Summary
After its standardisation at the national level in Germany (DIN
38415-6, 2001; DIN, 2001), the 48 h sewage testing assay with zebrafish
(Danio rerio) embryos has been submitted for standardisation
to ISO. As an alternative to the conventional acute (96 h)
fish test, a modified fish embryo test will be submitted to the
OECD for chemical testing in late 2005. For this, a protocol originally
designed for zebrafish was adapted to fit also the requirements
of other OECD species, namely medaka (Oryzias latipes)
and fathead minnow (Pimephales promelas). Results document
that the transfer of the protocol is possible with only minor modifications.
Data obtained from embryo tests with the three species
are comparable. Statistical analysis of existing zebrafish embryo
toxicity data resulted in the conclusions (1) that there is a reliable
correlation between the fish embryo test and the acute fish test,
(2) that the confidence belt of the regression line was relatively
small, but that the prediction range was relatively wide. The regression
thus seems appropriate to describe the relationship
between acute fish and embryo LC50 with good confidence, but is
less appropriate as a prediction model.
Investigations into oxygen requirements of zebrafish embryos reveal
that they adapt to a broad range of oxygen levels and survive
at concentrations of 2 mg/l without malformations. Zebrafish embryos
can thus be exposed in very small toxicant volumes (100
μl), which is of particular interest for the testing of metabolites.
Dechorionation studies with 48 h old zebrafish embryos indicate
that the barrier function of the chorion increases with the
lipophilicity of the test compound. Finally, examples are given as
to how additional endpoints can be incorporated into the fish
embryo test protocol to extend its scope, e.g. to sediment toxicity
assessment or genotoxicity and mutagenicity testing.
Towards an Alternative for the Acute
Fish LC50 Test in Chemical Assessment:
The Fish Embryo Toxicity Test Goes
Multi-species – an Update
Thomas Braunbeck, Melanie Böttcher, Henner Hollert, Thomas Kosmehl, Eva Lammer, Erik Leist,
Mark Rudolf and Nadja Seitz
Aquatic Ecology and Toxicology Group, Department of Zoology, University of Heidelberg, D-Heidelberg
Zusammenfassung: Auf dem Weg zu einer Alternative für den
akuten Fischtest in der Chemikalienprüfung: Der Fischembryotest
lässt sich mit mehreren Spezies durchführen – ein Update
Nach seiner Standardisierung auf nationaler Ebene (DIN 38415-
6, 2001; DIN, 2001) wurde der 48 h-Embryotest mit dem Zebrabärbling
für die Abwasserprüfung bei der ISO zur Normierung
eingereicht. Als Alternative zum akuten Fischtest in der Prüfung
der Toxizität von Chemikalien wird Ende 2005 ein modifiziertes
Protokoll bei der OECD eingereicht. Zu diesem Zweck musste
das ursprünglich für den Zebrabärbling entwickelte Protokoll an
die Bedürfnisse anderer OECD-Testfische wie Medaka (Oryzias
latipes) und Dickkopfelritze (Pimephales promelas) angepasst
werden. Die Ergebnisse der vorliegenden Studie dokumentieren,
dass ein Transfer des Protokolls mit nur geringen Modifikationen
möglich ist und dass die Tests mit den Embryonen der verschiedenen
Fischspezies vergleichbare Daten liefern. Eine
statistische Analyse der existierenden Daten aus dem Fischembryotest
mit dem Zebrabärbling zeigt, (1) dass eine verlässliche
Korrelation zwischen Fischembryotest und akutem
Fischtest besteht, (2) dass der Vertrauensbereich zwar relativ
eng, der Vorhersagebereich aber relativ weit ist. Die Regression
beschreibt daher ausreichend genau die Beziehung zwischen
akutem Fischtest und Fischembryotest, sollte aber nicht als
Vorhersagemodell eingesetzt werden.
Untersuchungen zum Sauerstoffbedarf von Zebrabärblingsembryonen
zeigen, dass sich die Embryonen an einen weiten
Bereich von Sauerstoffkonzentrationen anpassen können und
selbst bei 2 mg/l Sauerstoff keine Fehlentwicklung zeigen. Zebrabärblingsembryonen
können daher in sehr kleinen Schadstoffvolumina
(100 μl) exponiert werden, was z.B. für die Prüfung
von Schadstoffmetaboliten von großer Bedeutung ist. Dechorionierungsstudien
deuten darauf hin, dass das Chorion mit
steigender Lipophilie der Testsubstanz eine zunehmende Barriere
für die Aufnahme durch den Embryo darstellt.
