2.3.4. Free and total sulphydrylsFr

2.3.4. Free and total sulphydrylsFree and total sulphydryl groups of protein samples weredetermined using the method developed by Beveridge et al.(1974) and Thannauser et al. (1984), respectively. Samples(1 mg/mL) were suspended in 0.086 mol/L Tris-HCl–0.09 mol/Lglycine–4 mmol/L EDTA–8 mol/L urea–pH 8 buffer. Disper-sions were stirred at 25◦C during 10 min at 500 rpm ina thermomixer and then centrifuged at 15,000×g (10 min,10◦C). Supernatant was incubated with Ellman’s reagent (4 mgDTNB/mL methanol) and 1 mL NTSB was used in the caseof the total sulphydryls. Absorbance at 412 nm was mea-sured in a Genesys-20 spectrophotometer (Thermo Scientific,Waltham, MA, USA). The molar extinction coefficient of 3-thio-6-nitrobenzoate (TNB; 13,600 L mol−1cm−1) was used. Proteinconcentration of extracts was determined by the Bradfordmethod (Bradford, 1976).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กับ 2.3.4 ฟรี และรวมกลุ่ม sulphydryl sulphydrylsFree และผลรวมของโปรตีนตัวอย่าง weredetermined โดยใช้วิธีการพัฒนา โดยเบเวอริดจ์ et al.(1974) และ Thannauser et al. (1984), ตามลำดับ ตัวอย่าง (1 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) ถูกหยุดชั่วคราวใน 0.086 L ทริ-HCl – 0.09 โมล/Lglycine – 4 mmol/L EDTA – 8 โมล/L ยูเรีย – ค่า pH 8 บัฟเฟอร์ Disper sions ได้กวนที่ 25◦C ในช่วง 10 นาทีที่ 500 รอบต่อนาที ina thermomixer และเหวี่ยงแล้ว 15, 000 × g (10 นาที 10◦C) Supernatant ได้รับการกกกับรีเอเจนต์ของ Ellman (เมทานอ mgDTNB/mL ที่ 4) และใช้ 1 มิลลิลิตร NTSB ได้ caseof sulphydryls ทั้งหมด Absorbance ที่ 412 นาโนเมตรถูก mea-การณ์ใน spectrophotometer Genesys 20 (วิทยาศาสตร์เทอร์โม นีซ MA สหรัฐอเมริกา) ใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียโมเลกุลของ 3-ทิว-6-nitrobenzoate (ธนบรรณ mol−1cm−1 13,600 L) Proteinconcentration สารสกัดจากถูกกำหนด โดย Bradfordmethod (แบรดฟอร์ด 1976)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3.4 ฟรีและรวม sulphydrylsFree และกลุ่ม sulphydryl รวมของตัวอย่างโปรตีน weredetermined โดยใช้วิธีการที่พัฒนาขึ้นโดยเวริ et al. (1974) และ Thannauser et al, (1984) ตามลำดับ ตัวอย่าง (1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) ถูกระงับใน 0.086 โมล / ลิตร Tris-HCl-0​​.09 mol / Lglycine-4 มิลลิโมล / ลิตร EDTA-8 mol / L ยูเรียพีเอช 8 บัฟเฟอร์ Disper sions ถูกกวนที่25◦Cในช่วง 10 นาทีที่ 500 รอบต่อนาที INA thermomixer และปั่นแล้วที่ 15,000 ×กรัม (10 นาที10◦C) ใสถูกบ่มกับสาร Ellman (4 mgDTNB / เมทานอลมิลลิลิตร) และ 1 มิลลิลิตร NTSB ถูกใช้ใน caseof sulphydryls รวม การดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตรได้รับการการไฟฟ้านครหลวง-sured ใน spectrophotometer Genesys-20 (เทอร์โมวิทยาศาสตร์มบริดจ์, สหรัฐอเมริกา) ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกราม 3 thio-6-nitrobenzoate (TNB; 13600 L mol-1 ซม-1) ถูกนำมาใช้ Proteinconcentration ของสารสกัดที่ถูกกำหนดโดย Bradfordmethod (แบรด, 1976)