Assay for caspase activityTo furthe

Assay for caspase activity
To further understand the details in 2-MCA-induced
apoptosis, the changes in activities of crucial caspases
involved in apoptosis were analyzed. The test is based
on the measure of the chromophore 7-amino-4-trifluoromethyl coumarin (AFC) after cleavage from the labeled
substrate DEVD- and LEHD-AFC by caspase-3 and -9,
respectively. The released AFC gives off a yellowgreen
fluorescence. COLO 205 cells were incubated with different concentrations of 2-MCA for 48 h and caspase-3
and -9 activities were determined using Fluorometric
Assay Kit from BioVision (Milpitas, CA, USA) following
the manufacturer’s instructions. The AFC light emission
was evaluated using the Tecan infinite M200 spectrophotometer (Tecan, Ma ¨nnedorf, Switzerland). Results are
expressed as the percentage of change in activity compared
to the untreated control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบกิจกรรม caspaseเข้าใจรายละเอียดใน 2 MCA เกิดเพิ่มเติมตาย การเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของ caspases สำคัญเกี่ยวข้องกับการตายถูกวิเคราะห์ การทดสอบเป็นคะแนนในวัดของ chromophore 7-อะมิโน-4-trifluoromethyl coumarin (AFC) หลังจากความแตกแยกจากการติดป้ายพื้นผิว DEVD - และ LEHD-เอเอฟซี โดย caspase-3 และ -9ตามลาดับ เอเอฟซีออกมาให้ออกเป็นสีเหลืองสีเขียวเรืองแสง โคโล 205 เซลล์ได้รับการกกกับความเข้มข้นแตกต่างกันของ 2-MCA สำหรับ 48 ชั่วโมงและ caspase-3และกำหนดกิจกรรม-9 โดยใช้ FluorometricAssay Kit จาก BioVision (ลปิตาส CA, USA) ต่อไปนี้คำแนะนำของผู้ผลิต ปล่อยแสงของเอเอฟซีรับการประเมินโดยใช้ Tecan อนันต์ M200 สเปค (Tecan, Ma ¨nnedorf สวิตเซอร์แลนด์) ผลคือแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมเปรียบเทียบไปยังตัวควบคุมได้รับการรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทดสอบสำหรับกิจกรรม caspase
เพื่อเป็นการทำความเข้าใจในรายละเอียด 2 เอ็มชักนำ
apoptosis, การเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของ caspases สำคัญ
ที่เกี่ยวข้องในการตายของเซลล์ที่ได้มาวิเคราะห์ การทดสอบเป็นไปตาม
มาตรการของ chromophore 7-Amino-4-trifluoromethyl coumarin (เอเอฟซี) หลังจากที่แตกแยกจากการที่มีข้อความ
DEVD- สารตั้งต้นและ LEHD-เอเอฟซีโดย caspase-3 และ -9,
ตามลำดับ เอเอฟซีปล่อยให้ปิดเหลือง? สีเขียว
เรืองแสง COLO 205 เซลล์ถูกบ่มที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ 2 เอ็มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและ caspase-3
และ -9 กิจกรรมได้รับการพิจารณาโดยใช้ฟลูออโร
Assay Kit จาก BioVision (ซานโฮเซ, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) ตาม
คำแนะนำของผู้ผลิต การปล่อยแสงเอเอฟซี
ได้รับการประเมินโดยใช้ Tecan spectrophotometer M200 อนันต์ (Tecan แม่¨nnedorfวิตเซอร์แลนด์) ผลการค้นหาจะ
แสดงเป็นร้อยละของการเปลี่ยนแปลงของกิจกรรมเมื่อเทียบ
กับการควบคุมได้รับการรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีเอนไซม์แคสเปสที่จะเข้าใจรายละเอียดใน 2-mca-induced( การเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของ caspases สําคัญที่เกี่ยวข้องกับการตาย วิเคราะห์ การทดสอบตามในวัดของที่มีสี 7-amino-4-trifluoromethyl coumarin ( AFC ) หลังจากการแยกออกจากป้ายdevd - ฐานรองและ lehd-afc โดยการศึกษาลักษณะและ - 9ตามลำดับ ออกรายการ เอเอฟซี ให้ปิด colorเรืองแสงด้วย โคโล 205 cells ) ที่มีความเข้มข้นต่างกัน 2-mca 48 ชั่วโมง และการศึกษาลักษณะและวิเคราะห์โดยใช้ fluorometric 9 กิจกรรมชุดต่อจาก biovision ( Milpitas , CA , USA ) ดังต่อไปนี้คำแนะนำของผู้ผลิต เอเอฟซี แสงฉายถูกประเมินโดยใช้ TECAN อนันต์ m200 Spectrophotometer ( ทีแคน มาตั้ง nnedorf , สวิตเซอร์แลนด์ ) ผลคือแสดงเป็นร้อยละของการเปลี่ยนแปลงในการเปรียบเทียบเพื่อควบคุมสาร