mycelial disks of either B. oryzae

mycelial disks of either B. oryzae and Trichoderma isolates 10
mm away from the edge of the plate opposite to each other.
Plates inoculated with B. oryzae alone served as control. Plates
were incubated at 26 ± 1°C for seven days (12 h light/12 h
darkness). The linear growth was measured. Three replicate
plates were done for each treatment. The percentage of growth
inhibition was calculated using the equation RI= 100 x (R2 -
R1) / R2. Where RI was the percentage of reduction in
mycelial growth, R1 was the averaged growth of pathogen in
treated plates and R2 was the averaged growth of pathogen in
control plates (12).
Production of volatile compounds: The bottoms of Petri
dishes containing PDA were separately inoculated with
mycelial plugs of pathogen and Trichoderma isolates. Then
two bottoms held together with pathogen at top, sealed with
adhesive tape and incubated at 26 ± 1°C in the dark for seven
days. The radial growth of the pathogens was measured. Three
replicates of each treatment were used (11).
Production of non-volatile compounds: A piece of
autoclaved cellophane was placed on the surface of PDA
medium in a 9 cm plate then a 7 mm disk of Trichoderma
isolate was inoculated on the cellophane. The plates were
incubated at 26 ± 1
°C for 72 h. After the incubation period, the
cellophane and the adhering Trichoderma mycelia were
aseptically removed and the centre of each dish was inoculated
with a 5 mm diameter disk of B. oryzae taken from an actively
growing colony. The plates were incubated at 26 ± 1
°C for a
further five days. The control treatment was B. oryzae grown
on PDA plate where previously there was a cellophane disc
without antagonist. Three replicate plates were done for each
treatment. The percentage of growth inhibition was calculated
(12).
Mycoparasitism test: The slide culture method (28) was
used to investigate the mycoparasitic nature of Trichoderma
isolates against B. oryzae. A microscope glass slide covered
with a thin layer of PDA in the agar plate was inoculated with
5 mm mycelial disks of Trichoderma spp. and pathogen, 1 cm
apart from each other. All paired cultures incubated at 26 °C
and regions where the hyphae of Trichoderma isolates met the
hyphae of the pathogen were periodically observed under a
light microscope.
Evaluation of Trichoderma isolates on wet filter paper:
Based on in vitro antagonism test, 20 Trichoderma isolates
were selected. Rice seeds were soaked in spore suspension of
B. oryzae (10
5
spores mL
-1
) containing 0.05% Tween 20 for 24
h. Then, seeds were air-dried and soaked in spore suspension of
Trichoderma isolates (10
8
spores mL
-1
) containing 0.05%
Tween 20 for 2 h and then placed on the sterile wet filter paper
in a seedling tray with 100 seeds per treatment (7). Plant
height, root length and the percentage of disease control were
determined. The number of infected seedlings was counted for
each treatment and then compared to infected control with B.
oryzae.
Glasshouse experiments
Seed treatment: According to wet filter paper test, 11
Trichoderma isolates were selected and used to inoculate
infested rice seeds with pathogen and were sown in plastic pots
containing autoclaved rice field soil. The pots were kept in
glasshouse with the condition of 21 to 30
°C temperature and
90% relative humidity. Three pots were used for each
treatment. Rice seedlings growth parameters namely stem
height, root length, stem and root wet weight, stem and root dry
weight and percentage of disease control were determined 45
days after inoculation. Rice stem and root were dried in an
oven at 80
°C for 24 hours to a dry weight.
Foliar spray
Twenty one days old rice seedlings (cv. Tarom) were
sprayed with spore suspension of 11 selected Trichoderma
isolates (10
8
spore mL
-1
) with 0.05% Tween 20 in greenhouse.
