ำตรวจสอบคุณภาพงานโดยการเคลื่อนที่ละลายหลังต่ำ ( lahnsteiner et al . , 1996a ) ตรวจสอบคุณภาพน้ำเชื้อคุณภาพต่ำผลกระทบปลาเรนโบว์เทราท์ในความพยายามในการปรับปรุงพันธุ์ ดังนั้นเทคนิคการปรับปรุงสำหรับปลาเรนโบว์เทราท์เชื้ออสุจิเป็น

ใช้รักษาเชื้ออสุจิเพื่อใช้ในภายหลังแต่อสุจิสามารถความเสียหายจากการแช่แข็งและละลายในกระบวนการ เพื่อลดความเสียหาย ยืด ( ใช้สื่อเพื่อเจือจางสารป้องกันโปรตีนเสียสภาพเนื่องจาก ( อสุจิ ) ประกอบด้วยสารประกอบที่ใช้ป้องกันสเปิร์มจากความเย็นและความร้อนช็อกและความเป็นพิษต่อเซลล์ ) จะใช้สูตรง่ายๆที่ประกอบด้วยสารป้องกันโปรตีนเสียสภาพเนื่องจากการไหลซึมผ่านได้เท่านั้น และ nonpermeable น้ำตาลเป็นสารป้องกันโปรตีนเสียสภาพเนื่องจากถูกใช้เรียบร้อยแล้ว cryopreserve salmonid ปลาสเปิร์ม สามารถดูดซึมสารป้องกันโปรตีนเสียสภาพเนื่องจากประกอบด้วยเมทานอล DMSO DMA และกลีเซอรอล , ระดับความเข้มข้น 5 – 25 % และสารป้องกันโปรตีนเสียสภาพเนื่องจาก nonpermeable เช่นซูโครสหรือน้ำตาล ที่ความเข้มข้น 0.3 - 0.6 m ( bozkurt et al . , 2005 ซี่ et al . ,2012 , Holtz ในปี 1993 , lahnsteiner , et al . , 1996b lahnsteiner , et al . , 1997 , Mansour et al . , 2006 , piironen 1993 sarvi , et al . , 2006 และ tekin et al . , 2003 ) เป็นสารซึ่งประกอบด้วยกลูโคส 0.3 เมตรและ 10 เปอร์เซ็นต์เมทานอลได้ใช้เรียบร้อยแล้ว เพื่อ cryopreserve ถ่านอาร์กติกน้ำเชื้อ ( Mansour et al . , 2006 ) และปลาน้ำอสุจิ ( ciereszko et al . , 2008 และ nynca et al . , 2012 )ข้อมูลเบื้องต้นบ่งชี้ว่าเป็น Extender ง่ายยังมีประสิทธิภาพสำหรับการเก็บรักษาอสุจิของปลาเรนโบว์เทราท์ . อย่างไรก็ตาม สังเกตพิมพ์ของเรา พบว่า หลังละลายการเคลื่อนที่ต่ำ ( ดีทริช et al . , พิมพ์ ) , เป็นปกติเพื่อตรวจสอบคุณภาพของปลาเรนโบว์เทราท์ 5 ( lahnsteiner et al . ,

1996a )เนื่องจากเกี่ยวข้องกับหลายพารามิเตอร์ที่ต้องปรับจูนเพื่อปรับปรุงหลังละลาย การอยู่รอด ปัจจัยเหล่านี้รวมถึงชนิดและความเข้มข้นของน้ำยา ( lahnsteiner et al . , 1996a และ maisse , 1994 ) เวลา equilibration ( babiak et al . , 2001 , lahnsteiner et al . , 1996b และ เปเรซ cerezales et al . , 2010 ) , และจำนวนของอสุจิ ( ciereszko et al . , 2013 )จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือ เพื่อศึกษาสภาวะที่เหมาะสม ( เช่น ความเข้มข้นของกลูโคสใน Extender , เวลา , equilibration และอัตราส่วนสารเจือจางน้ำเชื้ออสุจิสำหรับ ) สำหรับการเก็บรักษาน้ำเชื้อของปลาเรนโบว์เทราท์ . การเคลื่อนที่ของอสุจิและอัตราการใส่ปุ๋ยที่ใช้เป็นตัวชี้วัดเชิงปริมาณข้อมูล .