2.1. Plant materials and culture co

2.1. Plant materials and culture conditions
Seeds of different silybium genotypes collected from different
environmental locations (Kafr-El-Shiekh, Asuiet, El-Menia,
Beni-Sewaf, El-Fayuim and Agricultural road of Alexandria)
were surface sterilized with 70% ethanol for 1 min, followed
by 30% commercial Clorox (contained 5.25% sodium hypochlorite)
for 20 min. After three successive rinses in sterile distilled
water, sterilized seeds were cultured on MS [7] basal
medium supplemented with 30 g L1 sucrose, 100 mgL1
myo-inositol and solidified with 7 gL1 agar.
All media were autoclaved (121 C and a pressure of
1.2 kg cm2 for 20 min) and the pH was adjusted to 5.8 (using
1 M NaOH or HCl). All cultures were incubated in the growth
chamber for 1 month at 25 ± 2 C under a 16-h photoperiod
(irradiance of about 40 mmol m2 s
1 provided by cool white
fluorescent lamps).
2.2. Establishment of callus cultures
When the seedling reached 30 days old, leaves (about 0.25 cm
in length) of all genotypes were excised from different S.
marianum seedlings and then cultured on MS-basal-medium
supplemented with 0.25 mg L1 2,4-D + 0.25 mgL1 Kin.
Cultures were incubated in a growth chamber for one month
for callus initiation. Calli cultures were subcultured monthly
for 6 months on that medium for increasing of calli tissues
for further experiments.
2.3. Establishment of shoot cultures
Shoot tips of genotype A, (Collected from Agricultural road of
Alexandria) and genotype B, (Collected from El-Fayuim) were
isolated from aseptically germinated seeds and transferred to
MS-medium supplemented with 0.0, 0.25, 0.5 or 1.0 mgL1
NAA in combination with 0.0, 0.25, 0.5 or 1.0 mgL1 BA.
These experiments were set up in a completely randomized design
and repeated two times. Each treatment has three replications.
Shoot number (longer than 1 cm), and shoot length
(cm), were recorded after one month of cultivation. All cultures
were maintained in the same environmental conditions
mentioned before. The number of shoots per explant and
shoot lengths were recorded after one month. Data obtained
were subjected to statistical analysis [8].
2.4. Prec

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1 การปลูกวัสดุและสภาพวัฒนธรรมเมล็ดพันธุ์ของ silybium แตกต่างจากที่อื่นสถานสิ่งแวดล้อม (Kafr-เอล-Shiekh, Asuiet, El-Meniaถนน Beni-Sewaf, El Fayuim และเกษตรของ Alexandria)มีพื้นผิว sterilized ด้วย 70% เอทานอลในนาทีที่ 1 ตามโดย 30% Clorox พาณิชย์ (อยู่ 5.25% ฟอก)สำหรับ 20 นาที หลังจาก rinses ต่อเนื่องสามในกอซกลั่นน้ำ sterilized เมล็ดมีอ่างบน MS [7] โรคสื่อเสริม ด้วย 30 กรัมซูโครส L1, 100 mgL1myo-inositol และแข็งกับ 7 gL1 agarสื่อทั้งหมดถูก autoclaved (121 C และความดันของ1.2 kg cm2 สำหรับ 20 นาที) และมีปรับ pH 5.8 (ใช้1 M NaOH หรือ HCl) วัฒนธรรมทั้งหมดถูก incubated ในการเจริญเติบโตใน 1 เดือนที่ 25 ± 2 C ภายใต้ชั่วโมง 16 h(irradiance ของประมาณ 40 mmol m2 sโดยขาวเย็น 1หลอดฟลูออเรสเซนต์)2.2 การจัดตั้งวัฒนธรรมให้เมื่อแหล่งที่ถึงอายุ 30 วัน ใบ (ประมาณ 0.25 ซม.ความยาว) ของทั้งหมดถูก excised จาก s แตกต่างกันได้กล้าไม้ marianum และอ่างแล้ว ใน MS-โรคปานกลางเสริม ด้วย L1 mgL1 2, 4-D + 0.25 0.25 mg กินวัฒนธรรมถูก incubated ในหอเจริญเติบโตในหนึ่งเดือนสำหรับการเริ่มต้นให้ วัฒนธรรม Calli ได้ subcultured เดือนสำหรับ 6 เดือนบนกลางที่เพิ่มขึ้นของเนื้อเยื่อ calliการทดลองต่อไป2.3 การก่อตั้งวัฒนธรรมการยิงเคล็ดลับของลักษณะทางพันธุกรรม A ยิง (รวบรวมจากถนนเกษตรของซานเดรีย) และลักษณะทางพันธุกรรมได้ B (Collected จากเอล-Fayuim)แยกต่างหากจากเมล็ดเปลือกงอก aseptically และโอนย้ายไปMS-สื่อเสริม ด้วย 0.0, 0.25, 0.5 หรือ 1.0 mgL1NAA ร่วมกับ 0.0, 0.25, 0.5 หรือ 1.0 mgL1 บาทดลองเหล่านี้ถูกตั้งค่าในแบบ randomized สมบูรณ์และซ้ำสองครั้ง ทรีตเมนท์มีสามระยะยิงเลข (ยาวเกินกว่า 1 ซม.), และยิงยาว(ซม.), บันทึกหลังจากหนึ่งเดือนของการเพาะปลูก วัฒนธรรมทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ในสภาพแวดล้อมเดียวกันดังกล่าวก่อน จำนวนต่อ explant ที่ถ่ายภาพ และยิง ยาวถูกบันทึกหลังจากหนึ่งเดือน ข้อมูลที่ได้รับได้อยู่ภายใต้การวิเคราะห์ทางสถิติ [8]2.4. Prec