After 24 h, the plants were sprayed with the spore suspension
of B. oryzae (10
5
spore mL
-1
). The seedlings which were
sprayed with B. oryzae alone, served as control. Observations
on the disease severity were recorded seven days after

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ดิสก์ mycelial ของ B. oryzae และ Trichoderma แยก 10มม.ห่างจากขอบจานตรงข้ามกันแผ่น inoculated กับ B. oryzae คนเดียวทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม แผ่นได้รับการกกที่ 26 ± 1° C 7 วัน (12 ชม. แสง/12 hความมืด) โดยวัดการเจริญเติบโตเชิงเส้น จำลองแบบสามแผ่นถูกทำการรักษาแต่ละ เปอร์เซ็นต์ของการเจริญเติบโตยับยั้งการคำนวณโดยใช้สมการ RI = 100 x (R2 -R1) / R2 ที่ RI เป็นเปอร์เซ็นต์ของการลดเติบโต mycelial, R1 คือ การเติบโตเฉลี่ยของเชื้อโรคในแผ่นบำบัดและ R2 คือ การเติบโตเฉลี่ยของเชื้อโรคในควบคุมแผ่น (12)การผลิตของสารประกอบระเหย: บางเพาะอาหารที่ประกอบด้วย PDA ถูกแยก inoculated ด้วยปลั๊ก mycelial ของเชื้อโรคและแยก Trichoderma จากนั้นสองก้นจัดขึ้นร่วมกับเชื้อโรคที่ด้านบน ปิดผนึกด้วยเทปกาว และรับการกกที่ 26 ± 1° C ในมืดสำหรับเจ็ดวันที่ รัศมีเจริญเติบโตของเชื้อโรคที่ถูกวัด สามเหมือนกับการรักษาแต่ละถูกใช้ (11)การผลิตสารที่ไม่ระเหย: ชิ้นส่วนของกระดาษแก้วนึ่งถูกวางลงบนพื้นผิวของ PDAปานกลางใน 9 ซม.แผ่นดิสก์แล้ว 7 มม.ของ Trichodermaisolate คือ inoculated บนกระดาษแก้ว มีแผ่นรับการกกที่ 26 ± 1° C สำหรับ 72 ชั่วโมง หลังจากระยะฟักตัว การกระดาษแก้วและ mycelia Trichoderma เกาะติดเอา aseptically และศูนย์กลางของอาหารแต่ละจานถูก inoculatedกับดิสก์เส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มม.ของ B. oryzae ที่นำมาจากการแข็งขันเติบโตอาณานิคม แผ่นได้รับการกกที่ 26 ± 1° C สำหรับการเพิ่มเติม 5 วัน ควบคุมรักษาแก้ไข B. oryzae ปลูกบนแผ่น PDA ที่ก่อนหน้านี้มีเป็นแผ่นกระดาษแก้วไม่ มีศัตรู ทำแผ่น replicate ที่สามสำหรับแต่ละการรักษา คำนวณเปอร์เซ็นต์ของการยับยั้งการเจริญเติบโต(12)ทดสอบ Mycoparasitism: แก้ไขวิธีวัฒนธรรมภาพนิ่ง (28)ใช้เพื่อตรวจสอบลักษณะ mycoparasitic ของ Trichodermaแยกกับ B. oryzae สไลด์แก้วกล้องจุลทรรศน์ครอบคลุมด้วยชั้นบาง ๆ ของ PDA ในแผ่นวุ้นมี inoculated ด้วย5 มม. mycelial ดิสก์ของเชื้อและเชื้อโรค 1 ซม.นอกจากแต่ละอื่น ๆ วัฒนธรรมทั้งคู่รับการกกที่ 26 ° Cและภูมิภาคที่พบ hyphae ของ Trichoderma แยกการhyphae ของเชื้อโรคเป็นระยะ ๆ ถูกตั้งข้อสังเกตภายใต้การกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงการประเมินผลของ Trichoderma แยกบนกระดาษกรองเปียก:คะแนนจากการทดสอบในหลอดทดลอง antagonism, Trichoderma แยก 20ถูกเลือก เมล็ดข้าวที่แช่ในสปอร์ระงับB. oryzae (105มลรา-1) ที่ประกอบด้วย 0.05% แต่ 20 24h. เมล็ดถูก air-dried แล้วแช่ในสปอร์ระงับTrichoderma แยก (108มลรา-1) ที่ประกอบด้วย 0.05%20 คนแต่ 2 ชม.