Schließlich werden Beispiele aufgeführt, wie durch die Integration
weiterer Endpunkte in das Protokoll des Fischembryotests
der Anwendungsbereich auf z.B. Untersuchungen zur Sedimenttoxizität,
zur Gentoxizität und zur Mutagenität ausgedehnt
werden kann.
2 Animals, materials and
methods
2.1 Fish, fish maintenance and
spawning procedure
Table 2 gives a summary of the fish
species used for the present study as well
as specific maintenance and exposure
conditions. All fish used for breeding
were taken from the fish stocks maintained
at the Department of Zoology
University of Heidelberg, Germany. The
zebrafish (“Westaquarium” strain) had
originally been obtained from H.J. Pluta
(Federal Environment Agency, Berlin,
Germany), the fathead minnow stock
was a gift from R. Länge (Schering AG,
Berlin, Germany), and the wild type
medaka were derived from stock from
J. Wittbrodt (EMBL – European Molecular
Biology Laboratory, Heidelberg,
Germany) .
2.1.1 Zebrafish
The zebrafish (Danio rerio, Hamilton-
Buchanan 1822; Fig. 1) is a small benthopelagic
cyprinid fish originating from
the Ganges River system, Burma, the
Malakka peninsula and Sumatra (Eaton
and Farley, 1974; Talwar and Jhingran,
1991) with a mean adult length between
3 and 5 cm. In both soft and hard waters,
zebrafish grow quickly at 26°C and complete
their life-cycle within three months.
The species is easily obtainable, inexpensive,
readily maintainable and, under appropriate
conditions, yields a large number
of non-adherent, fully transparent
eggs (Laale, 1977). The zebrafish has become
a major model in neurobiology and
toxicology as well as in general molecular
and developmental biology (Ekker and
Akimenko, 1991; Goolish et al., 1999;
Hisaoka and Battle, 1958; Kimmel et al.,
1995; Laale, 1977; Lele and Krone, 1996;
สรุปหลังจากที่มาตรฐานระดับชาติในประเทศเยอรมัน (DIN38415-6, 2001 ดิน 2001) 48 h น้ำเสียทดสอบทดสอบกับปลาม้าลายส่งแล้ว (ปลาซิวใบไผ่ rerio) โคลนสำหรับมาตรฐานกับ ISO เป็นทางเลือกที่ปกติเฉียบพลัน (96 h)ทดสอบปลา อ่อนปลาแก้ไขทดสอบจะถูกส่งไปOECD สำหรับทดสอบสารเคมีในช่วงปลายปี 2005 สำหรับนี้ โพรโทคอเดิมออกแบบมาสำหรับปลาม้าลายถูกดัดแปลงให้เหมาะสมกับความต้องการยังพันธุ์อื่น ๆ OECD, medaka ได้แก่ (latipes สกุลออรีเซียส)และปลาซิว fathead (Pimephales promelas) เอกสารผลลัพธ์ที่ถ่ายโอนโพรโทคอลได้ มีการปรับเปลี่ยนเพียงเล็กน้อยเท่านั้นข้อมูลที่ได้จากตัวอ่อนจากการทดสอบพันธุ์สามจะเปรียบเทียบได้ วิเคราะห์ทางสถิติของตัวอ่อนปลาม้าลายที่มีอยู่ข้อมูลความเป็นพิษทำให้เกิดบทสรุป (1) ว่า มีความน่าเชื่อถือความสัมพันธ์ระหว่างการทดสอบตัวอ่อนปลาและทดสอบปลาเฉียบพลัน(2) ว่า สายพานความเชื่อมั่นของเส้นถดถอยคือค่อนข้างขนาดเล็ก แต่ว่า ช่วงทำนายกว้างค่อนข้าง การถดถอยจึง เหมาะสมที่จะอธิบายความสัมพันธ์ระหว่างปลาเฉียบพลันและเอ็มบริโอ LC50 ด้วยความมั่นใจดี