Neutral red assayThe neutral red as

Neutral red assay
The neutral red assay is based on the initial protocol described by Borenfreund and Puerner (1984) and determines the accumulation of the neutral red dye in the lysosomes of viable, uninjured cells.
Following exposure to CdCl2 cells were incubated for 2 h with neutral red dye (100 μg/ml) dissolved in serum free medium (DMEM or MEM for HTC and HepG2 cells, respectively). The pH of the neutral red solution was adjusted in all the experiments to 6.35 with the addition of KH2PO4 (1 M). Cells were then washed with Phosphate Buffered Saline (PBS) and the addition of 1 ml of elution medium (EtOH/AcCOOH, 50%/1%) followed by gentle shaking for 10 min so that complete dissolution was achieved. Aliquots of the resulting solutions were transferred to 96-well plates and absorbance at 540 nm was recorded using the microplate spectrophotometer system (Spectra max190-Molecular Devices). Results were analyzed with the Soft max pro software (version 2.2.1) and are presented as percentage of control values.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบโทนสีแดงการทดสอบสีแดงโทนตามโพรโทคอลเริ่มต้นที่อธิบายไว้ โดย Borenfreund และ Puerner (1984) และกำหนดสะสมของย้อมสีแดงโทนใน lysosomes ของเซลล์ทำงานได้ uninjuredต่อแสง CdCl2 เซลล์ได้รับการกก 2 ชม.กับโทนสีแดง (100 μมิลลิลิตร) ละลายในซีรั่มฟรีปานกลาง (DMEM หรือ MEM สำหรับ HTC และ HepG2 เซลล์ ตามลำดับ) ปรับปรุงค่า pH ของโทนแดงโซลูชันในการทดลองกับ 6.35 ของ KH2PO4 (1 เมตร) เซลล์ถูกล้างแล้ว ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ Saline (PBS) และนอกเหนือจาก 1 ml ของกลางชะ (คะแนน/AcCOOH, 50/1%) ตาม ด้วยอ่อนโยนสั่น 10 นาทีเพื่อให้สำเร็จสมบูรณ์ยุบ Aliquots ของการแก้ปัญหาได้ถูกโอนไปจาน 96 หลุมและค่าที่ 540 nm บันทึกโดยใช้ระบบ microplate สเปค (สเปกตรัม max190 โมเลกุลอุปกรณ์) ผลลัพธ์ถูกวิเคราะห์ ด้วยนุ่มสูงซอฟต์แวร์มืออาชีพ (รุ่น 2.2.1) และได้แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของค่าควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Neutral ทดสอบสีแดง
ผลการวิเคราะห์สีแดงที่เป็นกลางจะขึ้นอยู่กับโปรโตคอลเริ่มต้นอธิบายโดย Borenfreund และ Puerner (1984) และกำหนดสะสมของสีย้อมสีแดงเป็นกลางในการ lysosomes ของที่ทำงานได้เซลล์ที่ได้รับบาดเจ็บ. การ
ดังต่อไปนี้การสัมผัสกับเซลล์ CdCl2 ถูกบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมงกับ เป็นกลางสีย้อมสีแดง (100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ละลายในซีรั่มขนาดกลางฟรี (DMEM หรือ MEM สำหรับ HTC และ HepG2 เซลล์ตามลำดับ) ค่า pH ของการแก้ปัญหาสีแดงที่เป็นกลางมีการปรับในการทดลองทั้งหมดเพื่อ 6.35 ด้วยนอกเหนือจาก KH2PO4 นี้ (1 M) เซลล์ที่ถูกล้างแล้วกับฟอสเฟต Buffered Saline (PBS) และนอกเหนือจาก 1 มิลลิลิตรของกลางชะ (EtOH / AcCOOH 50% / 1%) ตามด้วยอ่อนโยนเขย่าเป็นเวลา 10 นาทีเพื่อให้สลายตัวสมบูรณ์ก็ประสบความสำเร็จ aliquots ของการแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นถูกโอนไปยังแผ่น 96 หลุมและการดูดกลืนแสงที่ 540 นาโนเมตรได้รับการบันทึกการใช้ระบบไมโคร spectrophotometer (การ Spectra max190 โมเลกุลอุปกรณ์) ผลที่ได้มาวิเคราะห์ด้วยซอฟต์แวร์โปรซอฟท์แม็กซ์ (เวอร์ชั่น 2.2.1) และได้แสดงเป็นร้อยละของค่าการควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สีแดง ) เป็นกลาง( สีแดงที่เป็นกลางจะขึ้นอยู่กับโปรโตคอลและเริ่มต้นอธิบายโดย borenfreund puerner ( 1984 ) และกำหนดปริมาณการสะสมของสีแดงที่เป็นกลางในไลโซโซมของรัฐ การทำร้ายเซลล์ต่อไปนี้การ cdcl2 เซลล์ถูกบ่ม 2 ไหม H กับเป็นกลางสีแดงย้อม ( 100  μ g / ml ) ซีรั่มละลายในสื่อฟรี ( dmem สำหรับ HTC หรือแหม่มและเซลล์มะเร็งตับ ตามลำดับ ) pH ของสารละลายที่เป็นกลาง คือ สีแดงปรับในการทดลองทั้งหมด คือมีการเพิ่ม kh2po4 ( 1 ไหม M ) เซลล์แล้วล้างด้วยเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ) และเพิ่ม 1 มิลลิลิตร ( เอโตะ ( รึเปล่า ) / accooh 50% / 1 % ) รองลงมา คือ อ่อนโยน เขย่า 10 มั้ย มินที่สมบูรณ์ถูกยุบได้ เฉยๆของโซลูชั่นที่เกิดมีการโอนและค่า 96 ดีจาน 540 รึเปล่า nm ได้รับการบันทึกโดยใช้ระบบเครื่องพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( สเปกตรัมของโมเลกุล max190 อุปกรณ์ ) วิเคราะห์ผลด้วยนุ่ม Max Pro ซอฟต์แวร์ ( เวอร์ชั่น 2.2.1 ) และจะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของค่าควบคุม