The selected isolates underwent mol

The selected isolates underwent molecular identification of the
D1/D2 region of large subunit rRNA gene (Rosa and Lachance,
1998). PCR was performed from total DNA samples using the primers NL1 and NL4 as previously described (Rosa and Lachance, 1998).
The amplified DNA was concentrated, cleaned using the PEG method
(Sambrook and Russell, 2001) and sequenced in a Mega-BACE™
1000 automated sequencing system (Amersham Biosciences) in
the Institute of Biological Sciences of the Federal University of Minas
Gerais, Brazil. DNA sequences were analyzed using the program
blastn (Basic Local Alignment Search Tool 2.2.24-BLAST version
2.0) available at National Center for Biotechnology Information
(NCBI) website (Altschul et al., 1997). The sequences were compared
with sequences already deposited in GenBank. Sequence alignment
was performed using the program CLC Main Workbench 5.7.1.
Active cultures of K. marxianus UFV-3 and S. cerevisiae LBM-1 for
inoculation were prepared by growing the organisms using a rotary shaker at 180 rpm for 16 h at 28 C in YPD medium (1% yeast
extract, 2% peptone and 2% glucose).Yeast growth at different temperatures was analyzed by plating 5 ll of culture at dilutions of
1:0, 1:10 and 1:100 on agar plates containing YPD medium (1%
yeast extract, 2% peptone, 4% glucose and 2% agar). The plates were
incubated at 28, 37, 42 or 45 C for 72 h. The dilutions were prepared in sterilized saline solution (0.85% NaCl) from active cultures
with an optical density (OD)600nm of 0.5.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกเลือกเปลี่ยนรหัสโมเลกุลของการ
ง 1/D2 แคว้นใหญ่ย่อย rRNA ยีน (โรและรับบท,
1998) ทำจากตัวอย่างดีเอ็นเอทั้งหมดโดยใช้ไพรเมอร์ NL1 PCR และ NL4 ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (โรและรับบท 1998) .
DNA เอาต์เข้มข้น ทำความสะอาดโดยใช้วิธีการตรึง
(Sambrook และรัสเซล 2001) และตามลำดับใน™ร็อค BACE
1000 อัตโนมัติลำดับระบบ (เวลาออก Amersham) ใน
สถาบันของชีวภาพวิชาวิทยาศาสตร์ของมหาวิทยาลัยของรัฐบาลกลางของมินัส
Gerais บราซิล ลำดับดีเอ็นเอได้วิเคราะห์โดยใช้โปรแกรม
blastn (รุ่นพื้นฐานท้องถิ่นตำแหน่งค้นหาในเครื่องมือ 2.2.24-BLAST
2.0) มีศูนย์แห่งชาติในเว็บไซต์ Information
(NCBI) เทคโนโลยีชีวภาพ (Altschul และ al., 1997) มีการเปรียบเทียบลำดับที่
มีลำดับที่แล้วฝากใน GenBank ลำดับตำแหน่ง
ทำใช้วัฒนธรรมโปรแกรม CLC หลักบนเก้าอี้ทำงาน 5.7.1.
Active ของคุณ marxianus UFV 3 และ S. cerevisiae LBM 1 ใน
inoculation ถูกเตรียม โดยเติบโตสิ่งมีชีวิตโดยใช้เชคเกอร์หมุนที่ 180 รอบต่อนาทีสำหรับ h 16 ที่ 28 C ใน YPD (ยีสต์ 1%
สารสกัดจาก peptone 2% และ 2% กลูโคส)ยีสต์เจริญเติบโตที่อุณหภูมิต่าง ๆ ถูกวิเคราะห์ โดยชุบ 5 ll ของวัฒนธรรมที่ dilutions ของ
1:0, 1:10 และ 1: 100 ใน agar แผ่นมี YPD ปานกลาง (1%
สารสกัดจากยีสต์ peptone 2% กลูโคส 4% และ 2% agar) มีแผ่น
incubated ที่ 28, 37, 42 หรือ 45 C สำหรับ 72 h Dilutions ที่ถูกเตรียมใน sterilized น้ำเกลือ (0.85% NaCl) จากวัฒนธรรมงาน
กับ 600nm มีความหนาแน่นออปติคอล (OD) 0.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เชื้อเข้ารับการระบุโมเลกุลของ