แต่เป็นน้อยที่เหมาะสมเป็นการคาดเดาเปิดเผยการสืบสวนในความต้องการออกซิเจนของปลาม้าลายโคลนว่า จะปรับให้เข้ากับช่วงกว้างของระดับออกซิเจน และอยู่รอดที่ความเข้มข้น 2 mg/l โดย malformations ปลาม้าลายโคลนดังนั้นสามารถแสดงในไดรฟ์ toxicant ขนาดเล็กมาก (100Μl), ซึ่งเป็นที่สนใจโดยเฉพาะสำหรับการทดสอบ metabolitesบ่งชี้การศึกษา Dechorionation กับโคลนปลาม้าลายเก่า 48 hที่ทำงานอุปสรรคของ chorion เพิ่มขึ้นกับการlipophilicity ของบริเวณทดสอบ ในที่สุด ให้ตัวอย่างเป็นให้ปลายทางเพิ่มเติมว่าสามารถรวมอยู่ในปลาอ่อนทดสอบโพรโทคอลเพื่อขยายขอบเขตของ ให้ความเป็นพิษของตะกอนเช่นประเมิน หรือ genotoxicity และการทดสอบการศึกษาต่อทางเลือกในระยะเฉียบพลันปลา LC50 ทดสอบประเมินสารเคมี:การทดสอบความเป็นพิษของตัวอ่อนปลาไปหลายชนิดการปรับปรุงThomas Braunbeck เมลา Böttcher, Henner Hollert, Thomas Kosmehl อี Lammer, Erik Leistเครื่องหมายรูดอล์ฟและ Nadja Seitzกลุ่มพิษวิทยา ภาควิชาสัตววิทยา มหาวิทยาลัยไฮเดลเบิร์ก D-ไฮเดลเบิร์กและนิเวศวิทยาZusammenfassung: เอาฟ์ dem Weg zu einer für ทางเดนakuten Fischtest ใน der Chemikalienprüfung: Der Fischembryotestlässt durchführen Spezies sich mit mehreren – ไอน์ปรับปรุงNach seiner Standardisierung เอาฟ์ nationaler Ebene (ดิน 38415-6, 2001 ดิน 2001) wurde der 48 h Embryotest mit dem Zebrabärblingfür die Abwasserprüfung bei der ISO zur Normierungeingereicht ทางเลือกยังซุม akuten Fischtest ใน der Prüfungder modifiziertes ไอน์ wird Ende 2005 Toxizität ฟอน ChemikalienProtokoll bei der OECD eingereicht Zu diesem Zweck musstedas ursprünglich für เดน Zebrabärbling entwickelte Protokoll การตาย Bedürfnisse anderer OECD Testfische วีไว Medaka (สกุลออรีเซียสangepasst Dickkopfelritze (Pimephales promelas) แดน latipes)werden ตาย Ergebnisse der vorliegenden Studie dokumentierendass ไอน์โอน des Protokolls mit nur geringen Modifikationendass möglich ist แดนตาย ทดสอบ mit den Embryonen der verschiedenenFischspezies vergleichbare Daten liefern Einestatistische วิเคราะห์ der existierenden Daten ต. dem Fischembryotestmit dem Zebrabärbling zeigt, verlässliche eine dass (1)Akutem Korrelation zwischen Fischembryotest แดนFischtest besteht, relativ (2) dass der Vertrauensbereich zwareng, der Vorhersagebereich aber relativ weit ist ตาย ถดถอยตาย genau ausreichend daher beschreibt Beziehung zwischenแดน Fischtest akutem Fischembryotest, sollte aber nicht ยังVorhersagemodell eingesetzt werdenซุม Untersuchungen Sauerstoffbedarf ฟอน Zebrabärblingsembryonenzeigen, dass sich weiten einen Embryonen ตายBereich ฟอน Sauerstoffkonzentrationen anpassen können แดนselbst ปี่ 2 mg/l Sauerstoff keine Fehlentwicklung zeigen Zebrabärblingsembryonendaher können ใน sehr kleinen Schadstoffvolumina(100 μl) exponiert werden ถูกตาย z.B. für PrüfungSchadstoffmetaboliten ฟอนฟอน großer Bedeutung ist Dechorionierungsstudiendeuten darauf หิน das dass Chorion