3.2. Construction of E. coli strains co-expressing lipases CALB and TLL
and E. coli strains expressing CALB and TLL, respectively
To develop more efficient tandem-lipase system, we engineered
recombinant biocatalysts containing both CALB and TLL as intracellular
enzymes. Although CALB and TLL were expressed in other
host microorganisms such as yeast and fungus (Emond et al.,
2010; Larsen et al., 2008; Zheng et al., 2011; Prathumpai et al.,
2004), the cells could not be used as catalysts since the lipases
were excreted as extracellular enzyme. E. coli was thus chosen as
the host to express intracellular lipases. While over-expressing of
CALB in E .coli is still difficult (Larsen et al., 2008; Jung et al.,
2011; Blank et al., 2006), expressing of TLL in E. coli has not yet
been reported.
3.2 การก่อสร้างของ E. coli สายพันธุ์ lipases ร่วมแสดง CALB และ TLLและ E. coli สายพันธุ์ที่แสดง TLL และ CALB ตามลำดับการพัฒนาระบบเอนไซม์ไลเปสตัวตามกันไปมาก เราได้วางแผนประกอบด้วยทั้ง CALB และ TLL เป็น intracellular biocatalysts recombinantเอนไซม์ แม้ว่า CALB และ TLL ได้แสดงในที่อื่น ๆเจ้าจุลินทรีย์เช่นยีสต์และเชื้อรา (Emond et al.,2010 Al. Larsen et, 2008 Al. เจิ้งร้อยเอ็ด 2011 Prathumpai et al.,2004), เซลล์ไม่สามารถใช้เป็นสิ่งที่ส่งเสริมตั้งแต่ lipasesมี excreted เป็นเอนไซม์ extracellular E. coli จึงถูกเลือกเป็นโฮสต์แสดง intracellular lipases ในขณะที่เกินกำลังของCALB ใน E .coli เป็นยังยาก (Larsen et al., 2008 จุง et al.,2011 ว่างเปล่าและ al., 2006), การแสดงของ TLL ใน E. coli มียังไม่ได้การรายงาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
3.2 การก่อสร้างของเชื้อ E. coli สายพันธุ์ร่วมแสดงความ CALB ไลเปสและ TLL
และ E. coli สายพันธุ์แสดง CALB และ TLL
ตามลำดับเพื่อพัฒนาระบบที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นควบคู่-เอนไซม์ไลเปสที่เราออกแบบเอนไซม์
recombinant มีทั้ง CALB และ TLL
เป็นเซลล์เอนไซม์ แม้ว่า CALB และ TLL ถูกแสดงในอื่น ๆ
จุลินทรีย์โฮสต์เช่นยีสต์และเชื้อรา (Emond, et al.
2010; เสน et al, 2008;. เจิ้งเหอ et al, 2011;.. Prathumpai, et al,
2004) เซลล์ไม่สามารถ
ใช้เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาตั้งแต่ไลเปสถูกขับออกมาเป็นเอนไซม์extracellular เชื้อ E. coli
จึงได้รับเลือกให้เป็นเจ้าภาพในการแสดงไลเปสในเซลล์ ในขณะที่มากกว่าการแสดงของ
CALB ใน .coli E เป็นยังคงยาก (เสน et al, 2008;. จุง, et al.
2011;. ที่ว่างเปล่า, et al, 2006), การแสดงของ TLL ในเชื้อ E. coli
ยังไม่ได้รับรายงาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
3.2 . การก่อสร้างของ E . coli สายพันธุ์ร่วมแสดงและไลเปส calb tll
E . coli สายพันธุ์และการแสดงและ calb tll ตามลำดับ
พัฒนาระบบเอนไซม์ควบคู่มีประสิทธิภาพมากขึ้น , เราออกแบบ
จากัวร์แนนท์ที่มีทั้งภายในและ calb tll
เป็นเอนไซม์ แม้ว่า calb tll แสดงออกในเชื้อจุลินทรีย์และโฮสต์อื่น ๆเช่น ยีสต์ และเชื้อรา (
เอเมิ่นด์ et al . , 2010 ; Larsen et al . ,2008 ; เจิ้ง et al . , 2011 ; prathumpai et al . ,
2004 ) เซลล์ไม่สามารถใช้เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา ตั้งแต่เขาถูกขับออกนอกเซลล์
เป็นเอนไซม์ E . coli จึงได้รับเลือกเป็นเจ้าภาพ เพื่อแสดงการไลเปส
. ในขณะที่การแสดงของ
calb ใน E . coli ยังยาก ( Larsen et al . , 2008 ; จอง et al . ,
2011 ; ที่ว่างเปล่า et al . , 2006 ) , การแสดงของ tll ใน E . coli ไม่ได้
ได้รับการรายงาน
การแปล กรุณารอสักครู่..