แล้ว วางบนกระดาษกรองเปียกเป็นหมันในถาดต้นกล้ากับ 100 เมล็ดต่อการรักษา (7) โรงงานความสูง ความยาวราก และเปอร์เซ็นต์ของการควบคุมโรคกำหนด ถูกนับจำนวนต้นกล้าที่ติดเชื้อทรีตเมนท์ และเปรียบเทียบการควบคุมติดเชื้อกับ boryzaeการทดลองของเรือนกระจกสำหรับปลูกต้นไม้เมล็ดรักษา: ตามการทดสอบกระดาษกรองเปียก 11แยก Trichoderma เลือก และใช้เพื่อปลูกฝีรบกวนข้าวเมล็ดกับเชื้อโรค และถูกหว่านในกระถางพลาสติกประกอบด้วยข้าวนึ่งฟิลด์ดิน หม้อถูกเก็บไว้ในเรือนกระจกสำหรับปลูกต้นไม้สภาพของ 21 ถึง 30อุณหภูมิ° C และความชื้นสัมพัทธ์ 90% ใช้หม้อสามสำหรับแต่ละการรักษา พารามิเตอร์การเจริญเติบโตของต้นกล้าข้าวคือต้นกำเนิดความสูง ความยาวราก ลำต้น และรากเปียกน้ำหนัก ลำต้น และรากแห้งน้ำหนักและเปอร์เซ็นต์ของการควบคุมโรคได้กำหนด 45วันหลังจากกักบริเวณ ข้าวลำต้นและรากตากแห้งในการเตาอบที่ 80° C 24 ชั่วโมงจะมีน้ำหนักแห้งพ่นทางใบยี่สิบเอ็ดวันต้นกล้าอายุข้าว (พันธุ์ Tarom) ได้พ่น ด้วยสปอร์ระงับ Trichoderma เลือก 11แยก (108mL สปอร์-1) กับ 0.05% 20 แต่ในเรือนกระจกหลังจาก 24 ชม. พืชถูกพ่น ด้วยช่วงล่างสปอร์ของ B. oryzae (105mL สปอร์-1). ต้นกล้าที่พ่น ด้วย B. oryzae คนเดียว ทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม ข้อสังเกตรุนแรงโรคถูกบันทึกเจ็ดวันหลังจาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดิสก์เส้นใยของทั้ง B. oryzae และเชื้อรา Trichoderma แยก 10
มมห่างจากขอบของแผ่นตรงข้ามกับแต่ละอื่น ๆ .
แผ่นเชื้อ B. oryzae คนเดียวทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุม แผ่น
ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 26 ± 1 ° C เป็นเวลาเจ็ดวัน (12 แสง H / 12 ชั่วโมง
ความมืด) การเจริญเติบโตเชิงเส้นวัด สามซ้ำ
แผ่นได้ทำสำหรับการรักษาแต่ละครั้ง ร้อยละของการเจริญเติบโตของ
การยับยั้งที่คำนวณได้โดยใช้สมการ RI = 100 x (ที่ R2 -
R1) / R2 ที่ไหน RI เป็นร้อยละของการลดลงของ
การเจริญเติบโตของเส้นใย, R1 คือการเจริญเติบโตเฉลี่ยของเชื้อโรคใน
แผ่นได้รับการรักษาและ R2 คือการเจริญเติบโตเฉลี่ยของเชื้อโรคใน
แผ่นควบคุม (12).
การผลิตสารระเหย: ก้นของ Petri
อาหารที่มี PDA ก็แยกกัน เชื้อด้วย
ปลั๊กเส้นใยของเชื้อโรคและเชื้อรา Trichoderma ไอโซเลท จากนั้น
ทั้งสองพื้นจัดขึ้นร่วมกันกับเชื้อโรคที่ด้านบน, ปิดผนึกด้วย
เทปกาวและบ่มที่อุณหภูมิ 26 ± 1 ° C ในที่มืดเป็นเวลาเจ็ด
วัน การเจริญเติบโตของเชื้อโรครัศมีที่ถูกวัด สาม
ซ้ำของการรักษาแต่ละครั้งถูกนำมาใช้ (11).