mitsteigender zunehmende eine Lipophilie der Testsubstanz Barrierefür die Aufnahme durch den อ่อน darstelltSchließlich werden Beispiele aufgeführt วีไว durch ตายรวมweiterer Endpunkte ใน das Protokoll เด Fischembryotestsder Anwendungsbereich เอาฟ์ z.B. Untersuchungen zur Sedimenttoxizitätzur Gentoxizität แดน zur Mutagenität ausgedehntwerden kann2 สัตว์ วัสดุ และวิธีการ2.1 ปลา ปลาบำรุงรักษา และขั้นตอนการวางไข่ตารางที่ 2 สรุปปลาให้พันธุ์ที่ใช้ในการศึกษาปัจจุบันเช่นการบำรุงรักษาและความเสี่ยงเงื่อนไขการ ใช้สำหรับการเพาะพันธุ์ปลาทั้งหมดได้มาจากหุ้นปลารักษาที่ภาควิชาสัตววิทยามหาวิทยาลัยไฮเดลเบิร์ก เยอรมนี ที่ปลาม้าลาย (ต้องใช้ "Westaquarium") ได้เดิม ได้รับจาก H.J. Pluta(หน่วยงานรัฐบาลกลางสิ่งแวดล้อม เบอร์ลินเยอรมนี), หุ้นปลาซิว fatheadได้ของขวัญจาก R. Länge (เชริง AGเบอร์ลิน เยอรมัน), และชนิดของป่าmedaka ถูกได้มาจากสต็อกเจ Wittbrodt (EMBL – ยุโรประดับโมเลกุลปฏิบัติการชีววิทยา ไฮเดลเบิร์กเยอรมนี)2.1.1 ปลาม้าลายปลาม้าลาย (rerio ปลาซิวใบไผ่ ฮามิลตัน-Buchanan ทำยอด 1822 Fig. 1) เป็น benthopelagic ขนาดเล็กปลากลุ่มที่เกิดจากระบบแม่น้ำคงคา พม่า การเพนนินซูล่าคอฟฟี่ช็อปและสุมาตรา (เอตันและ Farley, 1974 Talwar และ Jhingran1991) มีความยาวเฉลี่ยผู้ใหญ่ระหว่าง3 และ 5 ซม. ในน้ำอ่อน และแข็งปลาม้าลายเติบโตอย่างรวดเร็ว ที่ 26° C และสมบูรณ์-วัฏจักรภายในสามเดือนชนิดมีสิทธิได้รับง่าย ไม่ แพงพร้อม maintainable และ ที่เหมาะสมเงื่อนไข ทำให้เป็นจำนวนมากของไม่-adherent อย่างโปร่งใสไข่ (Laale, 1977) ปลาม้าลายได้กลายเป็นแบบจำลองหลักใน neurobiology และพิษวิทยาระดับโมเลกุลเช่นว่าโดยทั่วไปและชีววิทยาการเจริญ (Ekker และAkimenko, 1991 Goolish et al., 1999Hisaoka และสงคราม 1958 คิมเม et al.,1995 Laale, 1977 Lele และโครน 1996
การแปล กรุณารอสักครู่..

สรุป
หลังจากที่มีมาตรฐานในระดับชาติในประเทศเยอรมนี (DIN
38415-6, 2001; DIN, 2001), การทดสอบการทดสอบน้ำเสีย 48 ชั่วโมงกับ zebrafish
(Danio rerio) ตัวอ่อนถูกส่งมาสำหรับมาตรฐาน
มาตรฐาน ISO ในฐานะที่เป็นทางเลือกในการเฉียบพลันทั่วไป (96 ชั่วโมง)
การทดสอบปลาทดสอบตัวอ่อนปลาปรับเปลี่ยนจะถูกส่งไปยัง
กลุ่มประเทศ OECD สำหรับการทดสอบสารเคมีในช่วงปลายปี 2005 สำหรับเรื่องนี้ แต่เดิมเป็นโปรโตคอล
ที่ออกแบบมาสำหรับ zebrafish ถูกดัดแปลงเพื่อให้พอดีกับความต้องการยังมี
อื่น ๆ ชนิดของ OECD คือ Medaka (Oryzias latipes)
และปลาซิวหัวโต (Pimephales promelas) ผลเอกสาร
ว่าการโอนโปรโตคอลเป็นไปได้ที่มีการปรับเปลี่ยนเพียงเล็กน้อย.
ข้อมูลที่ได้จากการทดสอบตัวอ่อนที่มีสามชนิด
ที่มีการเทียบเคียง การวิเคราะห์ทางสถิติของตัวอ่อนที่มีอยู่ zebrafish
ข้อมูลความเป็นพิษส่งผลให้ข้อสรุปที่ (1) ว่ามีความน่าเชื่อถือและ
ความสัมพันธ์ระหว่างการทดสอบตัวอ่อนปลาและทดสอบปลาเฉียบพลัน
(2) ความเชื่อมั่นว่าเข็มขัดของสายการถดถอยค่อนข้าง
เล็ก แต่ที่ ช่วงคาดการณ์ที่ค่อนข้างกว้าง การถดถอย
จึงดูเหมือนว่าเหมาะสมที่จะอธิบายความสัมพันธ์
ระหว่างปลาเฉียบพลันและตัวอ่อน LC50 การมีความเชื่อมั่นที่ดี แต่เป็น
ที่เหมาะสมน้อยกว่าที่คาดการณ์รูปแบบ.