ภูมิภาค D1 / D2 ของ subunit ขนาดใหญ่ rRNA ยีน (โรซ่าและ Lachance,
1998) PCR ถูกดำเนินการจากตัวอย่างดีเอ็นเอทั้งหมดโดยใช้ไพรเมอร์ NL1 และ NL4 ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (โรซ่าและ Lachance, 1998)
การขยายดีเอ็นเอเข้มข้นทำความสะอาดโดยวิธี PEG
(Sambrook และรัสเซล, 2001) และติดใจในเมกะ BACE ™
1000 ระบบการเรียงลำดับอัตโนมัติ (Amersham Biosciences) ใน
สถาบันวิทยาศาสตร์ทางชีวภาพของมหาวิทยาลัยกลางของไมนา
สเจอเรส, ประเทศบราซิล ลำดับดีเอ็นเอถูกนำมาวิเคราะห์โดยใช้โปรแกรม
ไทด์ (พื้นฐานท้องถิ่นจัดเครื่องมือค้นหา 2.2.24 ระเบิดรุ่น
2.0) ที่มีอยู่ที่ศูนย์แห่งชาติสำหรับข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพ
(NCBI) เว็บไซต์ (Altschul et al., 1997) ลำดับเปรียบเทียบ
กับลำดับฝากแล้วใน GenBank ลำดับการจัดเรียง
ได้รับการดำเนินการโดยใช้โปรแกรม CLC หลัก Workbench 5.7.1
วัฒนธรรมที่ใช้งานของ K. marxianus UFV 3 และ S. cerevisiae LBM-1 สำหรับ
การฉีดวัคซีนได้รับการจัดทำขึ้นโดยการปลูกชีวิตโดยใช้เครื่องปั่นหมุนที่ 180 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 16 ชั่วโมงวันที่ 28 C ใน YPD กลาง (ยีสต์ 1%
สารสกัดจาก 2% เปปโตนและกลูโคส 2%) การเจริญเติบโต .Yeast ที่อุณหภูมิที่แตกต่างกันได้รับการวิเคราะห์โดยการชุบ 5 LL ของวัฒนธรรมที่เจือจาง
1: 0, 01:10 และ 1: 100 บนจานอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี YPD กลาง (1%
สารสกัดจากยีสต์, 2% เปปโตนกลูโคส 4% และ 2% agar) แผ่นถูก
บ่มที่ 28, 37, 42 หรือ 45 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง เจือจางได้จัดทำขึ้นน้ำเกลือฆ่าเชื้อ (0.85% NaCl) จากวัฒนธรรมที่ใช้งาน
กับ 600Nm ความหนาแน่นแสง (OD) 0.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่ได้รับการจำแนกสายพันธุ์ระดับโมเลกุลของ
D1 / D2 ภูมิภาคของยีนแบคทีเรียย่อยขนาดใหญ่ ( Rosa และ lachance
, 1998 ) PCR ได้ จากตัวอย่างดีเอ็นเอทั้งหมดโดยใช้ไพรเมอร์และ nl1 nl4 ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( Rosa และ lachance , 1998 ) .
แถบดีเอ็นเอ ก็เข้มข้น ทำความสะอาดโดยใช้ PEG วิธีการ
( sambrook และ Russell , 2001 ) และลำดับเบสในเมกา bace ™
1000 แบบอัตโนมัติระบบจัดลำดับ ( ชาม Biosciences )
สถาบันวิทยาศาสตร์ทางชีวภาพของมหาวิทยาลัยแห่งชาติของ Minas Gerais
, บราซิล ลำดับดีเอ็นเอโดยใช้โปรแกรม
blastn ( การปรับพื้นฐานท้องถิ่น 2.2.24-blast เครื่องมือค้นหารุ่น
2.0 ) ใช้ได้ที่ศูนย์
ข้อมูลชีวภาพแห่งชาติ ( ncbi ) เว็บไซต์ ( แอลเชิล et al . , 1997 ) ลำดับการเปรียบเทียบ
ลําดับแล้วฝากบริเวณ ลำดับการใช้โปรแกรมจัด

5.7.1 Workbench CLC หลัก . วัฒนธรรมที่ใช้งานอยู่ของ K . marxianus ufv-3 และ S . cerevisiae lbm-1 สำหรับ
( เตรียมโดยการใช้เครื่องปั่นแบบสิ่งมีชีวิตที่ 180 รอบ / นาทีเป็นเวลา 16 ชั่วโมง 28 องศาเซลเซียส ใน ypd ขนาดกลาง ( 1 % สารสกัดจากยีสต์
2 % ตามลำดับ และ 2 % กลูโคส ) .การเจริญเติบโตของยีสต์ที่อุณหภูมิแตกต่างกัน โดยใช้ชุบ 5 จะของวัฒนธรรมที่วิธีการ
1 : 0 , 1 : 10 และ 100 บนแผ่นวุ้นที่มี ypd ขนาดกลาง ( 1 %
% extract สารสกัดจากยีสต์ , 2 , 4% กลูโคสและ 2 % Agar ) จานถูก
บ่มที่ 28 , 37 , 42 หรือ 45 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 72 ชั่วโมง โดยวิธีการเตรียมในน้ำเกลือ ( 0.85 % NaCl ) จากงานวัฒนธรรม
กับซิกแซ็ก ( OD ) 600nm 0.5 .