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 วัสดุพืชและเงื่อนไขวัฒนธรรมเมล็ดพันธุ์ของยีน silybium ที่แตกต่างกันที่เก็บได้จากที่แตกต่างกันสถานที่สิ่งแวดล้อม(คาฟร์-El-Shiekh, Asuiet, El-Menia, Beni-Sewaf, El-Fayuim และถนนเกษตรซานเดรีย) ถูกพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อด้วยเอทานอล 70% 1 นาทีตาม30% ในเชิงพาณิชย์ Clorox (ที่มีอยู่ 5.25% โซเดียมไฮโปคลอไรต์) สำหรับ 20 นาที หลังจากสาม rinses เนื่องในกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อน้ำเมล็ดฆ่าเชื้อเพาะเลี้ยงบนMS [7] ฐานกลางเสริมด้วย30 กรัม L1 ซูโครส 100 mgL1 myo-ทอและผลึก 7 GL1 วุ้น. สื่อทั้งหมดถูกเบา (121 C และความดันของ1.2 กก. cm2 เป็นเวลา 20 นาที) และพีเอชที่ถูกปรับ 5.8 (โดยใช้1 M NaOH หรือ HCl) วัฒนธรรมทั้งหมดถูกบ่มในการเจริญเติบโตในห้องเป็นเวลา 1 เดือน ณ วันที่ 25 ± 2 องศาเซลเซียสภายใต้แสง 16 ชั่วโมง (รังสีประมาณ 40 มิลลิโมล m2 s 1 ให้โดยสีขาวนวลหลอด). 2.2 การจัดตั้งวัฒนธรรมแคลลัสเมื่อต้นกล้าถึงอายุ 30 วันใบ (ประมาณ 0.25 ซม. ยาว) ของยีนทั้งหมดถูกตัดจากเอสที่แตกต่างกันต้นกล้าmarianum แล้วเลี้ยงบน MS-ฐานกลางเสริมด้วย0.25 มิลลิกรัม L1 2,4-D + 0.25 mgL1 Kin. วัฒนธรรมถูกบ่มในห้องการเจริญเติบโตสำหรับหนึ่งเดือนสำหรับการเริ่มต้นแคลลัส วัฒนธรรมแคลลัสที่ถูกเลี้ยงรายเดือนเป็นเวลา 6 เดือนในสื่อที่เพิ่มขึ้นของเนื้อเยื่อแคลลัสสำหรับการทดลองต่อไป. 2.3 การจัดตั้งวัฒนธรรมยิงยิงเคล็ดลับของจีโนไทป์ A, (รวบรวมจากถนนเกษตรของซานเดรีย) และพันธุ์ B (รวบรวมจาก El-Fayuim) ได้รับการแยกออกจากเมล็ดงอกปลอดเชื้อและโอนไปยังMS-กลางเสริมด้วย 0.0, 0.25, 0.5 หรือ 1.0 mgL1 NAA ร่วมกับ 0.0, 0.25, 0.5 หรือ 1.0 mgL1 BA. การทดลองเหล่านี้ถูกตั้งขึ้นมาในแบบสุ่มสมบูรณ์และทำซ้ำครั้งที่สอง การรักษาแต่ละคนมีสามซ้ำ. ยิงจำนวน (นานกว่า 1 เซนติเมตร) และระยะเวลาในการถ่ายภาพ(ซม.) ที่ถูกบันทึกไว้หลังจากหนึ่งเดือนของการเพาะปลูก วัฒนธรรมทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ในสภาพแวดล้อมเดียวกันกล่าวก่อน จำนวนยอดต่อชิ้นและยิงยาวที่ถูกบันทึกไว้หลังจากหนึ่งเดือน ข้อมูลที่ได้ถูกยัดเยียดให้การวิเคราะห์ทางสถิติ [8]. 2.4 prec