เข้ามาสอบสวนความต้องการออกซิเจนของตัวอ่อน zebrafish เปิดเผย
ว่าพวกเขาปรับตัวเข้ากับความหลากหลายของระดับออกซิเจนและอยู่รอด
ที่ความเข้มข้น 2 มิลลิกรัม / ลิตรโดยไม่ผิดปกติ ตัวอ่อน zebrafish
จึงสามารถสัมผัสสารพิษในปริมาณที่น้อยมาก (100
ไมโครลิตร) ซึ่งเป็นที่น่าสนใจโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการทดสอบสาร.
การศึกษา Dechorionation 48 ชั่วโมงตัวอ่อน zebrafish เก่าแสดงให้เห็น
ว่าการทำงานอุปสรรคของการเพิ่มขึ้น Chorion กับ
lipophilicity ของการทดสอบ สารประกอบ ในที่สุดตัวอย่างจะได้รับเป็น
วิธีการที่ปลายทางเพิ่มเติมสามารถรวมอยู่ในปลา
ตัวอ่อนโปรโตคอลการทดสอบที่จะขยายขอบเขตของการเช่นตะกอนพิษ
หรือการประเมินพันธุกรรมและการทดสอบฤทธิ์ก่อกลายพันธุ์.
ต่อทางเลือกสำหรับเฉียบพลัน
ปลา LC50 การทดสอบในการประเมินสารเคมี:
ปลา ตัวอ่อนการทดสอบความเป็นพิษไป
หลายสายพันธุ์ - ปรับปรุง
Braunbeck โทมัส, เมลานีBöttcher, Henner Hollert โทมัส Kosmehl อีวา Lammer เอริก Leist,
รูดอล์ฟและมาร์ค Nadja Seitz
น้ำนิเวศวิทยาและพิษวิทยากลุ่มภาควิชาสัตววิทยามหาวิทยาลัยไฮเดลเบิร์ก, D-ไฮเดลเบิร์ก
Zusammenfassung: Auf dem Weg zu einer ทางเลือกfürรัง
akuten Fischtest ในเดอร์Chemikalienprüfung: Der Fischembryotest
lässt sich mit mehreren Spezies durchführen - ein ปรับปรุง
Nach seiner Standardisierung auf nationaler Ebene (DIN 38415-
6, 2001; DIN, 2001) wurde เดอร์ 48 H- Embryotest mit พวกZebrabärbling
fürตายAbwasserprüfung bei der ISO ซู Normierung
eingereicht Als ทางเลือก zum akuten Fischtest in der Prüfung
เดอร์ฟอนToxizität Chemikalien wird Ende 2005 ein modifiziertes
Protokoll bei der OECD eingereicht Zu diesem Zweck musste
das ursprünglichfürรังZebrabärbling entwickelte Protokoll
ตายBedürfnisse anderer OECD-Testfische นอน Medaka (Oryzias
latipes) และ Dickkopfelritze (Pimephales promelas) angepasst
werden Die Ergebnisse เดอร์ vorliegenden Studie dokumentieren,
Dass ein โอน des Protokolls mit nur geringen Modifikationen
ist möglichและทดสอบตาย Dass mit der ถ้ำ Embryonen verschiedenen
Fischspezies vergleichbare Daten liefern Eine
statistische วิเคราะห์ der existierenden Daten ออสเตรเลียพวกเขา Fischembryotest
mit พวกZebrabärbling zeigt (1) Dass Eine verlässliche
Korrelation zwischen Fischembryotest คาดไม่ถึง akutem
Fischtest besteht (2) Dass เดอร์ Vertrauensbereich zwar relativ
Eng, เดอร์ Vorhersagebereich aber relativ weit ist Die ถดถอย
beschreibt Daher ausreichend genau ตาย Beziehung zwischen
akutem Fischtest คาดไม่ถึง Fischembryotest, sollte aber nicht ทางการ
Vorhersagemodell eingesetzt werden.
Untersuchungen zum Sauerstoffbedarf ฟอนZebrabärblingsembryonen
zeigen, Dass sich ตาย Embryonen einen weiten
Bereich ฟอน Sauerstoffkonzentrationen anpassen könnenคาดไม่ถึง
selbst bei 2 mg / l Sauerstoff keine Fehlentwicklung zeigen Zebrabärblingsembryonen
können Daher ใน sehr kleinen Schadstoffvolumina
(100 ไมโครลิตร) werden exponiert เป็น zB fürตายPrüfung
ฟอนฟอน Schadstoffmetaboliten großer Bedeutung ist Dechorionierungsstudien
deuten darauf ฮิน, Dass das Chorion mit
der steigender Lipophilie Testsubstanz Eine zunehmende Barriere
fürตาย Aufnahme durch รังตัวอ่อน darstellt.
