Before transformation, the phytotoxic level of selective
reagent, kanamycin, was determined. Leaf disks from
shoots were transferred on differentiation medium containing
different levels of kanamycin (20, 30, 40, 50, 60,
70, and 80 mg/l). The events with respect to necrosis and
shoot differentiation of leaf explants were recorded. For
plant transformation, leaf disks were submerged in the
bacterial suspension for 5 min, and co-cultivated in darkness
for 3 days at
25°ë
. Then, the leaf disks were transferred
to selective medium supplemented with hormones
and kanamycin, together with 500 mg/l cefotaxime. For
PCR analysis, DNA was isolated from young leaves of
putative transgenic and wild-type plantlets grown in soil
ก่อนการเปลี่ยนแปลงในระดับของพิษเลือก
น้ำยา KANAMYCIN ถูกกำหนด ดิสก์ใบจาก
หน่อถูกโอนในสื่อที่มีความแตกต่าง
ในระดับที่แตกต่างกันของ KANAMYCIN (20, 30, 40, 50, 60,
70, และ 80 มิลลิกรัม / ลิตร) เหตุการณ์ที่เกิดขึ้นเกี่ยวกับการตายของเนื้อเยื่อและ
ความแตกต่างของการถ่ายชิ้นส่วนใบที่ถูกบันทึกไว้ สำหรับ
การเปลี่ยนแปลงอาคารดิสก์ใบถูกจมอยู่ใต้น้ำใน
การระงับแบคทีเรียเป็นเวลา 5 นาทีและร่วมปลูกฝังในความมืด
เป็นเวลา 3 วันที่25 °อี จากนั้นดิสก์ใบถูกถ่ายโอนไปยังสื่อที่เลือกเสริมด้วยฮอร์โมนและ KANAMYCIN ร่วมกับ 500 มิลลิกรัม / ลิตร cefotaxime สำหรับการวิเคราะห์ PCR ดีเอ็นเอที่แยกได้จากใบอ่อนของยีนสมมุติและต้นกล้าป่าชนิดที่ปลูกในดิน
การแปล กรุณารอสักครู่..

ก่อนที่จะแปลง ระดับของการ phytotoxic
รีเอเจนต์ ทั้งสองถูกกำหนดไว้ ใบดิสก์จากยอดในการโอน
อาหารที่มีระดับที่แตกต่างกันของทั้งสอง ( 20 , 30 , 40 , 50 , 60 , 70 และ 80 มิลลิกรัม /
, L ) เหตุการณ์เกี่ยวกับโรคใบไหม้และความแตกต่างของการเจริญเติบโต
ยิงใบบันทึก สำหรับ
แปลงพืชแช่ใน
ใบดิสก์bacterial suspension เป็นเวลา 5 นาที และร่วมปลูกในที่มืด
3 วันที่ 25 °ë
แล้วใบดิสก์โอน
ให้ใช้อาหารสูตร MS ที่เสริมด้วยฮอร์โมน
และ kanamycin ร่วมกับ 500 มก. / ล. โฟ . การวิเคราะห์ดีเอ็นเอเพื่อ
PCR ที่แยกได้จากใบอ่อนของการแสดงออกของยีน
และต้นที่ปลูกในดิน
การแปล กรุณารอสักครู่..