การผลิตของสารที่ไม่ระเหย: ชิ้นส่วนของ
กระดาษแก้วมวลถูกวางลงบนพื้นผิวของพีดีเอ
ขนาดกลางในแผ่น 9 ซม. แล้วดิสก์ 7 มมเชื้อรา Trichoderma
แยกถูกเชื้อในกระดาษแก้ว แผ่นถูก
บ่มที่อุณหภูมิ 26 ± 1
° C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง หลังจากระยะฟักตัวที่
กระดาษแก้วและยึดมั่นในเส้นใยเชื้อรา Trichoderma ถูก
ลบออกปลอดเชื้อและเป็นศูนย์กลางของอาหารแต่ละจานได้รับเชื้อ
ด้วยดิสก์ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มมของ B. oryzae นำมาจากแข็งขัน
อาณานิคมการเจริญเติบโต แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 26 ± 1
° C สำหรับ
อีกห้าวัน การรักษาควบคุม B. oryzae ปลูก
บนแผ่นพีดีเอที่ก่อนหน้านี้มีแผ่นกระดาษแก้ว
โดยไม่ต้องศัตรู สามแผ่นซ้ำได้ทำสำหรับแต่ละ
รักษา ร้อยละของการยับยั้งการเจริญที่คำนวณได้
(12).
การทดสอบ Mycoparasitism: วิธีการวัฒนธรรมสไลด์ (28) ถูก
นำมาใช้ในการตรวจสอบลักษณะ mycoparasitic เชื้อรา Trichoderma
แยกกับ B. oryzae สไลด์แก้วกล้องจุลทรรศน์ปกคลุม
ด้วยชั้นบาง ๆ ของ PDA ในจานเลี้ยงเชื้อได้รับเชื้อด้วย
5 มิลลิเมตรดิสก์เส้นใยของเชื้อรา Trichoderma spp และเชื้อโรค 1 ซม.
ห่างจากกัน วัฒนธรรมที่จับคู่ทั้งหมดบ่มที่อุณหภูมิ 26 องศาเซลเซียส
และภูมิภาคที่เส้นใยของเชื้อรา Trichoderma แยกพบ
เส้นใยของเชื้อโรคที่ถูกตั้งข้อสังเกตเป็นระยะ ๆ ภายใต้
. กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง
การประเมินผลของเชื้อรา Trichoderma แยกบนกระดาษกรองเปียก:
จากในหลอดทดลองทดสอบการเป็นปรปักษ์กัน 20 สายพันธุ์เชื้อรา Trichoderma
อยู่ เลือก. เมล็ดข้าวที่ถูกแช่ในสปอร์แขวนลอยของ
บี oryzae (10
5
สปอร์มล
-1
) ที่มี 0.05% Tween 20 ต่อ 24
ชั่วโมง จากนั้นเมล็ดมีอากาศแห้งและแช่ในสปอร์แขวนลอยของ
เชื้อรา Trichoderma ไอโซเลต (10
8
สปอร์มล
-1
) ที่มี 0.05%
Tween 20 เป็นเวลา 2 ชั่วโมงแล้ววางลงบนกระดาษกรองเปียกผ่านการฆ่าเชื้อ
ในถาดต้นกล้าที่มี 100 เมล็ดต่อการรักษา ( 7) พืช
สูงความยาวรากและร้อยละของการควบคุมโรคที่ถูก
กำหนด จำนวนต้นกล้าที่ติดเชื้อที่ได้รับการนับ
การรักษาแต่ละครั้งและจากนั้นเมื่อเทียบกับการควบคุมการติดเชื้อ B.
oryzae.