Schließlich werden Beispiele aufgeführt, นอน durch บูรณาการตาย
weiterer Endpunkte ใน das Protokoll des Fischembryotests
เดอร์ Anwendungsbereich auf zB Untersuchungen Sedimenttoxizitätซู,
ซูGentoxizität และซูMutagenität ausgedehnt
werden kann. 2 เลี้ยงสัตว์, วัสดุและวิธีการ2.1 ปลาบำรุงรักษาปลาและขั้นตอนการวางไข่ตารางที่ 2 ให้สรุปของปลาสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษาในปัจจุบันได้เป็นอย่างดีการบำรุงรักษาที่เฉพาะเจาะจงและการสัมผัสเงื่อนไข ปลาทั้งหมดที่ใช้สำหรับการเพาะพันธุ์ถูกนำมาจากปลาไว้ที่ภาควิชาสัตววิทยามหาวิทยาลัยไฮเดลเบิร์กเยอรมนี zebrafish ("Westaquarium" สายพันธุ์) ได้รับการเดิมที่ได้รับจาก HJ Pluta (สำนักงานสิ่งแวดล้อมแห่งชาติ, เบอร์ลิน, เยอรมนี) โง่หุ้นสร้อยเป็นของขวัญจากอาร์มีเหตุมีผล (Schering แบงก์กรุงเบอร์ลินประเทศเยอรมัน) และป่าประเภทMedaka ได้มาจากสต็อกจากเจ Wittbrodt (EMBL - โมเลกุลยุโรปห้องปฏิบัติการชีววิทยาไฮเดลเบิร์ก. เยอรมนี) 2.1.1 Zebrafish zebrafish (Danio rerio, Hamilton- . บูคานัน 1822; รูปที่ 1) เป็นสภาพเล็กปลา cyprinid ที่มาจากระบบแม่น้ำคงคาพม่าMalakka คาบสมุทรและสุมาตรา (อีตันและฟาร์ลี่ย์, 1974; Talwar และ Jhingran, 1991) ที่มีความยาวเฉลี่ยระหว่างผู้ใหญ่3 และ 5 ซม. ทั้งในน้ำอ่อนและแข็ง, การเจริญเติบโตอย่างรวดเร็ว zebrafish ที่ 26 องศาเซลเซียสและดำเนินการต่อวงจรชีวิตของพวกเขาภายในสามเดือน. สายพันธุ์คือหาได้ง่ายราคาไม่แพงพร้อมการบำรุงรักษาและภายใต้ความเหมาะสมเงื่อนไขอัตราผลตอบแทนเป็นจำนวนมากที่ไม่สามารถยึดเกาะได้อย่างเต็มที่ โปร่งใสไข่ (Laale, 1977) zebrafish ได้กลายเป็นรูปแบบที่สำคัญในชีววิทยาและพิษวิทยาเช่นเดียวกับในโมเลกุลทั่วไปชีววิทยาและการพัฒนา (Ekker และAkimenko 1991; Goolish et al, 1999;. Hisaoka และ Battle, 1958; คิมเมล, et al. 1995; Laale 1977 ; Lele และ Krone 1996;
การแปล กรุณารอสักครู่..

หลังจากสรุปให้ได้มาตรฐานในระดับชาติในเยอรมัน ( DIN
38415-6 , 2001 ; DIN , 2001 ) , 48 ชั่วโมงจากการทดสอบการทดสอบกับปลาม้าลาย
( ปลาซิวใบไผ่ rerio ) ตัวอ่อนที่ถูกส่งเพื่อให้ได้มาตรฐาน
ISO เป็นทางเลือกที่แบบเฉียบพลัน ( 96 ชั่วโมง )
ทดสอบปลา , ปลาดัดตัวอ่อนทดสอบจะถูกส่งไปยัง
OECD สำหรับการทดสอบสารเคมีในปลายปี 2005 สำหรับเรื่องนี้โพรโทคอลเดิม
ออกแบบมาสำหรับปลาม้าลายถูกดัดแปลงให้พอดียังต้องการ
ชนิดหรืออื่น ๆ ได้แก่ เมดากะ ( กรมอุทกศาสตร์ latipes )
คนโง่และสร้อย ( pimephales promelas ) ผลลัพธ์เอกสาร
ที่โอนโปรโตคอลที่เป็นไปได้ ด้วยการปรับเปลี่ยนเพียงเล็กน้อย ข้อมูลที่ได้จากการทดสอบด้วยคน
มีทั้ง 3 ชนิดเทียบเท่า การวิเคราะห์ทางสถิติของ
ตัวอ่อนที่มีอยู่ปลาม้าลายข้อมูลความเป็นพิษ ส่งผลสรุป ( 1 ) ว่ามีความสัมพันธ์ที่เชื่อถือได้
ระหว่างปลาตัวอ่อนการทดสอบและการทดสอบปลาแหลม
( 2 ) ความเชื่อมั่นในแถบของเส้นถดถอยค่อนข้าง
ขนาดเล็ก แต่ที่ช่วงการคาดการณ์ที่ค่อนข้างกว้าง สมการ
จึงเห็นว่าเหมาะสม เพื่ออธิบายความสัมพันธ์ระหว่างปลา
เฉียบพลันและตัวอ่อน ) มีความมั่นใจดี แต่เป็น
น้อยที่เหมาะสมเป็นแบบจำลองการทำนาย .
