Ultra performance liquid chromatogr

Ultra performance liquid chromatography (ULC) grade solvents were used for all chromatographic
steps. Protein (2 mg) from each sample was loaded using split-less nano-ULC (10 kpsi nanoAcquity,
Waters). The mobile phase consisted of: (A) H2Oþ0.1% formic acid and (B) acetonitrileþ0.1% formic
acid. Desalting of the samples was performed online using a reversed-phase C18 trapping column
(180 mm internal diameter, 20 mm length, 5 mm particle size; Waters). The peptides were then
separated using a an HSS T3 nano-column (75 mm internal diameter, 250 mm length, 1.8 mm particle
size; Waters) at 0.35 mL/min. Peptides were eluted from the column using the following gradient: 4–
35% B in 150 min, 35–90% B in 5 min, maintained at 90% for 5 min and then back to initial conditions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้สารละลายทำความเหลว chromatography (ULC) เกรดทั้งหมดโครมาขั้นตอนนี้ โปรตีน (2 mg) จากตัวอย่างแต่ละถูกโหลดโดยใช้แยกน้อยกว่านาโน-ULC (10 kpsi nanoAcquityน้ำทะเล) ขั้นตอนการเคลื่อนที่ประกอบด้วย: กรดฟอร์มิก (A) H2Oþ0.1% และ (B) acetonitrileþ0.1% ปลวกกรด แยกตัวอย่างดำเนินการแบบออนไลน์โดยใช้ดักคอลัมน์ C18 กลับเฟส(ภายใน 180 มม. ความยาว 20 มม. ขนาดอนุภาค 5 มม. น้ำทะเล) เปปไทด์ได้แล้วแยกใช้เป็น HSS T3 นาโนคอลัมน์ (ภายใน 75 มม. ความยาว 250 มม. อนุภาค 1.8 มม.ขนาด น้ำ) ที่ 0.35 มิลลิลิตร/นาทีเปปไทด์ถูก eluted จากคอลัมน์โดยใช้การไล่ระดับต่อไปนี้: 4 –35% B 150 นาที B 35-90% ใน 5 นาที 90% สำหรับ 5 นาที และกลับมาเริ่มต้นเงื่อนไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อัลตร้าโค Performance Liquid (ULC) ตัวทำละลายระดับถูกนำมาใช้สำหรับโครมาทุก
ขั้นตอน โปรตีน (2 มก.) จากแต่ละตัวอย่างถูกโหลดโดยใช้แยกน้อยนาโน ULC (10 KPSI nanoAcquity,
Waters) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย: (A) กรดH2Oþ0.1% และ (ข) acetonitrileþ0.1% ฟอร์มิ
กรด desalting ของกลุ่มตัวอย่างที่ได้ดำเนินการออนไลน์โดยใช้ตรงกันข้ามเฟสคอลัมน์ C18 ดัก
(180 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางภายใน 20 มิลลิเมตรความยาวขนาดอนุภาค 5 มมน้ำ) เปปไทด์จากนั้นถูก
แยกออกจากกันโดยใช้หนึ่งไฮสปีด T3 นาโนคอลัมน์ (เส้นผ่าศูนย์กลางภายใน 75 มิลลิเมตร 250 มิลลิเมตรยาว 1.8 มมอนุภาค
ขนาด Waters) ที่ 0.35 มิลลิลิตร / นาที เปปไทด์ที่ถูกชะจากคอลัมน์โดยใช้การไล่ระดับสีต่อไปนี้: 4-
35% B ใน 150 นาที, 35-90% B ใน 5 นาที, เก็บรักษาไว้ที่ 90% เป็นเวลา 5 นาทีแล้วกลับไปเงื่อนไขเริ่มต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โครมาโตกราฟีของเหลว Ultra ประสิทธิภาพ ( ULC ) เกรดตัวทำละลายใช้สำหรับโครมาโตกราฟีขั้นตอน โปรตีน ( 2 มก. ) จากแต่ละตัวอย่างถูกโหลดใช้แยก ULC นาโนน้อย ( 10 nanoacquity kpsi ,น้ำ ) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย : ( a ) H2O þ 0.1% กรดและ ( ข ) ไนþ 0.1% มิคกรด desalting ของตัวอย่างการใช้ reversed-phase c18 ดักคอลัมน์ออนไลน์( 180 มม. ภายในเส้นผ่าศูนย์กลาง 20 มิลลิเมตร ความยาว 5 มม. ขนาด อนุภาคน้ำ ) แล้วที่เปปแยกใช้เป็น HSS T3 นาโนคอลัมน์ ( 75 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางภายใน 250 มม. ความยาว 1.8 mm อนุภาคขนาด น้ำ ) ที่ 0.35 มิลลิลิตร / นาที เปปไทด์ คือตัวอย่างจากคอลัมน์โดยใช้การไล่ระดับสีต่อไปนี้ : 4 ฯ35 % B 150 นาที 35 – 90 % B ใน 5 นาทีไว้ที่ 90% เป็นเวลา 5 นาที จากนั้นก็กลับมาสู่สภาวะเริ่มต้น