Glasshouse ทดลอง
รักษาเมล็ดพันธุ์: ตามไปทดสอบกระดาษกรองเปียก 11
สายพันธุ์เชื้อรา Trichoderma ได้รับการคัดเลือกและใช้ในการฉีดวัคซีน
เมล็ดข้าวเต็มไปด้วยเชื้อโรคและถูกหว่าน ในกระถางพลาสติก
ที่มีมวลดินนาข้าว หม้อที่ถูกเก็บไว้ใน
เรือนกระจกที่มีสภาพ 21 ถึง 30
° C อุณหภูมิและ
90% ความชื้นสัมพัทธ์ สามหม้อถูกนำมาใช้สำหรับแต่ละ
รักษา ข้าวพารามิเตอร์ต้นกล้าเจริญเติบโตคือลำต้น
สูงความยาวรากลำต้นและรากน้ำหนักเปียกลำต้นและรากแห้ง
น้ำหนักและร้อยละของการควบคุมโรคได้รับการพิจารณา 45
วันหลังจากการฉีดวัคซีน ลำต้นข้าวและรากแห้งใน
เตาอบที่อุณหภูมิ 80
องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงในการมีน้ำหนักแห้ง.
ฉีดพ่นทางใบ
ยี่สิบหนึ่งวันเก่าต้นกล้าข้าว (CV Tarom.) ได้รับการ
ฉีดพ่นด้วยสปอร์แขวนลอย 11 เลือกเชื้อรา Trichoderma
ไอโซเลต (10
8
สปอร์มล
- 1
) กับ Tween 20 ในเรือนกระจกที่ 0.05%.
หลังจาก 24 ชั่วโมง, พืชที่ถูกพ่นด้วยสปอร์แขวนลอย
ของ B. oryzae (10
5
สปอร์มล
-1
) ต้นกล้าที่มีการ
ฉีดพ่นด้วย B. oryzae คนเดียวทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุม ข้อสังเกต
เกี่ยวกับความรุนแรงของโรคนี้ถูกบันทึกไว้เจ็ดวันหลังจาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ของดิสก์ของ B . oryzae และ Trichoderma isolates 10อืมห่างจากขอบของแผ่นอยู่ตรงข้ามกันจานใส่ B . oryzae คนเดียวทำหน้าที่ควบคุม แผ่นอุณหภูมิ 26 ± 1 ° C เป็นเวลา 7 วัน ( 12 ชั่วโมง แสง / 12 ชั่วโมงความมืด ) การเจริญเติบโตเชิงเส้นคือวัด 3 ทำซ้ำจานถูกทำสำหรับการรักษาแต่ละ ร้อยละของการเจริญเติบโตการยับยั้งคำนวณได้โดยใช้สมการริ = 100 x ( R2 -R1 / R2 . ซึ่งเป็นค่าร้อยละของการลดริเจริญ R1 เป็นเฉลี่ย , การเจริญเติบโตของเชื้อโรคในได้รับแผ่นและ R2 คือเฉลี่ยการเจริญเติบโตของเชื้อโรคในแผ่นควบคุม ( 12 )การผลิตสารระเหย : พื้นของ Nameอาหารที่ประกอบด้วย PDA ถูกแยกเชื้อด้วยปลั๊กของเชื้อโรคและเชื้อราเส้นใยของเชื้อ จากนั้นสองเหนือจัดขึ้นร่วมกันกับเชื้อโรคที่ด้านบนปิดด้วยกาวเทปและบ่มที่อุณหภูมิ 26 ± 1 °องศาเซลเซียสในที่มืดเป็นเวลาเจ็ดวัน การเจริญเติบโตของเชื้อโรคได้ รัศมีไอออน สามแบบของการรักษาแต่ละครั้งใช้ ( 11 )การผลิตสารไม่ระเหย : ชิ้นส่วนของสังเคราะห์กระดาษแก้วถูกวางไว้บนพื้นผิวของพีดีเอกลาง 9 ซม. จานดิสก์เชื้อรา 7 มม.