สืบสวนในความต้องการออกซิเจนของปลาม้าลายตัวเปิดเผย
ที่พวกเขาปรับให้เข้ากับความหลากหลายของระดับออกซิเจนและอยู่รอด
ที่ความเข้มข้น 2 มิลลิกรัมต่อลิตรโดยไม่ต้องพิกลพิการ . ปลาม้าลายตัว
จึงสามารถเปิดเผยในปริมาณน้อยมากเป็นพิษ ( 100
μ L ) ซึ่งเป็นประโยชน์เฉพาะสำหรับการทดสอบสาร .
dechorionation ศึกษากับเลี้ยงปลาม้าลายชั่วโมง 48 เก่าบ่งชี้
ที่กั้นการทำงานของหนอนเจาะลำต้นอ้อยเพิ่มด้วย
lipophilicity ของการทดสอบสาร ในที่สุด ตัวอย่างจะได้รับเป็นข้อมูล
วิธีการเพิ่มเติมสามารถรวมอยู่ในปลา
ตัวอ่อนทดสอบโปรโตคอลเพื่อขยายขอบเขตของมันเช่นการตะกอนพิษ
การประเมินหรือทดสอบสารก่อกลายพันธุ์ (
.ที่มีต่อทางเลือกสำหรับเฉียบพลัน
ปลา ) ทดสอบในการประเมินทางเคมี :
ปลาตัวอ่อนหลายสายพันธุ์และการทดสอบความเป็นพิษไป
อัพเดท โทมัส braunbeck เมลานี B ö ttcher Henner hollert , โทมัส kosmehl EVA lammer อีริค leist
มาร์ค , รูดอล์ฟและนัดจาไซต์ส
นิเวศวิทยาทางน้ำและพิษวิทยา ภาควิชาสัตววิทยา กลุ่ม มหาวิทยาลัย Heidelberg d-heidelberg
zusammenfassung :เกี่ยวกับเด็มถนนไปยัง einer ทางเลือก F ü r เดน
akuten fischtest ในเดอร์ chemikalienpr üฟุง : เดอร์ fischembryotest
L และ SST เป็น MIT mehreren spezies durchf ü hren – an update
ตามที่ seiner standardisierung เกี่ยวกับ nationaler ebene ( DIN 38415 -
6 , 2001 ; DIN , 2001 ) จากเดอร์ 48 h-embryotest มิตร DEM และ rbling zebrab
f ü r ตาย abwasserpr üฟง bei der ISO ซัวร์ normierung
eingereicht .ถ้าทางเลือกเช่น akuten fischtest ในเดอร์ PR üฟง
เดอร์ toxizit และ T ฟอน chemikalien เจ้าเพี้ยนตอนจบ 2005 a modifiziertes
protokoll bei der OECD eingereicht . ถึงปีนี้ zweck musste
F ü r das urspr ü nglich เดน zebrab และ rbling entwickelte protokoll
ตายเป็นเตียงและ rfnisse แอนเดอเรอร์ OECD testfische วี Medaka ( กรมอุทกศาสตร์
latipes ) และ dickkopfelritze ( pimephales promelas ) angepasst
werden .ตาย ergebnisse เดอร์ งานชิ้นนี้ dokumentieren
a การ , โอนดาส des protokolls MIT เท่านั้น geringen modifikationen
M ö glich Dass ตาย IST และการทดสอบด้วยเดน embryonen เดอร์ verschiedenen
fischspezies vergleichbare daten ใหม่ . Eine
statistische วิเคราะห์ เดอ existierenden daten AUS DEM mit dem และ fischembryotest
zebrab rbling zeigt ( 1 ) ดาส Eine verl และ ssliche
korrelation ระหว่าง fischembryotest และ akutem
fischtest besteht ( 2 ) ดาสเดอ vertrauensbereich zwar relativ
เ เดอร์ vorhersagebereich แต่ relativ weit IST ตาย )
beschreibt จึง ausreichend genau ตาย beziehung ระหว่าง
akutem fischtest และ fischembryotest โซลเต้ ลแต่ลูกพี่ลูกน้อง , ALS
vorhersagemodell eingesetzt werden .