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . วัสดุปลูกและเพาะเลี้ยงเมล็ดพันธุ์ที่แตกต่างกัน silybium
เก็บจากสถานที่สิ่งแวดล้อมที่แตกต่างกัน
( Kafr El shiekh asuiet เอล Menia
, , , เบนิ sewaf เอล fayuim การเกษตรและถนนซานเดรีย )
ถูกฆ่าเชื้อที่ผิวด้วยแอลกอฮอล์ 70% 1 นาที ตามด้วยคลอรอกซ์ (
30% เชิงพาณิชย์ที่มีอยู่ร้อยละ 5.25 โซเดียม ไฮโปคลอไรท์ )
เป็นเวลา 20 นาทีหลังจากที่สาม rinses ต่อเนื่องในงานกลั่น
น้ำฆ่าเชื้อเมล็ดเพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS [ 7 ] แรกเริ่ม
เติม 30 g l1 ซูโครส , 100 mgl1
เมียว inositol และแข็งกับวุ้น 7 gl1 .
สื่อทั้งหมดถูกสังเคราะห์ ( 121 องศาเซลเซียส และที่ความดัน
1.2 kg cm2 20 นาที ) และอ มีการปรับดีขึ้น ( ใช้
1 M NaOH หรือ HCl ) วัฒนธรรมทั้งหมดถูกบ่มในการเจริญเติบโต
ห้องสำหรับ 1 เดือนที่ 25 ± 2 องศาเซลเซียสภายใต้แสง 16-h
( ดังกล่าวประมาณ 40 มิลลิโมล m2 S
1 โดยหลอดไฟเรืองแสงสีขาวเย็น

) . . . สถานประกอบการของแคลลัสวัฒนธรรม
เมื่อต้นกล้าถึง 30 วัน ใบ ( ประมาณ 0.25 ซม.
ในความยาว ) ทุกสายพันธุ์ ถูกตัดจากที่แตกต่างกัน s .
marianum แล้วต้นกล้าเพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS ที่เสริมด้วยฐานกลาง 0.25 มิลลิกรัม 2 L1
025 mgl1 พกษ
วัฒนธรรมถูกบ่มในการเจริญเติบโตห้องหนึ่งเดือน
สำหรับการเริ่มต้นเป็นแคลลัส วัฒนธรรมเป็นแคลลัส subcultured รายเดือน
6 เดือนในขนาดกลางเพื่อเพิ่มเนื้อเยื่อของแคลลัสในการทดลองต่อไป
.
2.3 การยิงยิงเคล็ดลับของจีโนไทป์เป็นวัฒนธรรม
( รวบรวมจากถนนเกษตร
Alexandria ) และจีโนทัยป์ B ( รวบรวมจาก El fayuim )
ที่แยกได้จาก aseptically เมล็ดงอกและโอน

อาหารสูตร MS ที่เติม 0 , 0.25 , 0.5 และ 1.0 mgl1
NAA ร่วมกับ 0.0 0.25 , 0.5 และ 1.0 mgl1 BA .
การทดลองเหล่านี้ถูกสร้างขึ้นใน CRD
ซ้ำ 2 ครั้ง การรักษาแต่ละครั้งมี 3 ซ้ำ
ยิงหมายเลข ( ยาวกว่า 1 ซม. ) ความยาว ( ซม. ) และยิง
,ที่ถูกบันทึกไว้หลังจากหนึ่งเดือนของการเพาะปลูก วัฒนธรรมทั้งหมด
ถูกรักษาในสภาพแวดล้อมเดียวกัน
กล่าวก่อน จำนวนยอดต่อชิ้นส่วนพืชและ
ยาวยิงได้ถูกบันทึกไว้หลังจากหนึ่งเดือน ข้อมูลถูกวิเคราะห์ทางสถิติ
[ 8 ] .
2.4 . ทศนิยม