แยกเป็นเชื้อในกระดาษแก้ว . แผ่นคือบ่มที่อุณหภูมิ 26 ± 1° C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง หลังจากระยะเวลา ,กระดาษแก้วและยึดมั่นเชื้อราเส้นใยaseptically ลบและศูนย์บริการของแต่ละจานเป็นเชื้อกับ 5 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางดิสก์ของ B . oryzae ถ่ายจากอย่างแข็งขันเติบโตอาณานิคม แผ่นอุณหภูมิ 26 ± 1° C สำหรับอีก 5 วัน การรักษาควบคุม B . oryzae โตอาหารจานที่ก่อนหน้านี้มีกระดาษแก้ว แผ่นดิสก์ไม่มีปฏิปักษ์ 3 ทำซ้ำแผ่นถูกทำสำหรับแต่ละการรักษา ร้อยละของการยับยั้งการคํานวณ( 12 )ทดสอบ mycoparasitism : ภาพนิ่งวิธีการเลี้ยง ( 28 )ใช้ศึกษาธรรมชาติ mycoparasitic เชื้อราไอโซเลตกับ B . oryzae . กล้องจุลทรรศน์แบบกระจกสไลด์ ปกคลุมด้วยชั้นบาง ๆของ PDA ในจานที่ใส่วุ้น5 มิลมีดิสก์ Trichoderma spp . และเชื้อโรค 1 ซม.นอกเหนือจากแต่ละอื่น ๆ ทุกคู่ที่ 26 ° C ) วัฒนธรรมและภูมิภาคที่เส้นใยของเชื้อราไอโซเลทพบเส้นใยของเชื้อโรคอยู่เป็นระยะ ๆ สังเกตใต้กล้องจุลทรรศน์แบบแสงการประเมินผลของเชื้อราไอโซเลทบนกระดาษกรองเปียก :ใช้ในการทดสอบหลอดเชื้อราไอโซเลทกัน 20ได้รับเลือก เมล็ดพันธุ์ข้าว ชุ่มสปอร์แขวนลอยของB . oryzae ( 105สปอร์มิลลิลิตร- 1) ที่ 0.05 tween 20 24ชั่วโมง จากนั้น เมล็ดแห้งแช่น้ำสปอร์แขวนลอยของเชื้อราไอโซเลท ( 108 .สปอร์มิลลิลิตร- 10.05 % ) ที่มีTween 20 2 ชั่วโมงแล้ววางไว้บนหมันเปียกกรองกระดาษในต้นกล้าถาด 100 เมล็ดต่อการรักษา ( 7 ) พืชความสูง ความยาวราก และจำนวนของการควบคุมโรค คือมุ่งมั่น จำนวนต้นกล้าติดเชื้อก็นับสำหรับการรักษาแต่ละและจากนั้นเปรียบเทียบกับไวรัสควบคุม Bข่าวจาก .เรือนทดลองรักษาเมล็ดพันธุ์ : ตามการทดสอบกรองกระดาษเปียก , 11เชื้อราไอโซเลทที่ใช้ปลูกฝีรบกวนเมล็ดข้าวกับเชื้อโรคและถูกหว่านในกระถางพลาสติกสังเคราะห์ที่มีดินนาข้าว . หม้อไว้ในเรือนกระจก ด้วยเงื่อนไขของ 21 ถึง 30° C และอุณหภูมิ90 ความชื้นสัมพัทธ์ . กระถางที่ 3 ใช้สำหรับแต่ละการรักษา ตัวแปรต้นคือการเจริญเติบโตของต้นกล้าข้าวความสูง ความยาวราก ลำต้น และราก ลำต้น และราก น้ำหนักแห้งเปียกน้ำหนักและการควบคุมโรค เป็น 45 เปอร์เซ็นต์วันหลังจากปลูกเชื้อ ข้าวต้นและรากแห้งในเตาอบที่อุณหภูมิ 80° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงเพื่อน้ำหนักแห้งพ่นทางใบยี่สิบ หนึ่ง วัน ต้นกล้าข้าวพันธุ์ ทอรุม ) ได้แก่พ่นสปอร์แขวนลอยของเชื้อ 11 เลือกไอโซเลต ( 108 .มล สปอร์- 1) กับ 0.05 เปอร์เซ็นต์ Tween 20 ในเรือนกระจกหลังจาก 24 ชั่วโมง พืชฉีดพ่นด้วยสปอร์แขวนลอยB . oryzae ( 105มล สปอร์- 1) ต้นกล้าซึ่งเป็นพ่นด้วย B . oryzae คนเดียว ทำหน้าที่ควบคุม สังเกตในโรค ความรุนแรงที่ถูกบันทึกไว้เจ็ดวัน