untersuchungen ซุม zebrab และ rblingsembryonen
sauerstoffbedarf ฟอนzeigen Dass ตาย , เห็น embryonen เป็นที่ weiten
bereich ฟอน sauerstoffkonzentrationen anpassen K ö nnen และ
selbst เป่ย 2 มิลลิกรัมต่อลิตร sauerstoff keine fehlentwicklung zeigen . zebrab และ rblingsembryonen
K ö nnen ด้วยเหตุนี้ใน sehr kleinen schadstoffvolumina
( 100 μ L ) exponiert werden f ü r , ก. ตาย PR üฟง
schadstoffmetaboliten ฟอนฟอน Gro ßเอ้อ bedeutung IST dechorionierungsstudien
deuten ที่จะศึกษาภาพหัวหินดาสดาส หนอนเจาะลำต้นอ้อยด้วย
steigender lipophilie เดอร์ testsubstanz Eine zunehmende บาร์รีเย่ร์
f ü r ตาย aufnahme โดยเดนตัวอ่อน darstellt .
schlie ß Lich werden beispiele aufgef ü HRT วีโดยตายรวม
weiterer endpunkte ใน Das protokoll des fischembryotests
เดอร์ anwendungsbereich ไปยัง ก. untersuchungen ซัวร์ sedimenttoxizit และ T
T และ mutagenit gentoxizit ซัว และ เซอร์ และ ausgedehnt T
werden กาน
2 สัตว์วัสดุและวิธีการ
สำหรับปลา , การบำรุงรักษาและวางไข่ปลา
ตาราง 2 ขั้นตอนให้สรุปปลา
ชนิดใช้สำหรับการศึกษาด้วยอย่างเฉพาะเจาะจงและเงื่อนไขการรักษา
ปลาทั้งหมดที่ใช้นำมาจากปลาพันธุ์
หุ้นรักษาที่ภาควิชาสัตววิทยา
มหาวิทยาลัยไฮเดลเบิร์ก , เยอรมนี ปลาม้าลาย (
" westaquarium " สายพันธุ์ ) มีเดิมที่ได้รับจาก h.j. pluta
( สหพันธ์องค์การสิ่งแวดล้อม , เบอร์ลิน ,
เยอรมนี ) , คนโง่สร้อยหุ้น
คือของขวัญจาก R . L และแง ( เชริ่ง
, เบอร์ลิน , เยอรมนี ) และ เมดากะ ประเภท
ป่ามาจากหุ้นจาก
J
wittbrodt ( สัตว–ยุโรปโมเลกุลชีววิทยาห้องปฏิบัติการ Heidelberg เยอรมนี )
.
ตัวปลาม้าลายปลาม้าลาย ( ปลาซิวใบไผ่ rerio , Hamilton Buchanan 1822 -
; ภาพประกอบ1 ) มีขนาดเล็ก benthopelagic
วงศ์ปลาตะเพียนปลาที่มาจาก
แม่น้ำคงคาระบบ , พม่า ,
มะละกาและคาบสมุทรสุมาตรา ( Eaton
และ ฟาร์เลย์ , 1974 ; talwar และ jhingran
, 1991 ) กับหมายถึงผู้ใหญ่ ความยาวระหว่าง
3 และ 5 เซนติเมตร ทั้งอ่อนและแข็งน้ำ
ปลาม้าลายเติบโตอย่างรวดเร็วที่ 26 ° C และสมบูรณ์วงจรชีวิตของพวกเขาภายในสามเดือน
.
ชนิดได้มา ง่ายๆ ราคาไม่แพง
พร้อมสนับสนุน และภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม
ผลผลิตจำนวนมากไม่ติด ไข่โปร่งใสเต็มที่
( laale , 1977 ) มีปลาม้าลายได้กลายเป็นหลักในชีววิทยาและรูปแบบ
พิษวิทยา รวมทั้งใน
โมเลกุลทั่วไปและชีววิทยา ( เคอร์และ
akimenko , 1991 ; goolish et al . , 1999 ;
hisaoka และการต่อสู้ , 1958 ; Kimmel et al . ,
1995 ; laale , 1977 ; Lele และโครน , 1996 ;
การแปล กรุณารอสักครู่..
